Huisvesting en verzorging Flashcards
Wat is het verschil tussen kiemvrije dieren/SPF/germfree/conventionele/gnotobioten?
Kiemvrij: Vrij van levensvatbare organismen, zoals virussen en micro-org.
Germ-free:
1. dieren z volledig steriel
2. Te bekomen door keizersnede (via hysterectomie uit conventionele dieren gehaald en in isolator gehouden) en embryotransfer
3. Enkel te houden in absolute barriere (=isolator) want anders nt meer germ-free
4. In praktrijk: germ-free status moeilijk vol te houden + afwijkingen komen voor.
- gevoelig voor zowel pathogene als apathogene micro-org
Gnotobioten: Microflora en/of -fauna volledig gekend
- onderzoek naar rol v bact bij transformatie v oraal toegediende stoffen (biotransformatie), kankeronderzoek
Bvb: kiemvrije dieren waaraan bewust welbepaalde, exact gekende bacterien w toegediend (vb: Altered Schaeder Flora)
<=> absolute barriere
SPF: Specified Pathogen Free:
- Dieren z vrij v welbepaalde organisme (bvb volgens FELASA aanbevelingen)
- w gehouden in een nt steriele omgeving MAAR toch wel voorzieningen nodig om insleep ongewenste mo tegen te gaan cfr klassieke barriere
Conventionele omstandigheden: gn speciale maatregelen om insleep v pathogene organismen tegen te gaan klassieke spf-barriere:
-zo goed mogelijk gesloten houden v buitenwereld
- ventilatie zo ingesteld dat overdruk bestaat in dierkamers tov buitenwereld
- HEPA gefilterde lucht
-omkleedprocedure voor personeel
- desinfectie v materiaal dat binnengebracht w
- w klassiek ook in isolatoren gehouden
- vaak gebruik v tweegangen-systeem: vuile gang (afvoer v mater uit dierenlokalen) en prpere gang (toegang personeel, voer…) om crosscontaminatie te vermijden
Kiemvrije dieren
Kiemvrij: Vrij van levensvatbare organismen, zoals virussen en micro-org.
Germ-free dieren
Germ-free:
- dieren z volledig steriel
- Te bekomen door keizersnede (hysterectomie) en embryotransfer
- Enkel te houden in absolute barriere (=isolator)
- In praktrijk: germ-free status moeilijk vol te houden + afwijkingen komen voor.
- Germ-free dieren gevoelig voor apathogene en pathogene mo’s
Gnotobiotische dieren
Gnotobioten: Microflora en/of -fauna volledig gekend
Bvb: kiemvrije dieren waaraan bewust welbepaalde, exact gekende bacterien w toegediend (vb: Altered Schaedler Flora: mix v 8 gekende bacterien w aan germ-free muis toegediend => onderzoek GI-stelsel mogelijk
ASF muis in vgl met germ-free muis: asf heeft werkend immuunsysteem, normale gezondheid, normaal werkend GI-stelsel en is dus een goede representatie ve ‘echte’, gwne muis)
SPF dieren (klassiek en conventionele omstandigheden
SPF: Specified Pathogen Free:
- Dieren z vrij v welbepaalde organisme (bvb volgens FELASA aanbevelingen)
- w gehouden in een nt steriele omgeving MAAR toch wel voorzieningen nodig om insleep ongewenste mo tegen te gaan cfr klassieke barriere
- klassieke spf-barriere: 6 maatregelen:
1. zo goed mogelijk gesloten houden v buitenwereld
2. ventilatie zo ingesteld dat overdruk bestaat in dierkamers tov buitenwereld
3. HEPA gefilterde lucht
4. omkleedprocedure voor personeel
5. desinfectie v materiaal dat binnengebracht w
6. vaak gebruik v tweegangen-systeem: vuile gang (afvoer v mater uit dierenlokalen) en propere gang (toegang personeel, voer…) om crosscontaminatie te vermijden
+ soms: micro-isolatie, filtertop (extra filter in deksel kooi, nt aangesloten op ventilatiesysteem)
Conventionele omstandigheden: gn speciale maatregelen om insleep v pathogene organismen tegen te gaan
FELASA
Federation of European Laboratory Animal Science Associations
Wat wordt bedoeld met klassieke barriere?
