Histologie revue (RT) Flashcards
Cheminement d’un spécimen:
- réception
- examen macroscopique
- traitement
- circulation
- fixation
- déshydratation
- éclaircissement
- imprégnation
- enrobage
- copue au microtome
- étalement et séchage
- coloration
- circulation
- montage
- examen microscopique
Comment peut-on vérifier s’il y a une présence d’eau dans un bain d’alcool:
L’eau devient bleu en ajoutant un peu de sulfate anhydre.
Quelle est la méthode de fixation la plus simple:
Chaleur
Quels sont les propriétés des fixateurs:
- Additif : liaison du fixateur avec les protéines
- Non additif : la molécule perd son lien intime avec l’eau et devient moins réactive
- Coagulant : formation d’un réseau de fibres permettant aux solutions de pénétrer à l’intérieur du tissu
- Non coagulant : formation d’un gel. Il en résulte une mauvaise pénétration du tissu par les solutions et l’infiltration à la paraffine et moins efficace
- Tolérant : le tissu peut demeurer dans le fixateur pendant une longue période de temps sans causer de dommages au tissu
- Non tolérant : le tissu ne peut pas demeurer dans le fixateur plus longtemps que la période recommandé sinon, il y a durcissement excessif du tissu ou rétrécissement du tissu
Vitesse de pénétration des fixateurs, du plus lent au plus vite:
- formaldéhyde
- acide acétique
- chlorure mercurique
- alcool méthylique
- alcool éthylique
- tetroxide d’osmium
- acide picrique
Quel est le meilleur fixateur:
Formol 10%
Quels sont les buts de la fixation;
- préserver le tissu
- prépare les tissus au traitement qui suive (donne une résistance)
Quel est le but de décalcification:
Enlever le calcium des tissus.
Quel est le but de la circulation:
Préparation du tissu fixé afin de pouvoir l’inclure dans un matériau rigide qui permettra d’en faire des coupes observables.
Quel est le but de la déshydratation:
Reltrait de l’eau (et fixateur)
Quel est le but de l’éclaircissement:
Retirer l’agent déshydratant pour le remplacer par l’agent éclaircissant (rend le tissu transparent).
Quel est le but de l’imprégnation:
- retrait complet du xylène et remplacement par la paraffine
- fournir un support interne au tissu
Quel est le but de l’enrobage:
Fournir un support externe pendant et après la coupe au microtome.
Quels sont les différentes dimensions au microtome:
- routine: 4um
- argent: 2um
- rouge congo: 6um
Quel est le but de l’étalement:
Aplanir et étirer le tissu avant de le mettre sur la lame.
Quelle doit être la température d’eau d’étalement:
46-48oC
Particularités à l’étalement pour l’immunohistochimie:
- bain pas plus de 40oC
- pas ajouter d’adhésif
Attention aux adhésifs pour procédés histochimiques:
Pas d’adhésifs protéiques
Attention aux adhésifs pour procédés immunohistochimiques:
Pas d’adhésifs protéiques car on recherche des Ag (protéines)
Attention aux adhésifs pour recherches des glucides:
Pas d’adhésifs à base d’amidon.
Éléments cellulaire du plus au moins dense:
- globule rouge
- muscle
- cytoplasme
- collagène
Types de différentiation:
- différentiation par excès de mordant: par effet de compétition
- différentiation par des acides: bris du lien entre le mordant et du tissu
Attention particulière lors de la coloration APS:
On ne peut pas utiliser de colle à base d’amidon.
