Histo 1 Flashcards
combien de cellules dans humain
60 000 pour 60 kg
*10 000 plus que d’habitants sur Terre
Taille moyenne des cellules
5-20 micrometres
Taille GR
7.5 micrometres
Grandes cellules taille
dizaines de cm, voire 1m
- neurones moteurs = 1m
- fibres msuculaires = 40cm
Longues cultures: conditions
37C
saturation en vapeur d’eau H2O+/-CO2
Identification cellules mortes/vivantes
- mortes: bleu de trypan
- vivantes: sondes fluorescentes
taille des coupes fines/ultrafines
3-5 micrometres de diametre
nombre d’etapes pour preparation standard au microscope
5:
- fixation
- inclusion
- coupe
- coloration
- montage
preparation standard au microscope:
Fixation - fixateurs
- routine: (para)formaldehyde ou formol coagule les proteines intracellulaires
- acide acetique - methanol
- Liquide de Bouin (formol + acide picrique): autofluorescence
preparation standard au microscope:
2) Inclusion: realiser apres quoi, conditions
- apres deshydratation dans des bains de OH de degre croissant puis des bains de xylene (solvants de la paraffine).
- routine: paraffine fondue (56C)
- parfois dans des resines plastiques ou en congelation du N2L
preparation standard au microscope:
3) Coupe: taille, conditions
- 2 a 10 micrometres
- congelation rapide des tissus avec un cryostat
preparation standard au microscope:
4) Coloration: apres quoi
- deparaffinage par chaleur et des bains de toluene
- rehydratation par des bains d’alcool de degre decroissant puis d’eau distillee
preparation standard au microscope:
5) Montage: apres quoi, conditions
- apres coloration puis deshydratation par des bains de OH croissant puis des bains de xylene
- resine synthethique: indice de refraction voisin de celui du verre
colorations: acide/basique
- basiques acidophiles: noyaux
- acides basophiles: cytoplasme
colorations: HE
- H: basique: noyaux en violet
- E: acide: cytoplasme en rose
colorations: HES
- S: colore les fibres de collagene en jaune/orange
colorations: Trichrome de Masson
- Hematoxyline: noyaux en brun
- Fuschine acide: cytoplasme en rouge
- Vert lumiere: fibres de collagene en bleu/vert
colorations: MGG
Cellules sanguines - frottis sanguins, frottis vaginaux
Coupe tranchee: coloration utilisee et objectif
HES x500
Coupe prostate: coloration utilisee et objectif
- Trichrome de Masson x250
Frottis sanguin: coloration utilisee et objectif
MGG x1000
Microscope standard structure
- mecanique: potence/tube optique/platine
- optique: condensateur/objectif(x1000)/oculaire
Microscope a fluorescence: Emission d’onde
fluorochromes emettent une lumiere a une longueur d’onde superieur a la longueur d’onde d’exitation donnee
MET nombre d’etapes
4:
- fixation instantanee
- inclusion
- coupe
- coloration
MET: fixation instantanee: fixateur utilise
- glutaraldehyde dans du tampon cacodylate ou phosphate
- etape de post-fixation: utilisationde l’acide osmique (tetroxyde d’osmium Os O4)
MET: Inclusion: apres quoi, conditions
- apres deshydratation dans des bains d’OH de degre croissant puis des bains d’oxyde de propylene
- dans des resines synthetiques plus dures que la paraffine (Epon, resine Araldite)
MET: coupes: taille