- Manier v houden v dieren, maatregelen w genomen om insleep pathogenen te vermijden
- Maatregelen (6):
1. zo goed mogelijk gesloten tegenover buitenwereld
2. ventilatie zo ingesteld dat overdruk ontstaat in de dierenkamers tov buitenwereld
3. HEPA-gefilterde lucht
4. omkleedprocedure voor personeel
5. desinfectie materiaal dat binnengebracht w
6. vaak: tweegangensysteem: vuile (afvoer mater dierenlokalen) en propere gang (toegang personeel, voer…) om crosscontaminatie te voorkomen. - Ook mogelijk:
- – Micro-isolatie
- – Filtertop
Wat is filtertop (klassieke barriere)? Voor- en nadeel?
- w soms gedaan
- w op kooi geplaatst
- filtertop is nt aangesloten op ventilatie-unit -> uitwisseling lucht via filter in het deksel
- goed voor bescherming tegen bacterien
- mindder effectief in beschermen tegen virussen
Wat is micro-isolatie?
- w soms gedaan bij klassieke barriere, altijd bij absolute barr
- regelen v ventilatie en inperking op kooiniveau
Wat is absolute barriere?
= isolator
- dieren z volledig steriel (= germ-free)
- micro-isolatie (ventilatie op kooiniveau reguleren): check
Wat is omgekeerde barriere?
- opstellen barriere bij dieren die besmet z -> om te verhinderen dat pathogene org uit kooi ontsnappen
Wat z voordelen v werken met proefdieren met gekende microbiologische kwaliteit?
- voorkomen dat dier ziek w
- reproduceerbare experimenten
- veiliger tov personeel (vrij van zoonoses)
(we weten welke pathogenen er allemaal zouden kunnen voorkomen op dier)
waarom is het noodzakelijk om in een proefdierfaciliteit te ventileren, de temp en de relatieve vochtigheid te beheersen?
Ventilatie:
- overdruk zorgt voor buitenhouden ongewenste mo
- onderdruk om te vermijden dat pathogene mo naar buiten zouden komen
-afvoeren v stof, schadelijke gassen, stank…
Temp: kleine tempschommelingen z nt fataal, maar zorgen wel voor stress/discomfort en verminderde fokprestaties
Relatieve vochtigheid:
- indien te hoog: bemoeilijkt warmte-afgifte, meer groei mo’s (vochtige, warme omgeving is ideaal voor mo’s)
- indien te laag: verhoogde sterfte v jonge muizen voor spenen, oorzaak ringtail bij ratten
Ringtail
= staartnecrose
- komt oa voor bij ratten, muizen…, vnl bij jonge dieren voor het spenen
- wat: annulaire vernauwing vd staart waardoor staart gaat zwellen en uitdrogen => afvallen als heel ernstig
- oorzaken: lage relatieve luchtvochtigheid; hoge temp, dietaire tekorten, genetische aanleg…
Leg uit op welke manier licht v belang kan z in een proefdierfaciliteit
- lichtcyclus: invloed op hormoonhuishouding, gedrag en voortplanting
- permanent hoge lichtintensiteit is nt altijd gewenst bij proefdieren
- overgang dag-nacht bij voorkeur via dimmer; anders kunnen dieren opschrikken
Leg uit op welke manier geluid v belang kan z in proefdierfaciliteit
- mogelijke bron v stress en verstoring met gevolgen voor experimenten en fokresultaten
- zowel aanhoudende te hoge geluidsniveau’s als plotse geluiden doen dieren opschrikken
- veel dieren (hond, muis, dolfijn, vleermuis…) kunnen ultrasone geluiden horen geproduceerd door machines
- achtergrondmuziek kan plotse geluiden opvangen, maar nt te hard zetten
Bespreek voor- en nadelen v open wanden vs gesloten
- Klimaat:
- gesloten: stabieler microklimaat, meer beschutting
- open: meer kans op tocht - contact:
- gesloten wanden: minder kans op contact tss verschillende kooien -> verminderde kans op overdracht infecties - gedrag:
- gesloten (ondoorzichtige) bakken: meer kans op schuwere en moeilijker te controleren dieren
Bespreek voor- en nadelen v vaste bodems vs gaas-of spijlenbodems vs geperforeerde Norylbodems
- Bedding:
- Roosterbodem: gn bedding nodig,
- vaste: dieren liggen in eigen vuil -> meer schoonmaak nodig - Verrijking:
- Rooster: gn bedding nodig-> zeker en vast andere soorten aanbieden (oa ook nestmateriaal aka bedding)
- vaste: biedt meer beschutting en betere ligplaats - poten:
- rooster: risico op pootletsel
=> welke?: rooster vaak nt, eerder vaste bodem. Wel acceptabel: vaste bodem met gaten (bij konijn!)
