Medios de cultivo y pruebas bioquímicas Flashcards
Técnicas de siembra en placas
- Estria
- Extensión
- Vaciado
- Masivo
Técnicas de siembra en tubo
- Dilución
- Estría
- Punción
Medio de cultivo
Mezcla de sustancias que promueven y sustentan el crecimiento y diferenciación de los organismos. Contiene
- Agua
- Macronutrientes
- Micronutrientes (Mg, Fe, Na, Ca, etc)
- Factores promotores del crecimiento
- Agentes selectivos o diferenciales
- Gelificante
Medios de cultivo
- Agar soya tripticaseína
- Agar sangre
- Agar Eosina Azul de metileno
- Agar chocolate
- Agar Muller- Hilton
- Agar Mc Conkey
- Agar XLD (pilosa- lisina- desoxicolato)
- Agar sulfito bismuto
- Agar tiosulfato citrato (TCBS)
- Agar sal y manitol
- Agar oxford modificado
- Agar Biggy
- Agar entérico de Hektoen
- Agar Mox
Pruebas bioquímicas
- TSI
- LIA (Lisina, Iron, Agar)
- Citrato de Simmons
- Caldo urea
- SIM (Sulfuro, Indol, Movilidad
- MIO (Movilidad, Indol, Ornitina)
Factores principales que afectan crecimiento
- Disponibilidad de nutrientes
- Temperatura
- pH
- Presencia/ausencia O2
Cinética de desarrollo
- Adaptación
- Fase exponencial (multiplicación)
- Fase estacionaria (competencia x nutrientes)
- Muerte celular
Clasificación de los medios de cultivo según la consistencia
- Líquido
- Semisólido
- Sólido
Clasificación de los medios de cultivo según el uso
- Nutritivos
- Enriquecidos: microorganismos exigentes
- De enriquecimiento: inhiben microbiota asociada
- Selectivos: inhibe otros microorganismos
- Diferenciales: diferenciar actividades metabólicas
Agar Muller Hilton
Susceptibilidad antimicrobiana
Agar sangre
Capacidad hemolítica
- B- hemólisis: halo traslúcido (S. aureus)
- a- hemolítico: verde (S. pneumonae)
- y- hemólisis: sin halo
Agar chocolate
- Calentamiento a 56°C
- Glóbulos rojos lisados
- Microorganismos exigentes
Agar Eosina Azul de metileno
- Violeta: fermenta lactosa (Ej. enterobacterias)
- Rosa: no fermenta lactosa
Agar Mc Conkey
- Agente selectivo: cristal violeta y sales biliares
- Bacterias entéricas
- Rosa: fermenta lactosa
- Amarillo/naranja: no fermenta lactosa
Agar XLD (xilosa- lisina- desoxicolato)
- Agente selectivo: desoxicolato
- Shigella, salmonella y E. coli
- Xilosa (menos shigella)
- Lisina (fermentada x salmonella)
- H2S: (= negro =salmonella)
- E. coli (amarillo)
Agar sulfito bismuto
- Salmonella
Agar entérico de Hektoen
- Shigella y Salmonella
- Salmonella = negro (H2S)
- Shigella = verde
Agar TCBS (agar tiosulfato citrato bilis sacarosa)
- Género vibrio
- Amarillo: fermenta
- Verde: no fermenta
Agar sal y manitol
- Staphylococcus
- Amarillo: fermenta manitol
- Rojo: no fermenta manitol
Agar Mox
- Listeria monocytogenes
- Esculina = halo negro/gris
TSI (triple sugar iron)
- Indicador: rojo fenol
- Compuestos principales:
- Lactosa, sacarosa, glucosa
- Tiosulfato sódico
- Lectura: pico (aerobio)/ fondo (anaerobio)
- Arriba: lactosa/sacarosa
- Abajo: glucosa
- A (ácido= amarillo) K (alcalino= rojo)
LIA (lisina Iron Agar)
- Indicador: púrpura de bromocresol
- Compuestos: glucosa y lisina
- Lectura:
- Arriba: glucosa
- Abajo: lisina
- Descarboxilasa: morado
- Desaminasa: rojo
Citrato de Simmons
- Indicador: azul de bromotimol
- Compuesto principal: citrato de Na
- Lectura: enzima citrasa
- Presente: azul
- Ausente: verde
Caldo urea
- Indicador: rojo fenol
- Compuesto principal: urea
- Lectura: enzima ureasa
- Metaboliza: rosa
- No metaboliza: naranja
SIM (sulfide- Indole- Motility)
- Indicador: not tiene
- Compuesto principal:
- Peptona
- Tiosulfato sódico
- Hierro
- Amonio
- Lectura:
- Móvil: aspecto difuminado
- No móvil: traslúcido
- H2S: negro
- Indol: rosa - L. monocytogenes = “sombrilla”, no siempre expresa flagelos (solo a 25°C)
MIO (mothility Indol Ornitina)
- Indicador: púrpura de bromocresol
- Comp. principales: glucosa y ornitina
- Lectura:
- Glucosa (Sí= amarillo)
- Ornitina descarboxilasa (Sí = morado)
- Movilidad: aspecto difuminado
- Indol: anillo rojo
Agar Oxford modificado
- Listeria
Agar Biggy
- Cándida
Unidad formadora de colonias
10^9
Cálculo de las bacterias que había
Bacterias x microlitros x dilución
Ej. D6
(50)x (10)x (10^6)= LOG UFCXml
Agar soya tricapseína
Conteo de colonias
