Méthode d'études {2.4} Flashcards
la microscopie fluorescente à super résolution a une résolution 4 fois supérieur a la microscopie optique. En déduire la résolution du microscopie super résolution
50nm car le microscope optique à une résolution de 200nm, on divise alors cette valeur par 4
quel microscope à une résolution de 0,2nm ?
le Microscope Electronique ( ME)
quel est la définition de la résolution ?
distance minimale à laquelle deux points très proches peuvent encore être distingués
un microscope électronique utilise quel source lumineuse ;
- photons
- électrons
- UV
- Lumière blanche
source d’électrons
quel structure du ME permet de produire les électrons ?
le canon à électrons
que permet le filament de tungstene ?
provoque une augmentation de température et entraine l’extraction d’électrons
Le Wehnelt correspond à la cathode ?
vrai
de quoi est composé le canon électrique ?
d’un filament de tungstèene, d’une cathode (Wehnelt) et d’une anode
anode va permettre d’attire les électrons ,
FAUX, c’est la cathode
comment les électrons vont être accélère ?
grâce a l’anode
Quels sont les 6 étapes à effectuer pour une préparation d’un échantillon de microscopie électronique ?
1) Fixation et Post fixation
2) Déshydratation
3) Enrobage
4) Coupe
5) Coloration
6) Evaporation carbone
On utilise le même fixateur en ME et MO ?
faux
a la fin de la fixation le prélèvement est soluble ou insoluble ?
insoluble grâce à la réticulation crée
on utilise quel fixateur lors de la post fixation :
- glutaraldéhyde
- paraffine
- tétroxyde d’osmium
tétroxyde d’osmium + glutaraldéhyde
le fixateur en ME pénètre lentement ?
vrai
le tétroxyde de sodium permet de créer une fixation avec des lipides, glucides et protéines ?
faux, elle a pour but de continuer la fixation
pourquoi une étape de déshydratation est obligatoire avant l’inclusion en résine ?
pacque le prélèvement est recouvert d’eau qui est non-miscible à la résine ?
la déshydratation se fais avec quel produit ? En déduire sa famille ?
elle se fait avec de l’acétone qui est un alcool
que permet l’enrobage ?
d’obtenir un prélèvement dur
quels sont les étapes de l’enrobage ?
indice : 3
- imprégnation
- inclusion
- polymérisation
a quel étape correspond le durcissement de la résine ?
a la polymérisation
que se passe-il pendant l’inclusion ?
on oriente le tissu dans le bloc de résine
a quel étape on infiltre le prelevement dans la résine ?
à l’imprégnation
si on veut réaliser une observation rapide au ME on utilisera la technique manuelle ou automatisée lors de l’enrobage ? Pourquoi ?
la technique automatisé car elle dure moins longtemps
3heures vs 3 jours
Quel est l’inconvénients de la technique automatisé ?
elle ne réalise pas l’étape de l’orientation du tissu “inclusion”
quel est la 4eme étape de préparation à une ME ?
la coupe
la coupe réalise des coupes supérieur à 0,2 um ?
faux, inferieur à 0.2um soit 200nanometre
quels sont les 4 outils utilisé pour la préparation à une coupe ?
le rasoir
le couteau de verre
ultra microtome
perfect loop
pourquoi on on observe le prélèvement au MO avant la coupe ?
pour repérer les zones d’intérêts
avec quel outil on va dégrossir le prélèvement ?
avec le rasoir
que permet l’ultramicrotome ?
de réaliser des coupes ultra fine via un couteau de diamant
L’évaporation de carbone a lieu après la coloration ?
vrai
quel sont les conditions pour avoir un bon contraste ?
bcp de métaux lourds liées à des protéines
si on colores les membranes plasmiques, organites, app de Golgi, on utilise :
- acétate d’uranyle
- citrate de plomb
citrate de plomb
que permet l’évaporation carbone ?
la bonne stabilité de la coupe lors de l’observation
pendant cette étape on va essayer de retirer le carbone sur le prélèvement ?
faux, on va plutôt recouvrir le prélèvement d’une fine couche de carbone
quel est le principal rôle de la ME ?
confirmer un diagnostic
la résine époxy permet de faire des simples observation ?
vrai
