Laboratoire #1

Question 1

qu’est ce que la confluence et le degré de confluence

Answer 1

confluence= lorsque les cellules se lient les unes aux autres

degré de confluence= évaluation de la surface totale occupée au fond du flacon par des cellules confluentes. lorsque le taux de confluence est trop grand, la croissance s’arrête.

Question 2

qu’est ce que l’inhibition de contact

Answer 2

c’est le fait que les cellules animales arrêtent de croitrent lorsqu’elles sont accolées les unes sur les autres.

Question 3

dans quel contexte de confluence il faut réaliser un changement de millieu et un passage de cellules

Answer 3

si degré de confluence inférieur à 80%, = changement de milieu

si degré de confluence supérieur à 80% = passage de cellules

Question 4

en quoi consiste un changement de milieu et un passage de milieu

Answer 4

retirer le milieu nutritif du flacon qui est maintenant pauvre en nutriments et rempli de déchets produits par les cellules, et le remplacer par un milieu nutritif frais. (new millieu)

décoller les cellules du flacon et à en transférer une partie dans un autre flacon pour empêcher l’inhibition de contact et assurer croissance maximale.

Question 5

citer les étapes du passage de cellules

Answer 5

1-décollage des cellules avec trypsine
2-coloration des cellules
3-dénombrement des cellules
4-évaluation de la concentration cellulaire
5-transfert cellules dans un autre flacon

Question 6

comment trouver le facteur de dilution

Answer 6

facteur de dilution = (volume de suspension cellulaire + volume du colorant) / volume de suspension cellulaire

Question 7

quel est l’ecart a ne pas depasser lors de l’exercice de comptage

Answer 7

10% (minimum entre 10 et 50 cellules)

Question 8

comment calculer l’écart entre le nb de cellules des chambres A et B1

Answer 8

moyenne du nombre de cellules vivantes chambre A + B X 10%

Question 9

comment calculer la concentration de cellules vivantes

Answer 9

nb de cellules vivantes/ml = Nombre moyen de cellules viables X Facteur de dilution de coloration X 10^4/ml de solution

Question 10

comment connaitre le volume cellulaire a transferer dans le nouveau flacon lors d’un transfert de cellules dans un nouveau flacon

Answer 10

volume a transferer (ml) = (concentration cellulaire desirer X volume final de milieu dans le nouveau flacon) / concentration de la culture initiale