Função e Estrutura Celular

Question 1

Cultura Celular consiste:

Answer 1

Remoção de células de um animal ou planta e induzir o seu crescimento num ambiente artificial favorável

Question 2

Utilizações da Cultura Celular:

Answer 2

• Estudo do ciclo celular
• Funções especializadas da célula
• Testes de toxicidade
• Produção de Fármacos
• Terapia Genética (substituição de genes)

Question 3

Cultura Primária

Answer 3

Composta por células que foram removidas diretamente do tecido ou de outra linha celular primária.

Question 4

Desagregação de Células

Answer 4

É um processo utilizada em CULTURA PRIMÁRIA que isola as células das suas matrizes extracelulares através de enzimas proteolíticas

Question 5

Confluência

Answer 5

Ocorre quando as células ocupam todo o substrato

Question 6

Subcultivação/Passagem

Answer 6

Quando as células atingem a confluência, têm de ser subcultivadas/passadas para um receptáculo novo, com um meio de crescimento fresco favorável ao crescimento contínuo. Neste novo espaço, as linhas celulares vão-se dividir exponencialmente até à inibição de contacto, ou esgotamento de nutrientes, ou um aumento dos produtos metabólicos finais. Neste momento, a taxa de crescimento é significativamente afetada.

Question 7

Inibição de contacto

Answer 7

Quando existe uma elevada densidade celular

Question 8

Fase LAG

Answer 8

Fase de adaptação ao novo meio de cultura, onde o crescimento da linha celular é mais demorado

Question 9

Fase LOG

Answer 9

Quando, após a linha celular se adaptar ao meio, se dá um crescimento exponencial

Question 10

Fase PLATEU

Answer 10

Fase estacionária da linha (Dá-se o crescimento máximo)

Question 11

Senescência

Answer 11

Dá-se quando a célula perde a sua capacidade proliferativa

Question 12

Senescência e Transformação

Answer 12

Algumas linhas celulares atingem a senescência. Outras tornam-se imortais e passam a ser uma linha celular contínua (fenótipo neoplástico)

Question 13

Imortalização ocorre:

Answer 13

• Através de mutações (espontâneo)
• Induzida quimicamente ou viralmente

Question 14

Células HeLa

Answer 14

1ª Linha celular imortalizada por Henrietta Lacks

Question 15

Modelos 2D características:

Answer 15

Mais simples e fáceis de controlar

Question 16

Modelos 3D características:

Answer 16

Mais complexos e mais difíceis de controlar

Question 17

Modelos animais características:

Answer 17

Mais reais e melhores modelos humanos

Question 18

Como decidir o modelo a utilizar?

Answer 18

Depende dos nossos objetivos e necessidades

Question 19

Modelos animais:

Answer 19

Transgénicos; Suprimidos (KNOCK OUT);
KNOCK IN

Question 20

Modelos Transgénicos:

Answer 20

Sofrem sobre expressão de um gene

Question 21

Modelos Suprimidos/KNOCK OUT:

Answer 21

Perdem a expressão de um gene/função

Question 22

Modelos KNOCK IN

Answer 22

Sofrem substituição de um gene endógeno (próprio) por um heterógeno (estranho)

Ex: Murganhos humanizados

Question 23

Knock Out co-body:

Answer 23

Ausência do gene em todas as células

Question 24

Knock Out / Knock In condicionais:

Answer 24

Afetam apenas um órgão específico

Question 25

Ferramentas usadas na Biologia Celular:

Answer 25

• Anticorpos para localizar proteínas
• Proteínas fluorescentes

Question 26

Fracionamento celular:

Answer 26

Técnica usada para separar organelos celulares e outros componentes subcelulares.
Utilizada para estudar mecanismos de translocação proteica; enriquecer uma amostra com uma proteína; caracterizar a localização de uma proteína na célula.

Question 27

Centrifugação:

Answer 27

Técnica que permite separar misturas aplicando forças centrífugas.
As substâncias separam-se por densidades.

Question 28

Western Blontting:

Answer 28

Técnica utilizada para detectar proteínas específicas numa mistura de proteínas, através da utilização de anticorpos (imunodeteção).
Pode também ser utilizada para medir o nível de expressão de determinadas proteínas, bem como para medir o tamanho de uma proteína

Question 29

Preparação de um Western Blotting:

Answer 29

1º- Preparação da amostra
2º- Preparar um Gel Eletroforese com a amostra (proteínas menos densas deslocam-se mais no gel)
3º- Preparar uma membrana de transição (sanduíche)
4º- Imunodeteção