Manieren om bij roosterbodem faeces en urine te verwijderen
- Lade met strooisel en papier en een plastic goot die (automatisch) gespoeld w
- band uit papier of kunststof die regelmatig ‘afgedraaid’ w
Juist of fout en leg uit: primaten kunnen best in nt te grote kooi gehuisvest w omdat ze anders te moeilijk te vangen z
Fout: voor grote dieren w gebruik gemaakt v volieres/vloerhokken zodat groepshuisvesting en omgevingsverrijking mogelijk z
Juist of fout en leg uit: het is bij SPF dieren nt zo belangrijk om tijdens een operatie eenzelfde mate aandacht te besteden aan het ontsmetten v het chirurgisch veld als bij conventionele dieren
Fout: mens en omgeving zijn bron van bacterien
+ minder immuniteit doordat ze aan minder pathogenen blootgesteld z geweest
Juist of fout en leg uit: wegwerpkooien om knaagdieren te huisvesten kunnen een ecologisch verantwoorde keuze zijn. Bovendien kan het ook fiancieel interessant z omdat met wegwerpkooien dure investeringen in was- en desinfectie-installaties kunnen vermeden w
Fout: totale kostprijs op jaarbasis blijft hetzelfde
Vgl voor- en nadelen v drinkwatersysteem vs gebruik v drinkflessen
Leidingssysteem:
- nadeel: verstopping, aantasting, lekkage
-voordeel: continu water ter beschikking
Fles:
- nadeel: dagelijkse controle, meer manueel werk, risico op leeglopen fles in kooi
-voordeel: dagelijkse controle of dieren drinken is mogelijk, vermijden v verspreiding v ziektekiemen v ene naar andere kooi wanneer fles na gebruik gedesinfecteerd w
Hoe kan microbiologische kwaliteit v dirnkwater onder controle gehouden w?
- Chloreren
- aanzuren
- Filtersysteem (mechanische, biologische)
- UV-licht
- Autoclaveren
Wat is een essentieel nutrient? Geef vb diersoort
Wat: stof die het dier nt zelf kan aanmaken en dus via voeding moet aangeboden w. Zo nt: ziekteverschijnselen
Cavia: vit c
Kat: taurine
Tot wat leidt een taurinetekort bij kat?
- Hartdeficientie
- oogproblemen (Chronisch tekort leidt tot afbraak lichtgevoelige cellen)
essentiele voedingsstof
Ftie vit c bij cavia
Essentiele voedingsstof = ascorbinezuur
- eiwit collageen (deel bindweefsel botten, huid, bloedvaten) aanmaken
- afweersysteem (antioxidant)
- aanmaak adrenaline, div hormonen
- rol in opname ijzer en Ca
(wateroplosbaar -> gwn uitgeplast als te veel)
Juist of fout: alle knaagdieren z omnivoren
Fout, mengeling:
- > knaagdieren: cavia, hamster, gerbil, degoe, chinchilla, rat of muis
- > rat: omni/herbivoor
- > cavia, degoe, chinchilla: herbivoor
- > gerbil (woestijnrat), muis, hamster: omnivoor (insecten, slakken, kleine vogeltjes…)
Juist of fout: voeder geschikt voor hond is per definitie ook geschikt voor kat omdat beide carnivoren z
Fout: voeding hond bevat gn taurine en dit is een essentiele voedingsstof voor kat, dus moet via voeding aangeboden w
Juist of fout: drinkwater cavia’s die gevoederd w met uitsluitend gepelleteerd droog caviapoeder moet per definitie met vit C gesupplementeerd w
Juist, om te vermijden dat ze gezondheidsproblemen krijgen
Juist of fout: nutritionele samenstelling v voeder bestaande uit natuurlijke ingredienten is aan minder variatie onderhevig dan een semisynthetisch voeder
Fout: natuurlijke ingredienten schommelen altijd, voeder met natuurlijke ingredienten is aan meer variatie onderhevig
Wat w bedoeld met maaltijdvoedering? Wat is het tegenovergestelde hiervan? Geef voor elk v beide situaties een passend vb van waar of bij welke diersoort die manier v voedering best kan voorzien w
Maaltijdvoedering:
- tijdstip v voederen staat vast -> voederen is beperkt
-bvb bij honden: om obesitas te vermijden
Ad libitum:
- voer is continu beschikbaar
-vermijdt dat een minder dominant dier nt genoeg voer zou krijgen
Aan welke voorwaarden moet goed beddingmater voldoen?
