II 1Tp 2.0 Flashcards
Quelles cellules sont utilisées dans le TP de cytométrice? (culture, forme,…)
Les U937, des promonocytes leucémiques humains, elles sont cultivées en suspension, ne demande pas de système d’agitation , forme arrondie
Quel est le milieu de culture des U937?
RPMI 1640 supplémenté avec
-10% de sérum de veau fœtal
-de la glutamine
-des antibiotiques (100 U/mL de pénicilline, 100 mg/mL de streptomycine, Gibco)
Quel est l’entretient des U937?
5% de CO2(renforce le système tampon)
37°C
atmosphère saturée en eau
Comment est induit l’apoptose des cellules ?
Par la valinomycine qui ouvre les canaux à potassium (K+)= dépolarisation de la memebrane mitochondriale
Quel fluorochrome est utilisé pour déterminer l’état des cellules ?
Le JC-1
vert = monomère= cellule apoptose
rouge=complexé= cellule non apoptotique
En combien de lots sont divisés les cellules? Quels sont leurs caractéristiques?
3
-CTRL auto fluorescence
-JC-1 (apoptose naturelle+ révèle le potentiel de membrane mitochondrial “normal”) = 96% cellules viables
-JC-1+valinomycine (apoptose provoquée
Que représente la médiane?
La valeur moyenne de l’intensité
Quel est la compensation des tubes?
Elle est la même
Où sont situées les différents types de cellules sur l’histogramme?
poly TP
