Laboratorio 1 Flashcards
¿Cuál es el objetivo del laboratorio de microbiología?
La identificación del agente causal de la infección a partir de una muestra clínica.
¿Qué se realiza en el examen microscópico de la muestra?
Tinción de Gram que otorga una orientación rápida al clínico.
¿A qué temperatura y por cuánto tiempo se incuban los medios de cultivo sembrados?
A 37°C por 16 a 24 horas.
¿Cuál es la importancia de la bioseguridad en el laboratorio?
Proteger la salud de las personas y evitar la contaminación del ambiente.
¿Qué tipo de riesgos se identifican en el laboratorio?
- Riesgo por agentes biológicos
- Riesgo por agentes químicos
- Riesgo por agentes físicos
¿Cuál es una medida mínima de bioseguridad en el laboratorio?
Uso obligatorio del delantal abotonado.
¿Qué es la esterilización?
Proceso que lleva a la eliminación absoluta de microorganismos en superficies inanimadas.
Nombre dos métodos de esterilización física.
- Calor seco
- Calor húmedo
¿Cuál es el objetivo de la siembra microbiológica?
Obtener desarrollo de colonias aisladas para la identificación de las bacterias.
¿Qué es la siembra en cuadrantes?
Método que pretende obtener colonias aisladas diseminando la muestra en diferentes zonas.
¿Cómo se realiza una siembra cuantitativa?
Se siembra una cantidad conocida de muestra y se cuenta el número de colonias.
¿Qué permite la observación macroscópica de las colonias?
Un acercamiento en la identificación de los géneros bacterianos.
¿Qué es la microscopía directa al fresco?
Observación de una gota de muestra clínica sin utilizar tinciones.
¿Qué técnica es la más importante en microbiología para clasificar bacterias?
La tinción de Gram.
¿Qué color adquieren las bacterias Gram positivas tras la tinción de Gram?
Azul.
¿Qué color adquieren las bacterias Gram negativas tras la tinción de Gram?
Rojo o rosado.
¿Qué diferencia en la tinción de Gram hay entre bacterias Gram positivas y Gram negativas?
Gram positivas retienen el colorante debido a su gruesa capa de peptidoglicán.
¿Cuál es la utilidad clínica de la tinción de Gram?
Permite al clínico sospechar el agente causal de la infección.
¿Qué muestra tiene una sensibilidad clínica del 75% en la tinción de Gram?
Líquido cefalorraquídeo (meningitis).
¿Qué utiliza la tinción de cápsula para evidenciar la presencia de la cápsula microbiana?
Tinta china.
¿Qué colorante se utiliza en la tinción de esporas?
Verde de malaquita.
¿Qué tipo de objetivo se debe usar al observar bacterias con tinción de Gram?
Objetivo de inmersión (100x).
¿Qué objetivo del microscopio se debe utilizar para observar bacterias con tinción de Gram?
Objetivo de inmersión (100x)
Este objetivo es necesario para obtener una observación adecuada de las bacterias.
¿Qué se debe verificar antes de usar el objetivo de inmersión?
Condensador arriba y diafragma abierto
Esto es crucial porque el objetivo de inmersión requiere más luz que los objetivos secos.
¿Cuáles son los pasos iniciales para observar con el microscopio antes de usar el objetivo de inmersión?
Enfocar con objetivos secos progresivamente (4X, 10X, 40X)
Se debe elegir la zona de interés durante este proceso.
¿Cómo se debe colocar el revólver del microscopio al cambiar al objetivo de inmersión?
A mitad de camino entre el objetivo 40X y el de inmersión
Esto evita el contacto de los objetivos secos con el aceite de inmersión.
¿Qué se debe hacer después de colocar una gota de aceite de inmersión?
Colocar el objetivo 100X en contacto con el aceite
El objetivo debe estar casi tocando el portaobjetos.
¿Qué tipo de enfoque se debe usar al observar con el microscopio después de aplicar el aceite de inmersión?
Usar solo el enfoque micrométrico
Esto es para ajustar el foco con precisión.
¿Qué se debe hacer al terminar la observación con el microscopio?
Limpiar cuidadosamente el objetivo retirando el aceite con papel tissue
Esto es importante para mantener el objetivo en buen estado.
¿Qué se debe hacer al rotular una placa de Petri para siembras?
Incluir nombre del microorganismo, grupo y fecha
Esto ayuda a mantener un registro claro de la muestra.
¿Qué técnica se utiliza para la siembra desde medios sólidos a medios sólidos?
Técnica de aislamiento en cuadrantes
Esta técnica permite el crecimiento de colonias aisladas.
¿Cuál es el primer paso en la siembra de una placa de Petri?
Flamear el asa en argolla para su esterilización
Esto previene la contaminación de la muestra.
¿Cómo se debe tomar la muestra con el asa para la siembra?
Tomar una muestra con el asa desde el medio sólido con la bacteria en estudio
Solo se necesita tocar la colonia para obtener suficiente cantidad.
¿Qué se debe hacer después de realizar la siembra en la placa de Petri?
Tapar la placa y flamear el asa para su esterilización
Esto asegura que no haya contaminación posterior.
¿Qué se debe hacer al sembrar de una placa Petri a un tubo con medio líquido?
Flamear el asa y enfriar en zonas sin crecimiento bacteriano
Esto es crucial para evitar contaminación.
¿Qué se debe hacer al destapar un tubo con medio líquido?
Tomar el tapón desde la parte superior
Esto previene que el tapón toque la parte interna del tubo.
¿Qué procedimiento se debe seguir al realizar un frotis bacteriano?
Colocar una gota de agua en el centro de la lámina y mezclar con la muestra
Se debe esparcir la mezcla por la superficie del portaobjeto.
¿Cuánto tiempo se debe dejar reposar el cristal violeta en la tinción de Gram?
2 minutos
Esto permite que el colorante tiña adecuadamente las bacterias.
¿Cuál es el siguiente paso después de aplicar el lugol en la tinción de Gram?
Lavar alternadamente con alcohol-acetona y agua
Este paso es crucial para la decoloración adecuada.
¿Qué colorante se utiliza como contraste en la tinción de Gram?
Safranina al 1%
Este colorante se aplica después de la decoloración.
¿Qué debe hacerse al realizar la tinción de esporas?
Colocar papel absorbente sobre el frotis y agregar colorante verde de malaquita
Esto se realiza en caliente para asegurar que el colorante penetre adecuadamente.
¿Cuánto tiempo se debe calentar la muestra durante la tinción de esporas?
5 minutos
Se debe observar la emisión de vapor durante este tiempo.
¿Qué se debe hacer después de calentar la muestra en la tinción de esporas?
Lavar con agua suavemente para eliminar el colorante verde de malaquita
Esto es importante para preparar la muestra para la observación final.