- Comfortabel voor dier
- gn gezondheidsproblemen verzoorzaken
- stofarm
- hoog absorptievermogen
- vrij v contaminanten
- nt verstoppen v technische installaties
Op welke 4 manieren kan omgeving proefdieren verrijkt w? Geef ook vb voor elke manier
- Stimuleren v gbruik v zintuigen -> toelaten territorium afbakenen met geursporen
- ingrijpen op sociale omgeving -> trainen en handelen v dier leidt tot minder stress bij experiment
- Fysische structuren voorzien -> indelen v hok: complexer en veiliger voor dier
- dieren tot meer activiteit aanzetten -> voedsel verstoppen in bedding of ballen: stimulatie foerageergedrag
Hoe nagaan of kooiverrijking zinvol is?
- verreist grondige kennis v diersoortspecifieke behoefte: nuttige kooiverrijking stimuleert diersoortspecifiek gedrag
- verdwijnen v abnormaal gedrag
- registreren v parameters die indicatie geven v verminderde stress
- preferentietesten
juist of fout: het is best om voeder ter beschikking te stellen aan knaagd tijdens transport zodat ze sneller acclimatiseren
Juist
Juist of fout: een gewond dier mag nt vervoerd w, onder gn enkele omstandigheid
Fout: wel onder gezag v dierenarts
Juist of fout: het is perfect acceptabel om ratten die 12 dagen drachtig z op transport te zetten waarvan verwacht w dat het 6u zal duren
juist
- > drachtigheidsduur: 21d (3w)
- > 12d = 2w
Hoe lang is rat drachtig?
20-24 d (3w)
Juist of fout: elke voertuig waarmee proefdiermuizen w vervoerd, moet hiervoor vergund z, tenzij het transport nt verder dan 65 km ver is.
Fout: het transportmiddel voor vervoer v dieren moet een eigen vergunning hebben ALTIJD, afstand maakt nt uit
Waarvoor staat GLP?
Good Laboratory Practices
wat is doel AAALAC? (kort)
- non-profit organisatie die humane behandeling proefdieren in wetenschap bevordert door vrijwillige accreditatie- en beoordelingsprogramma’s
- Association for Assessment (test) and Accreditation (een product voldoet aan bep eisen -> eisen die test (assessment) opleggen) of Laboratory Animal Care (International)
Kies wat juist is: Naleven van x is een voorwaarde om aanspraak te kunnen maken op goedkeuring en registratie bij overheden v producten zoals bvb geneesmiddelen x: -> ISO -> AAALAC -> GLP
GLP -> kwaliteitssysteem, GLP-praktijken zijn verplicht zich te melden bij hun overheid en deze inspecteert regelmatig of GLP gevolgd w
Kies wat juist is: bij x ligt de focus op reconstrueerbaarheid en traceerbaarheid vd uitgevoerde experimenten.
x: GLP, AAALAC, ISO
GLP -> houdt zich bezig met planning, uitvoering, opvolging, vastlegging, archivering en rapporteren v studies
-> inkijken dossier v GLP: staat iedere stap uitgebreid in dus studie is makkelijk te reconstrueren met alle info en te traceren
Kies het juiste: Bij x ligt de focus meer op het verbeteren vh interne proces in het bedrijf om op zo’n efficient mogelijke manier het door de klant gewenste product of dienst te levereren.