Quel est le seul fixateur qui est non additif:
Ethanol
Quel est le seul fixateur qui est intolérant:
Éthanol
Quels sont les avantages du fixateur formaldéhyde: (5)
- moins de rétrécissement
- durcit le plus (sauf acétone et éthanol)
- peu couteux
- versatile au niveau des colorations
- pénètre et s’additionne rapidement
Quels sont les désavantages du fixateur formaldéhyde: (2)
- coloration des éléments non nucléaires
- fixe lentement
Quels sont les avantages du fixateur glutaraldéhyde: (2)
- microscopie électronique
- fixe et pénètre en même temps
Quels sont les désavantages du fixateur du glutaraldéhyde: (3)
- tendance à être intolérant
- instable
- pénètre pas bien
Quels sont les avantages du fixateur acide acétique: (3)
- améliore la coloration des éléments nucléaires
- bon pour les mucines gastriques
- pénètre très vite
Quels sont les désavantages du fixateur acide acétique: (2)
- gonflement des tissus
- globules rouges et hémosidérine lysés donc la technique de Pearl`s est inutile
Quels sont les avantages du fixateur chlorure mercurique: (1)
- colorations plus belles
Quels sont les désavantages du fixateur chlorure mercurique: (5)
- toxique
- lente pénétration
- caude du rétrécissement
- cause du durcissement
- pigment de mercure
Quels sont les avantages du fixateur tetroxyde d’osmium: (1)
- le meilleur pour la fixation des lipides
Quels sont les désavantages du fixateur tetroxyde d’osmium: (2)
- très couteux
- pas bon pour la santé
Quels sont les avantages du fixateur acide picrique; (5)
- fixateur versatile: fixe, mordant, différentie, colore
- le seul fixateur a jouer 4 rôles
- avantageux de colorer les petits morceaux pour les répérer facilement
- décalcifie un peu
- bonne coloration avec des colorants acides et trichromiques
Quels sont les désavantages du fixateur acide picrique (7)
- pas bon pour ADN et ARN
- tendance a rétrécir
- gonfle les globules rouges
- diminue l’hémosidérine
- doit éviter les organes hématopoiétiques
- fixe mal le rein
- pigment d’acide picrique
Quels sont les avantages du fixateur bichromate de potassium: (2)
- peu couteux
- conserve bien les phospholipides
Quels sont les désavantages du fixateur bichromate de potassium: (4)
- ulcération des mains
- destruction des membranes muqueuses
- noircissement des solutions avec le temps
- pigment de chrome
Quels sont les avantages du fixateur éthanol: (2)
- ne laisse pas de trace car il ne s’additionne pas
- augmente la vitesse de pénétration si ajouté à autre fixateurs
Quels sont les désavantages du fixateur éthanol: (3)
- durcit et distortion des tissus
- tendance à dissoudre les lipides
- incompatibilité avec chrome et osmium
Quels sont les avantages du fixateur méthanol: (1)
- préservation de l’ARN
Quels sont les désavantages du fixateur méthanol: (3)
- toxique
- durcit trop
- lipides dissout en partie
Quels sont les avantages du fixateur sulfate de zinc: (4)
- bon détails de la membrane nucléaire et cytoplasmique
- étude immunoenzymatique
- bon pour la coloration trichromiques
- pourrait remplacer le mercure dans certains mélanges
Quels sont les désavantages du fixateur sulfate de zinc: (1)
- dépots et précipités: sels de phosphate si zinc entre en contact avec des phosphates
Quel fixateur est surtout utilis/ en microscopie électronique:
Glutaraldéhyde
Quel fixateur est surtout utilisé avec des méthodes d’immunofluorescences et immunochimie:
Éthanol
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur B5:
- chlorure mercurique
- formaldéhyde
- acétate de sodium
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Bouin:
- acide picrique
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Gendre:
- acide picrique (sous forme d’alcool 95% saturée avec acide picrique)
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Hollande:
- acétate de cuivre
- acide picrique
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Zenker:
- bichromate de potassium
- chlorure mercurique
- dans l’eau
- plus acide acétique
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Helly (Zenker-formol):
- bichromate de potassium
- chlorure mercurique
- dans l’eau
- plus fromol 40%
Quels sont les indications du mélange fixateur B5:
Organes hématopoiétiques
Quels sont les indications du mélange fixateur Bouin:
- colorations trichromiques
- tissus délicats
- biopsies gastrointestinales
- système endocrinien
Quels sont les indications du mélange fixateur Gendre:
- glycogène
- hydrates de carbones
Quels sont les indications du mélange fixateur Hollande:
Biopsies du tractus gastrointestinale (mieux que Bouin)
Quels sont les indications du mélange fixateur Zenker:
- Foie
- rate
- tissus de soutient
- noyaux
Quels sont les indications du mélange fixateur Helly:
- glande hypophyse
- organes lymphoides et hématopoiétiques
Quels sont les indications du mélange fixateur Formol-zinc:
Tout les tissus
Quels sont les différents décalcifiants utilisés:
- acide nitrique 5-10%
- acide formique 5-10%
- acide picrique
- résine échangeuse d’ions
- électrolyse
- agents chélateurs
Quels sont les 3 solvants universels:
- dioxyde de diéthylène (Dioxane)
- butanol tertiaire
- tétrahydrofurane ou TFH
Quels sont les désavantages de la paraffine:
- rétraction du tissu de 10%
- ne peut pas utilisé pure
Quels sont les désavantages du carbowax:
Ne peut pas être exposé à l’humidité du tout.
