HPLC fragen Flashcards
Was ist HPLC
bestimmte Form der Säulenchromatographie,
Trennleistung einer Säule abhängig vom Teilchendurchmesser und der Porengrösse der Teilchen.
Wie kann man die Trennleistung erhöhen
Je kleiner die Korngröße der Partikel der Stationären Phase desto höher die Trennleistung
Vorteil der HPLC ggü GC
Auch flüchtige Substanzen trennbar
Sehr hohe Trennleistung durch:
kleine Druckstabile Packungsteilchen
pulsationsarme Pumpen zur Verminderung von Signalschwankungen.
hohe Drücke bis 400bar
entsprechende Injektionssysteme und miniaturisierte jochempfindliche Detektoren.
Vorgehensweise
Elutionsmittel wird mit Pumpen durch die Trennsäule gedruckt.
Druck ist abhängig von Packungsdichte, länge Säule und Viskosität des Elutionsmittels.
Anwendung
mit HPLC können Ionen getrennt werden wenn sie mit Ionenaustauschern gefüllt sind.
Unterschied Gradienten und Isokratische Elution
Bei der ISokratishen Elution bleibt die Zusammensetzung des Lösungsmittelsgleich
Bei der Gradientenelution verändert man die Zusammensetzung des Lösungsmittels, beginnt mit niedriger Elutionsstärke so werden früh eruierende Stoffe getrennt, dann erhöht man die Elutionsstärke um stark reternierende Stoffe zu eluieren
Reinigung LM
durch Entgasung