x: ISO, GLP, AAALAC
ISO -> International organization for Standardization
- > standaardisatie zorgt voor efficientere werking bedrijf
- > legt normen op -> bedrijf moet hieraan voldoen -> steeds hogere normen zorgen voor verbetering
Kies het juiste: de focus v x is uitsluitend gericht op het houden van en het werken met proefdieren.
x: ISO, AAALAC, GLP
AAALAC
kies het juiste: x en y zijn kwaliteitssystemen die ook op andere sectoren kunnen slaan.
x en y: ISO, AAALAC, GLP
ISO en GLP
- -> International Organization for Standardization: normen opleggen -> kan in ieder bedrijf/in iedere sector
- -> GLP: Good Laboratory Practises: alles vastleggen, iedere stap zodat controle mogelijk is -> kan in iedere sector
- -> AAALAC: association for assessment and accreditation of Laboratory Animal Care (International): gn kwalitetissysteem, vrijwillig accreditatie- en beoordelingssysteem voor bedrijven waar gewerkt w met proefdieren
Kies het juiste: voor proefdierinstituten, ook in landen waar er beperkte wetgeving is in verband met dierenwelzijn, geeft een x accreditatie de beste garantie op het aanwezig z v bepaalde standaarden in verband met hoe er voor de dieren gezorgd wordt en hoe hun welzijn w bewaakt.
x: GLP, AAALAC, ISO
AAALAC
Vergelijk voor- en nadelen van gamma-irradiatie en autoclavering om voeders te steriliseren.
- Gamma-irradiatie: gamma-doorstraling, gammastralen door voedsel stralen
+: eenvoudig, weinig verlies aan nutrienten, gn effect op hardheid, standaard proces
-: extra werkingskosten, bij binnenbrengen vd voederzakken is er risico op insleep v ongewenste mo want buitenzijde is nt gesteriliseerd - Autoclaveren:
+: duur bij aanschaf maar vanaf dan lage werkingskosten, verpakken én buitenzijde w gesteriliseerd
-: vereist kennis, verlies v nutrienten, effect op hardheid, proces is aan variatie onderhevig
waar dient op gelet te w bij opslag v voeders? Leg uit
- Samenstelling v voedingsstoffen constant houden:
- nt permanent aan overmatig licht blootstellen
- omgeving: koel, droog, goed geventileerd, staat nt direct op grond (bact afbraak afremmen)
- oudste loten eerst opgebruiken (! vervaldatum in het oog houden) - contaminatie v voeders vermijden:
- vrij v ongedierte
- nt samen met bedorven voedsel bewaren
- nt in buurt v opslag v chemische of desinfectieproducten
wat w bedoeld met inteeltstam?
- Individuen ve inteeltstam zijn genetisch uniform; missen onderling genetische variatie
- Minstens 98.6% vd genen z homozygoot
+: door genetische uniformiteit w reproduceerbaarheid vh experiment verhoogd
wat is ‘genetic drift’?
- wat: veranderen v freq v voorkomen v bep gen(en)
- gevolg: genetische eig ve stam (in- en outbred) kunnen na verloop v tijd wijzigen door
- > mutaties (plotselijke verandering in genen -> kan zonder oorzaak gebeuren of onder invloed v straling, chemische stoffen…)
- > contaminaties (andere stammen ingekruist, ‘stam w gecontamineerd met andere genen’ (die freq gen beinvloeden))
- > (onbewuste) selectie
wat zijn gevolgen genetic drift?
- ontstaan v:
1. Substammen (inteeltstam)
2. Subpopulaties (outbredstam: is nt genetisch uniform -> bekomen we door random-bred stam te pakken en hiervan de minst verwante dieren te gaan kruisen)
Hoe kan genetic drift tegengegaan w bij inteeltstam?
- basiskolonie v waaruit productie fokkolonies w opgestart (piramid mating system toepassen)
- nieuwe fokdieren in basiskolonie die enkel uit de hoofdlijn komen
- best gn twee op elkaar gelijkende inteeltstammen in eenzelfde ruimte huisvesten
- accuraat proefdierbeheer (fokgegevens, kooilabels)
- controle op genetische uniformiteit v inteeltstammen dmv a) alert zijn voor fenotypische afwijkingen en b) genetische monitoring
hoe kan men genetische uniformiteit v inteeltstammen controleren en wrm is dit nodig?