Quels sont les avantages du carbowax:
- peut imprégner directement après la fixation (pas de déshydratation ni d’éclaircissement)
- lipides conservés
Quels sont les adhésifs possibles:
- albumine-glycérol de Mayer
- gélatine
- lames chargés
- colle lepage
Quels sont les désavantages de l’albumine-glycérol de Mayer comme adhésif:
Laisse des traces sur le pourtour des lames si pas bien dosé
Quels sont les désavantages de la gélatine comme adhésif:
- forme une pellicule insoluble
- contamination possible par bactéries
Quels sont les désavantages des lames chargés:
- cout élevé
- date d’expiration
Quels sont les avantages de la colle Lepage comme adhésif:
Pas de faux positifs ni faux négatifs
Quel est l’origine de l’hématoxyline:
Extrait du bois d’un arbre (campêche)
Quels sont les différents hématoxyline aluminiques:
- Harris (en solution alcoolique)
- Mayer (en solution aqueuse)
- Ehrlich
- Delafield (oxydation naturelle)
Quels sont les différents hématoxyline ferriques:
- Weigert (en solution alcoolique)
- Verhoeff (en solution alcoolique)
- Heidenhain
Quel est la couleur des noyaux d’un hématoxyline aluminique:
Bleu
Quel est la couleur des noyaux d’un hématoxyline ferrique:
Noir
Quelle est la couleur de la laque d’un hématoxyline aluminique:
Rouge en milieu acide
Bleu en milieu alcalin
Quelle est la couleur de la laque d’un hématoxyline ferrique:
Noir
Quel est le mordant utilisé dans un hématoxyline aluminique:
Aluminium (toujours incorporé dans le colorant)
Quel est le mordant utilisé dans un hématoxyline ferrique:
Chlorure ferrique (incorporé dans la solution d’hématoxyline avant l’emploi ou faire un bain de mordant et un bain d’hématoxyline)
Quel est l’oxydant utilisé dans un hématoxyline aluminique:
Iodate de sodium
Quel est l’oxydant utilisé dans un hématoxyline ferrique:
Le même que le mordant (chlorure ferrique)
Quel est le mode d’utilisation de l’hématoxyline aluminique:
- Harris: régressif
- Mayer: progressif
Quel est le mode d’utilisation de l’hématoxyline ferrique:
- Weigert: progressif
- Verhoeff: régressif
Quel est le différentiateur dans un hématoxyline aluminique:
Alcool-acide
Quel est le différentiateur dans un hématoxyline ferrique:
- Weigert: alcool-acide
- Verhoeff: le mordant (chlorure ferrique)
Quel est l’utilité de la coloration H&E:
Permet de faire la différence entre le cytoplasme, les fibres du tissu conjonctif et les globules rouges en les colorant en différentes tintes de rose.
Quels sont les résultats de la coloration H&E:
- noyau: bleu
- cytoplasme, muscle, tissu conjonctif: différentes tintes de rose
- globules rouges: rose, rouge
- mucine: peu ou pas coloré
- cartilage: mauve
- dépots de calcium: bleu foncé
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration H&E:
- Hématoxyline de Harris
- alcool-acide: différentiation
- carbonate de lithium 1%: bleuissement
- alcool 95%: solvant de l’éosine
- éosine: contrecolorant
Quel est l’utilité de la coloration Trichrome de Masson:
Différencier le collagène du muscle lisse et du cytoplasme
Quels sont les résultats de la coloration Trichrome de Masson:
- noyau: marine à noir
- cytoplasme: rouge
- GR: rouge
- fibres musculaires: rouge
- collagène: bleu ou vert
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Trichrome de masson:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Trichrome de Masson:
- Acide picrique alcoolique ou Bouin: augmente l’acidophilie
- hématéine Weigert: coloration des noyaux (le chlorure ferrique agit comme mordant)
- Biebrich écarlate-fuschine acide:
- biebrich est plus petit et pourra pénétrer dans les structures acidophiles denses (cytoplasme, GR)
- fuschine acide est plus gros et se fixera sur les structures acidophiles moins denses (muscles et collagène)
- acide phosphomolybdique et acide phosphotungstique
- rôle de différentiateur: vient prendre la place du colorant cytoplasmique dans le tissu par concurrence
- rôle de mordant :permet au bleu d’aniline de se fixer au collagène
- bleu d’aniline: colore le collagène en bleu
- vert lumière: colore le collagène en vert
- acide acétique 1%: enlève le surplus de bleu d’aniline ou vert lumière des structures
Quel est l’utilité de la coloration Weigert Van Gieson:
Différencier le collagène du muscle lisse et du cytoplasme.
Quels sont les résultats de la coloration Weigert Van Giesson:
- noyau: marine à noir
- cytoplasme: jaune
- globules rouges: jaune
- fibres musculaires: jaune
- collagène: rouge
- élastine: jaune
- calcium: noir
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Weigert Van Gieson:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Weigert Van Gieson:
- Hématoxyline ferrique: coloration des noyaux résistant à l’acide
- acide picrique: coloration du cytoplasme et muscle
- fuschine acide: coloration du collagène
Quel est l’utilité de la coloration Hématéine de Verhoeff:
Différencier les fibres élastiques brutes des autres structures tissulaires.
