Grundbegriffe der Histotechnik

Question 1

Vorgang Histotechnik

Answer 1

Fixieren - Entwässern - Einbetten - Schneiden - Färben

Question 2

Probleme bei der Biopsie

Answer 2

gleich nach dem Tod oder der Entnahme von Geweben beginnt die Autolyse (=Selbstzerstörung) der Zellen, da kein ständiger Stoffaustausch mehr gewährleistet ist
-> Lösung: Fixierung

Question 3

Fixierung

Answer 3

• Fixiermittel: Formaldehyd in wässriger Lösung (= Formalin) zur Vernetzung von Proteinen
• danach: Auswaschen des Fixiermittels (unter fließendem Leitungswasser = “Wässern”)

Question 4

häufiges Einbettmedium

Answer 4

erhitztes Paraffin (i.d.R. Paraffingemische)
-> bei Zimmertemperatur erstarrt es -> Gewebe wird schneidbar

Question 5

Entwässerung

Answer 5

• langsames, stufenweises Vorgehen über aufsteigende Alkoholreihe:
  50% - 60% - 70% - 80% - 96% - 100% - Xylol
• Entfernung des Alkohols durch Intermedium, welches sich sowohl mit Alkohol, als auch mit Paraffin mischt (z.B. Xylol)

Question 6

Wo finden die Präparationsschritte vom Auswaschen der Fixierung bis zum Einbetten in Paraffin statt?

Answer 6

Einbettautomat

Question 7

Einbettung

Answer 7

Einbettungsmittel: Paraffin

• Erhitzung des Paraffins
• Ausgießen: Übergießen des Gewebestücks mit flüssigem Paraffin
• Erstarrung bei Zimmertemperatur

Question 8

Schneiden

Answer 8

• mittels Mikrotom (= Schneidegerät mit Spezialmessern zur Anfertigung von dünnen Schnitten)
• Aufbringung des Schnittes auf ein Wasserbad -> Aufnahme durch Objektträger und Erwärmung auf Heizplatte
• Entparaffinierung durch absteigende Alkoholreihe:
  Xylol – 100% - 96% - 70% - 50% - destilliertes Wasser

Question 9

gebräuchlichste Übersichtsfärbung

Answer 9

H.E. – Färbung mit 2 Farbstoffen (Hämatoxylin/Hämalaun und Eosin)

Question 10

Hämalaun

Answer 10

basischer Farbstoff; färbt saure/basophile Stoffe mit blauer Farbe

Question 11

Eosin

Answer 11

saurer Farbstoff; färbt basische/eosinophile Stoffe mit roter Farbe

Question 12

Ablauf der Färbung

Answer 12

• zunächst Färbung mit Hämalaun
• Abspülung, Einstellung in Wasser
• Färbung mit Eosin:
• Einlegung in 96% Alkohol – 100% Alkohol - Xylol
• danach: Eindecken

Question 13

Eindeckung

Answer 13

• Eindecken mittels Eindeckmedium (z.B. Kunstharz)

- schräge Auflegung des Deckglases

Question 14

Einbettung in Celloidin

Answer 14

• aufsteigende Alkoholreihe: 2%-4%-8% (Äther-Alkohol)
• Verdunstung in einem Exsikkator
• Aufbewahrung der Schnitte in 80%igem Alkohol
• Entfernen des Celloidins vor der Färbung nicht notwendig

Question 15

Probleme der Einbettung in Celloidin

Answer 15

sehr zeitaufwändig -> heutzutage nicht mehr üblich

Question 16

Zweck der Fixierung

Answer 16

Verhinderung der Autolyse (= Selbstauflösung) + Stabilisierung der Zelle in möglichst lebensähnlichen Zustand

Question 17

Zweck der Entwässerung

Answer 17

Wasser mischt sich nicht mit dem Einbettungsmittel Paraffin

Question 18

Zweck der Einbettung

Answer 18

Strukturen benötigen festen Zusammenhalt, um geschnitten werden zu können