- Nodig: om genetic drift bij inteeltstammen tegen te gaan
- hoe:
1. alert zijn voor phenotypische afwijkingen (-> personeel bewustmaken, trainen)
2. genetische monitoring (-> detectie v bvb RFLP’s)
wat zijn RFLP’s?
Restriction fragment length polymorphisms
- > vindt wanneer er een variatie in uw gen (DNA-seq) zit
- > we willen bij inteeltstammen gn variatie in genen, dus via RFLP’s gaan we kijken bij dieren of ze een variatie bezitten die we er nt willen
hoe kan met genetic drift bij outbred stammen best vermijden?
- Populatie voldoende groot houden om inteelt te vermijden
- Monogame fok (evenveel man als vrouw in populatie)
- slechts 1 pup per nest mag als fokdier ingezet worden
- extremen w nt gebruikt voor verdere fok (bv enkel fokdieren selecteren v nesten met 4-16 pups)
- werken met 1 foundation colony en andere productiekolonies via forward-/in-migration
- rotatieschema (= block mating system)
- genetische monitoring
hoe werkt rotatieschema en wanneer kan dit gebruikt w?
- Nodig: om genetic drift bij outbredstammen te vermijden/genetische diversiteit te bevorderen
- Werking: blockmating:
- > populatie indelen in enkele families (A, B, C…)
- > elk koppel behoort tot een bep familie
- > bij vorming v nieuwe koppels, steeds samenstelling uit twee verschillende families volgens vastgelegd schema
wat is in-migration (bij vermijden v genetic drift bij outbredstammen)?
- Productie -> foundation
- 5% v males in foundation colony jaarlijks vervangen met dieren vanuit de verschillende productiekolonies (zodat we dus nt de hele tijd met dezelfde gaan fokken -> meer kans op diversiteit = wat we willen bij outbredstammen)
wat is forward-migration (bij vermijden v genetic drift bij outbredstammen)?
- Foundation -> productiekolonies
- alle productiekolonies over hele wereld verspreid krijgen regelmatig dieren vanuit foundation colony
Kopt deze uitspraak?
Om te vermijden dat de genetische eigenschappen ve inteeltstam na verloop v tijd gaan wijzigen is het belangrijk om regelmatig dieren uit de productiekolonie terug naar de nucleuskweek te sturen.
- Klopt: toepassen pyramid mating system om genetic drift tegen te gaan bij inbredstammen
- Ik zeg: klopt nt: w gedaan bij outbredstammen om gen. diversiteit te bevorderen. Bij inteeltstammen w juist zo veel mogelijk met basiskolonie gedaan.
juist of nt juist: proefdierkwekers zullen nieuwe ouderdieren ve rattenstam waar het gemiddeld aantal geboren pups 5 is maar waar er uitzonderlijk tot wel 12 pups/nest geboren w, steenvast kiezen uit de grootste nesten omdat op die manier de beste garantie ontstaat dat de geselecteerde ouderdieren grote nesten gaat voortbrengen.
Juist
Juist of fout: ‘block mating’ is een methode die w toegepast om genetic drift bij outbredstammen tegen te gaan
juist
wat wordt bedoeld met een knock-out dier?
- een dier waar een specifiek gen is uitgeschakeld
beschrijf de technieken voor het genereren v transgene dieren via micro-injectie v constructen in een eicel
- Donor vrouwtje wordt geëuthanaseerd en uit eileiders w bevruchte eicellen verzameld
-> eicellen w geinjecteerd met oplossing v DNA-constructen
-> via operatie w de gemanipuleerde eicellen ingeplant in eileider vd schijnzwangere vrouwtjes
=> 1-3% v nakomelingen is transgeen - transgeen org: org dat vreemd gen afkomstig v andere diersoort in zn genen draagt
-> bvb: bevruchte eicel v koe w geinjecteerd met luminatiegen afkomstig van kwal -> eicellen in schijnzwangere koe => kalfjes die in genen het (trans)gen voor luminatie hebben (kalfjes geven licht)
wat is een embryonale stamcel?
