Instuderingsfrågor Mikroskopi

Question 1

Vilka våglängder har synligt ljus?

Answer 1

ca 380-700 nm

Question 2

Hur stor är en typisk Eukaryot cell?

Answer 2

5-20 microm

Question 3

Hur stor är en typisk bakterie?

Answer 3

0.1-10 microm

Question 4

Vilka viktiga delar finns det i ett ljusmikroskop, flouresentmikroskop och TEM?

Answer 4

Ljusmicroskop: ocularlins, objektivlins, prov, ljuskälla.
Flouresentmikroskop: Ljuskälla, prov, objektivlins, detector, excitationsfilter, drikoisk spegel, emissions filter.
TEM: elektronkälla, objektivlins, condenserlinser, floureserande skärm, projektor lins, prov

Question 5

Förklara skillnaden mellan förstoring och upplösning

Answer 5

Förstoring är hur stort objektet är genom ex. ett mikroskop jämför med hur det observeras vara utan mikroskopet.
Upplösning är mått på den minsta detalj som kan urskiljas genom då ex. ett mirkoskop.

Question 6

Vad påverkar upplösningen i ett ljusmikroskop?

Answer 6

Ljusetsvåglängd och linsens förmåga att samla ljus

Question 7

Vad innebär det att celler och vävnader är fixerade?

Answer 7

När celler och vävnader har behandlats ex. genom frysning, kemisk för att stoppa/sänka graden som de bryts ner eller ruttnar

Question 8

Varför färgar man celler/vävnad?

Answer 8

För att öka kontrasterna och underlätta för den som tittar att se skillnader mellan olika strukturer. Märka upp det som man vill titta på → vissa färger är mer specifika och andra är generella.

Question 9

Varför behöver man inte färga celler om man använder ett fastkontrastmikroskop?

Answer 9

Man kan kontrollera kontrasterna genom densiteten i provet

Question 10

Vad kan man säga om våglängden hos det exciterande ljuset i förhållande till det emitterande i ett fluorescens alternativt konfokalmikroskop?

Answer 10

Den exciterade elektronen sänder ut ett ljus med längre våglängd. Konfokalmikroskopet är punktbaserat och kan därför excitera på olika djup och ett flouresens mikroskop är inte punktbaserad och därför exciterar hela provet samtidigt.

Question 11

Hur fungerar ett konfokalmikroskop, varför är det bättre än ett fluorescensmikroskop?

Answer 11

Konfokalmikroskop använder sig av en laserstråle och kan därför fånga olika djup på provet. Kofokalmikroskop har lättare att producera 3D bilder av provet än andra mikroskop. Detta är eftersom konfokalmikroskop tillskillnad från flourescensmikroskop punktbelyser och belyser inte hela provet direkt.

Question 12

Vad är det för fördel med ett multifotonmikroskop? Hur fungerar det?

Answer 12

För att motverka fotoblekning så fokuserar man fotoner på just den del av provet som man vill titta på, detta eftersom exponering av fotonerna bleker färgen hos de florofora ämnena. Detta gör att när man går vidare för att kolla på nästa bit inte har ett blekt prov.

Question 13

Vad är digital deconvolution?

Answer 13

Det är när man bildbehandlar en bild för att öka kontrasterna och upplösningen av bilden

Question 14

Vad är en antikropp? Hur används den för att märka in specifika saker i en cell?

Answer 14

Det är protein som binder mot specifika proteiner,antigener och kan inprincip formas efter vad som helst. Därför kan man använda dem genom att skapa en antikropp för just det man vill titta på och sätta fast en flourecent på den och därav se det som märks.

Question 15

GFP har revolutionerat många områden inom biologin (Nobelpris!), vad är GFP och hur används det inom mikroskopering?

Answer 15

Det är ett protein som lyser grönt när man lyser på det med blått eller UV ljus man gentekniskt koppla ihop detta på den cell man vill studera och därav följa celler eller cellersprocesser och därav kan man se cellens livsprocess.

Question 16

Varför ser vi mindre saker med ett elektronmikroskop än med ett ljusmikroskop?

Answer 16

Eftersom elektroner har kortare våglängd än ljus medan synligt ljus långa våglängder är förstora för att fånga de mindre sakerna i cellen. Man kan se de saker som är halva våglängden.

Question 17

Förklara skillnader och likheter mellan TEM och SEM!

Answer 17

Båda är elektronmikroskop och har linser osv. Men TEM där går elektronerna igenom provet medan i SEM exiterar elektronerna elektroner från ytan av provet.

Question 18

Om man använder immunocytokemi för TEM, vad kopplar man till antikroppen, och varför just det?

Answer 18

Man kopplar på fluoroforer för att de avger ljus

Question 19

Vad är en ”optical tweezer”

Answer 19

När man använder en fokuserad laserstråle som en pinsett för att flytta på och tatag mycket små saker i celler.

Question 20

Vilket mikroskop av de vi tagit upp har den bästa upplösningen? Motivera ditt svar.

Answer 20

Det beror ju på vilken förstoring vi talar om men något av elektronmikroskopen som kan urskilja detalj på så små saker skulle jag säga har den bästa upplösningen iaf. på mindra nivå. konfokalmikroskåp om vi pratar om ljus mikroskop med större förstoring eftersom den punktbelyser ett prov och kan därav ge mer upplösning.