Lectura Flashcards
Que reacción cataliza la tirosinasa??
Cataliza la O-hidroxilacion de monofenoles en difenoles y oxidación de O-difenoles a O-quinonas utilizando oxígeno molecular
E.C Tirosinasa
1.14.18.1
Ver figura 3 del documento que se describe
Es una representación gráfica de la comparación entre la concentración del 4-fluorofenol y la absorbancia. Permite expresar la absorbancia en unidades de concentración, lo cual es útil para poder calcular el coeficiente de extinción molar
Cómo se define la actividad enzimática en el artículo???
Cómo la unidad de actividad de la tirosinasa equivale a 1 nmol de dopacromo producido por minuto a 30 °C, a partir de L-tirosina. La actividad observada es muy baja, por lo que se emplean unidades relativamente pequeñas
En el caso de S antibioticus y P putida se utilizó una mayor cantidad de proteína
¿De qué manera se justifica este incremento?
Por la incapacidad de estas dos para poder oxidar a 2FP, debido a sus concentraciones bajas de proteína (0.006 y 0.005 mg/ensayo), así que se elevaron las concentraciones de proteína en un 0.011 mg/ensayo para poder detectar actividad hacia 2FP
Que parámetros se ven afectados?
la Vmáx, es básicamente la cantidad de enzima, que se modifica en este caso. Esto repercute en la Km, ya que se relaciona con la mitad de la Vmáx.
Cuál fuente de enzima presenta menos dispersión en los valores de la eficiencia catalítica???
El hongo comercial es la fuente de tirosinasa que presenta menor dispersión en sus valores de eficiencia catalítica
Cuál es el sustrato que presenta los valores más bajos de eficiencias catalíticas?
El sustrato que presenta peores eficiencias catalíticas es el 2-Fluorofenol, ya que es 6.9 y 7.7 menor en comparación con 3FP y 4FP cuando provienen de fuentes bacterianas
Cuál es el valor del sustrato que presenta los valores más bajos de eficiencias catalíticas cuando proviene de los hongos??
eficiencia es 1.5 veces menor con respecto al 3FP
al comparar los valores de las constantes cinéticas de los sustratos 4-fluorofenol, 3,4-difluorofenol y 3-fluorofenol que podemos concluir
Un grupo extractor de electrones adicional, como el flúor, afecta la efectividad de la enzima hacia ese sustrato.
Respecto a Km, se puede observar que, el 4FP tiene mayor afinidad y arroja mejores eficiencias catalíticas.
En cuanto a Kcat, el 4FP tiene menor variación en sus resultados. Por lo que se puede inferir que la posición en “para” del flúor beneficia los parámetros cinéticos y la eficiencia catalítica.
Que clase de enzima es la tirosinasa
- Oxidoreductasa
Que significa número 1 de la tirosinasa en el EC
- Número asignado para cada enzima, siendo éste la tirosinasa.
Que significa el número 14 en el EC de la tirosinasa
Actúa sobre donantes apareados, con incorporación o reducción de oxígeno molecular, a partir de la O-hidroxilación de monofenoles en o-difenoles
Que significa el 18 en la tirosinasa
Relación con otro compuesto como donante e incorporación de un átomo de oxígeno, por medio de O- difenoles a O-quinonas
Cuál es el objetivo de la tabla 1
Es una forma de ordenar y comparar fácilmente los coeficientes de extinción molar de los sustratos usados. Además, sustenta la razón de que la gráfica abarque hasta 0.4 mM, pues el 4-FP solo conserva la linealidad hasta ese punto debido a su bajo ε.