- pluripotent: bezit alle genetische eigenschappen om tot alle weefseltypes te ontwikkelen
( totipotent: alle weefsels + extra-embryonale vliezen (placenta))
beschrijf een techniek v genetische manipulatie waarvoor embryonale stamcellen nodig z
- stamcellen: pluripotent: genetica om tot alle mogelijke weefsels te ontwikkelen
- > huidtransplantatie bij 3e graads brandwonden
geef 4 mogelijke oorzaken die aan basis kunnen liggen v welzijnsproblemen v transgene dieren
- Intentionele transgen-gebonden problemen
- Porblemen ten gevolge vh proces v modificeren
- Problemen tijdens geboorte die soms eindigen in keizersnede
- Naar boven komen van recessieve nadelige of lethale kenmerken bij het kweken naar homozygotie
Leg uit: intentionele transgen-gebonden problemen
- Mogelijke oorzaak v welzijnsproblemen bij transgene dieren
- Knock-out dier: wisselende effecten afh vd ftie vh vernietigde gen
- het transgen kan oorzaak z v productie v vreemde eiwitten die nt thuishoren bij de soort of in bep weefsel. Effect is moeilijk in te schatten
- Bij multipele insertie vh transgen kan overexpressie ve bep eiwit leiden tot metabole afwijkingen
Leg uit: problemen ten gevolge vh proces v modificeren
- Mogelijke oorzaak v welzijnsproblemen bij transgene dieren
- Integratie vh transgen op een nt voorziene plek. Zowel anatomische als neurologische afwijkingen mogelijk
- Fysische beschadigingen tijdens manipulatie
Leg uit: problemen tijdens geboorte die soms leiden tot keizersnede
- mogelijke oorzaak v welzijnsproblemen bij transgene dieren
- klein aantal pups bij receptordieren => te grote pups
- afwijkende pups
wat is genotypering?
- labotest om uit te maken wat het genotype is ve dier
- bvb is dier wildtype of heterozygoot of homozygoot drager vd modificatie
- weefselstaal voor nodig
hoe verklaar je dat het voor genotypering ethischer kan zijn om een stukje ve teentje te nemen in plaats v van de staartpunt? Leg uit
- Teen:
-> midner doorbloed
-> kan al op jongere leeftijd geamputeerd w
=> minder pijnlijk
+: afhankelijk w welke teen je pakt, heb je ook ineens identificatie voor dat dier
welk percentage aan heterozygote, wildtypes en homozygote nakomelingen verwacht je bij een kweekschema waar bij een heterozgyoot mannetje kruist met een homozygoot vrouwtje? Of waarbij een homozygoot vrouwtje kruist met een wildtype mannetje?
xx= wildkleur
yy: homozygoot
ww= heterozygoot
ww (heterozygoot) + xx (wildkleur)
=> 50% wildkleur en 50% heterozygoot
wat wordt in transgene kweek bedoeld met terugkruising (backcrossing)? Waarom w dit soms toegepast? Hoe lang duurt dit proces?
- Er is een transgene muis bekomen maar de onderzoeker wil een modificatie op een andere background -> gebruikt om een dier te bekomen (substam) die slechts op 1 plaats in het DNA verschilt vd oorspronkelijke stam
- 2 soorten:
1. traditional backcrossing:
-> 2 jaar
(gwne terugkruising)
2. speed (accelerated) backcrossing:
-> 1 jaar
-> ouderdieren w telkens dmv genetische screening uitgezocht
(versnelde terugkruising)
leg traditional backcrossing uit
- Er is een transgene muis bekomen maar de onderzoeker wil een modificatie op een andere background -> gebruikt om een dier te bekomen (substam) die slechts op 1 plaats in het DNA verschilt vd oorspronkelijke stam
- duurt 2 jaar
- werking:
-> transgene muis x oorspr stammuis => N1 (nakomelingen die 50% vh genetisch mater v elk ouderdier meedragen
-> N1 (50% v oorspr stammuis) x oorspr stammuis (100%vd genen) => N2 (50%/2 stammuis + 100%/2 genen stammuis = 75% genen stammuis)
-> N2 (75% genen stammuis) x oorspr stammuis (100% genen) => N3 met 87.5% genen stammuis (background)
-> N3 (87.5% genen stammuis) x oorspr stammuis (100% genen stammuis) => N4 met 93.75% oorspr stammuis background
=> uiteindelijk verkrijg je een nakomeling met 100% genen van oorspr stammuis
speed backcrossing: in minder generaties bereik je nakomelingen met 100% zelfde genen
waar of nt waar: bij genotypering w een stukje weefsel afgenomen ve dier om na te gaan welk genotype het dier heeft. Genotypering kan oa gebeuren op een oorbiopt, haar en speeksel, maar het is onder geen enkele voorwaarde toegelaten om hiervoor een stukje vd staartpunt te nemen.
