Kap 2. Mikrobiologisk arbetsmetodik

Question 1

Vad menas med:
a) HACCP
b) aseptisk arbetsmetodik
c) desinficering

Answer 1

a) “Hazard analysis and critical control points” innebär att produktionen kontrolleras där den största risken för kontaminering föreligger.
b) sådana arbetsmetoder som i största möjliga utsträckning utesluter mikrobiella föroreningar.
c) Desinficering är en åtgärden som innebär att man reducerar antalet patogena (sjukdomsalstrande) mikroorganismer till ett så lågt antal att de inte utgör något problem under rådande omständigheter.

Question 2

Varför kan man inte definiera sterilitet som “total avsaknad av mikroorganismer”?
Vad är ett vanligt kriterium på att en lösning är steril?

Answer 2

Sterilisering är en åtgärd varigenom ett föremål “befrias” från mikroorganismer, såväl patogena (sjukdomsalstrande) som icke-patogena. I avdödningsdiagrammet ser vi sannolikheten för förekomsten av överlevande bakterier vid en given tidpunkt. Denna sannolikhet sjunker med tiden men är och förblir en sannolikhet. Halten organismer reduceras under en godkännd risknivå (kriterium), ett vanligt värde på risknivån är “en överlevande mikroorganism på 10^6 enheter”. Med det menas att sannolikheten att en livskraftig mikroorganism finns på eller i produkten är lika med eller mindre än en på en miljon.
En behandling som dödar alla levande organismer och virus är alltså teoretiskt omöjligt.

Question 3

Vilka faktorer påverkar antalet överlevande bakterieceller efter en viss tids sterilisering?

Question 4

Hur ser värmeavdödningskurvor ut för mikroorganismer
a) om det finns flera olika sorters organismer i provet med mycket olika värmekänslighet
eller
b) om det krävs flera oberoende “träffar” för att en organism skall dö?

Question 5

Beskriv de viktigaste steriliseringsmetoderna och ange deras användningsområden!

Answer 5

• Värmebehandling: Snabb, billig och effektiv. Används i första hand om materialet inte är värmekänsligt. Pastörisering, kokar, tyndalisation (repterande kokande), UHT(ultra-high temp).
• Filtrering: För värmekänsliga lösningar är filtrering ett alternativ. Filtrering används också av t.ex. luft i sterilbänkar och vatten som används vid beredningar. Funkar på stora bakterier.
• Strålning: Främst vid sterilisering av plastvaror som inte tål värmebehandling men också för att reducera bakteriehalten i vissa livsmedel. Förstör DNA och proteiner.
• Kemisk behandling: Det viktigaste användningsområdet för etylenoxidsterilisering är som alternativ till strålning för plastmaterial som inte tål autokavering. Glutaraldehyd används framför allt till kirurgiska instrument som inte tål autokavering.
  Viktiga egenskaper för en kemisk agent vid sterilisation och desfinikation är:
• Kemikalien ska kunna döda effektivt
• Du borde kunna ta bort kemikalien efter behandling
• Kemikalien borde inte lämna några toxiska biprodukter

Question 6

Varför steriliserar fuktig värme effektivare än torr värme?

Answer 6

Värme
1. Fördelar - enkla, billiga, effektiva penetrerar för att döda mikrober i hela objektet; bästa metoden om material som behandlas inte skadas av värme.
2. Verkningssätt - denaturerar proteiner.
3. Behandlingar.

a. Torr värmesterilisering - ex. flammande slingor, rör i laboratorie- och varmluftsugnar (171oC, 1 timme, 160oC i 2 timmar, 121oC i 16 timmar.); används för att sterilisera material som tål höga temperaturer. & alla material som skadas av fukt.

b. Fuktig värmesterilisering - ex. kokning eller i autoklaver; effektiv vid en lägre temperatur än torr värme och det tränger in snabbare; nackdelar med kokning - dödar inte termofiler, endosporer; autoklav är effektivare än kokning - det använder tryck för att höja temperaturen över kokningstemperaturen (121o C, 15psi, i 20 min.); används för att sterilisera vätskor och material som lätt förkolnas; används i livsmedelsbakning och laboratoriet för att sterilisera glas och media.

c. Pastörisering - begränsar tillväxten, men steriliserar inte; används för att bromsa förstöring av mjölk och mejeriprodukter, vin, öl; fördel: orsakar minimal skada på produkten; utvecklad av Louis Pasteur; standardbehandling: värme till 63oC i 30 min. eller 72oC i 15 sek.

Question 7

Varför räcker det inte alltid med en autoklavering på 20 minuter för att medier etc. ska bli sterila?

Question 8

Vad använder man sporer av Bacillus och Geobacillus till i samband med sterilisering?