Quelle est l améthode la plus populaire pour les fibres élastiques:
Hématéine de Verhoeff
Quels sont les résultats de la coloration Hématéine de Verhoeff:
- noyau: marine à noir
- cytoplasme: jaune
- globules rouges: jaune
- fibres musculaires: jaune
- collagène: rouge
- fibres élastiques: noir
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Hématéine de Verhoeff:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Hématéine de Verhoeff:
- Hématéine de Verhoeff: coloration des fibres élastiques
- chlorure ferrique: différentiateur (par excès de mordant)
- solution de Van Gieson: contient de l’acide picrique et fuschine acide
- thiosulfate de sodium :pour enlever l’excès d’iode sur les lames
Quel est l’utilité de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
Différencier les fines fibres élastiques des autres structures tissulaires.
Quels sont les résultats de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
- noyau: non coloré
- cytoplasme: vert
- gloubles rouges: vert
- fibres musculaires: vert
- collagène: vert
- fibres élastiques: bleu foncé a violet
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
- Permanganate de K 1%: intensifie la coloration par oxydation
- acide oxalique 1%: enlever le surplus de permangate de K
- aldéhyde fuschine de Gomori: coloration des fibres élastiques
- vert lumière: contre colorant
Quel est l’utilité de la coloration APS:
- Mise en évidence des polysaccharides, des mucosubstances neutres et des membranes basales
- démonstration du glycogène (APS diastase)
Quels sont les désavantages de la coloration APS:
Le glutaraldéhyde donne des faux postiifs.
Quels sont les résultats de la coloration APS:
- glycogène:
- APS positif: magenta
- APS diastase: non coloré
- membrane basale: magenta
- noyau: bleu pâle
- cytoplasme, GR: bleu pâle
- mucines acides: incolore à magenta
- fungi: magenta
Quel est le mécanisme en cause de la coloration APS:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration APS:
- acide périodique: oxydation des groupes glucidiques pour former des aldéhydes
- réactif de Schiff (fuschine basique): le réactif de Schiff est un colorant dont le chromophore est détruit
- hématoxyline: contrecolorant
- diastase: enzyme digestive, qui digère le glycogène
Quel est l’utilité de la coloration Bleu alcian pH 2.5
Démonstration des mucopolysaccharides acides et des glycoprotéines, les deux sufatés et carboxylés.
Quels sont les résultats de la coloration Bleu alcian pH 2.5:
- mucines: turquoise
- autres structures: rose
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu alcian pH 2.5:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Bleu alcian pH 2.5:
- bleu alcian à pH 2.5 en solution d’acide acétique 3%: colore les mucopolysaccharides acides sulfatés et carboxylés et glycoprotéines sulfatés et carboxylés
- Kernechtrot: contrecolorant
Quel est l’utilité de la coloration Bleu alcian pH 1.0:
- mucopolysaccharides acides sulfatés
- glycoprotéines sulfatés
Quels sont les résultats de la coloration Bleu alcian pH 1.0:
- mucines acides sulfatés: turquoise
- autres structures: rose
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu alcian pH 1.0:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Bleu alcian pH 1.0:
- bleu alcian pH 1.0 en solution d’HCl 0.1M: colore les mucopolysaccharides acides sulfatés et glycoprotéines sulfatés
- Kernechtrot: contrecolorant
Quel est l’utilité de la coloration Bleu alcian - APS:
Différencier les mucosubstances neutres des mucosubstances acides.
Quels sont les résultats de la coloration Bleu alcian - APS:
- polysaccharides neutres: magenta
- mucosubstances strictement acides: bleu
- autres substances: teintes de rose
- mucnes neutres: magenta
- mucus dans les cellules caliciformes du petit intestin:
- 2.5: bleu
- 1.0: magenta
- mucus dans les cellules caliciformes du gros intestin: bleu
- glycogène: magenta
- membrane basale: magenta
Quel est le mécanisme en cause de la coloration bleu alcian - APS:
Histochimique et histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration bleu alcian - APS:
- bleu alcian à pH 2.5 en solution d’acide acétique 3%: colore les mucopolysaccharides acides sulfatés et carboxylés et les glycoprotéines sulfatés et carboxylés
- réactif de Schiff: colore les mucosubstances neutres
- éosine ou Kernechtrot: contrecolorant
Quel est l’utilité de la coloration Mayer Mucicarmine:
Mise en évidence des mucines épithéliales acides
Quels sont les résultats de la coloration Mayer mucicarmine:
- mucines acides: rose foncé à rouge
- capsules du Cryptococcus: rose foncé à rouge
- noyaux: noir
- autres éléments tissulaires: bleu ou jaune
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Mayer mucicarmine:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Mayer mucicarmine:
- Solution de travail Muci-Carmin: mise en évidence des mucines
- hématoxyline de Weigert: coloration des noyaux
- solution de Métanil jaune 0.25%: contrecolorant
Quel est l’utilité de la coloration Réticuline de Gomori:
Différencier les fibres de réticuline des autres éléments du tissu.