Fout
wat is verschil in naamgeving inteeltstammen - outbredstammen?
- Inteeltstammen:
- > eerst letters en/of cijfers (-> info over ouderlijn of achtergrond (oorsprong)
- > dan /
- > letters waarvan eerste letter in hfdletter, eventueel ook een nummer (-> info over substam, hoe hoger het nr, hoe jonger de substam)
- > bvb: BALB/cJ, BALB/cAnNCrl, A/Icrc, C57BL/6J
- Outbredstammen:
- > eerst 3 letters (-> fokker)
- > dan :
- > letters in hoofdletter (-> info over stam)
- > bvb: Han: NMR, Ico: NMRI, Hsd: NIHS, Ico: SWISS-nu/nu
door genetische manipulatie middels engeneered nucleases op bevruchte eicellen kunnen muizen gecreeerd w die op een specifieke plaats in het DNA een genetische wijziging hebben ondergaan. Juist of fout?
Juist: engeneered nucleases z enzymes (proteinen) die op een specifieke plaats in DNA een breuk veroorzaken
C57B1/6J is inteeltstam. Klopt dit?
Ja
CrL:LE is een inteeltstam. Klopt dit?
Neen
welke producten zorgen voor weinig analgesie waardoor extra analgesie nodig is?
- Fenothiazines en butyrofenonen aka de ‘major tranquillizers’ (sedatieven)
- > zorgen voor verlies/vermindering bewustzijn
- > zorgen voor amper pijnstilling dus extra analgeticum nodig: + fentanyl
welke producten zorgen voor goede analgesie?
-Gassen: isofluraan (en sevofluraan)
- Injecteerbaar: narcotische analgetica
-> 1. Volledige agonisten: werken vnl in op µ,
morfine, fentanyl, methadon
2. Gemengde agonisten/antagonisten:
butorphanol (Dolorex®)
3. Partiële agonisten: buprenorphine
(Temgesic®, Vetergesic®)
welke producten zorgen voor matige analgesie maar een goede viscerale analgesie?
- medetomidine
- xylazine
- > viscerale analgesie: pijnperceptie stilleggen v inwendige organen
- > in combo met ketamine (dissociatief anesth) gegeven voor inj anesth v grote, kleine en proefdieren
leg uit wat dissociatieve anesthetica zijn en geef een voorbeeld? Vallen reflexen uit en is er een antidotering nodig?
- wat: drugs die zorgen voor dissociatie tss thalamus (bewustzijn) en limbisch (emotie, geheugen) systeem; het dier gaat zich nt meer betrokken voelen (geest en lichaam w gescheiden, bewustzijn gaat weg)
- pijnstilling (hoe goed afh v diersoort)
- gn verlies v reflexen (-> intubatie vermoeilijkt)
- KETAMINE (anesketin, nimatek)
- combi TILETAMINE en ZOLAZEPAM (Zoletil)
=> belangrijkste combi v injectie-anesthesie bij grote, kleine en proefdieren: ketamine + xylazine/medetomidine
-> antidoteren met atipamezole (antisedan)
wrm worden spierrelaxantia gebruikt en wat is een mogelijk gevaar ervan?
- verlammen de spieren, maar er is geen pijnstilling/hypnose
- hierom nooit alleen gebruiken
- wnr: bij operatie waarbij darmen nt naar buiten mogen puilen
geef 1 voordeel en 1 nadeel van gasanesthesie en geef een product als voorbeeld
+: meer regelbaar dan injectie-anesthesie dus snellere overgang tss opp anesthesie-diepe anesthesie-recovery
- : meer apparatuur nodig dan voor injectie-anesthesie, dus is vaak duurder
- gassen: isofluraan (goede analgesie), sevofluraan, ether