extraction de l'ADN plasmidique Flashcards
Qu’est-ce qu’un plasmide?
Molécule d’ADN double brin circulaire, présente à l’état naturel dans le cytoplasme de
certains types de bactéries, capable de se répliquer et d’être transmis aux cellules filles. Un plasmide est
généralement plus petit que le chromosome bactérien.
Quelles sont les principales caractéristiques du plasmide?
Circulaire, double-brin, présent dans le cytoplasme de
plusieurs espèces bactériennes, réplication autonome, présence de divers gènes (résistance aux antibiotiques,
métaux lourds).
Est-ce que E.coli peut être dangereux pour ceux qui l’utilisent en biologie moléculaire? Expliquer.
Mais non! Ces souches utilisées en laboratoire sont dépourvues de caractère virulent.
Quels sont les organismes qui ont progressivement remplacé E.coli en biologie moléculaire?
Levure (Saccharomyces), mouche à fruit (drosophile), ver rond (Caenorhabditis elegans) et les cellules humaines.
Qu’est-ce qu’une mini-prep ?
C’est un procédé d’extraction d’ADN plasmidique sur un petit volume de culture bactérienne.
Quel est le rôle de la solution alcaline dans la miniprep ?
La dénaturation de l’ADN et des protéines.
Quel est le rôle du SDS dans la miniprep ?
La lyse cellulaire.
Quel est le rôle de la solution d’acétate de potassium et de sel dans la miniprep ?
Acétate de potassium : Acidifier le milieu, renaturation des plasmides
Sels : Permet à l’ADN de se fixer au filtre de silice
Quel est le rôle du tampon EB dans la miniprep ?
Eluer l’ADN
Quel est le rôle du tampon PB dans la miniprep ?
Éliminer les endonucléases
Pourquoi fait-on un lavage avec l’éthanol dans la miniprep?
Pour enlever les impuretés qui sont dans l’ADN plasmidique.
- Quelle association n’est pas possible dans une molécule d’ARN ?
- Quelle association n’est pas possible dans une molécule d’ARN ?
a. C-G
b. A-T
c. A-U
d. G-C
b. A-T
- À propos de la molécule d’ARNm, quelle affirmation est vraie ?
a. Contient du désoxyribose comme sucre
b. Est constituée de thymine
c. Est une copie presqu’identique du brin codant d’ADN
d. Est formée de deux hélices
c. Est une copie presqu’identique du brin codant d’ADN
- À propos des chaînes d’ADN, quelle affirmation est vraie ?
a. Elles contiennent du désoxyribose comme sucre
b. Elles sont constituées en partie de cytosine
c. Elles sont habituellement double brin
d. Elles sont complémentaires
e. Toutes ces réponses
e. Toutes ces réponses
- À propos de l’ADN des êtres vivants. Tous les énoncés suivants sont vrais concernant les différences entre l’ADN des êtres vivants sauf un, lequel ?
a. La séquence des bases
b. La nature (constitution) de l’ADN
c. Le nombre de molécules d’ADN (le nombre de chromosomes)
d. La longueur de la molécule
b. La nature (constitution) de l’ADN
Tous les énoncés suivants sont vrais à propos du génome des êtres vivants sauf un, lequel ?
a. Constitué de gènes nécessaires à la fabrication de protéines
b. Retrouvé à l’intérieur de chaque cellule du corps humain (sauf les globules rouges)
c. Représente l’ensemble des molécules d’ADN contenues dans un chromosome d’une espèce
d. Contiennent des séquences répétitives
On ne peut parler de plusieurs molécules dans un chromosome… le chromosome EST une molécule d’ADN superenroulée. Et l’ensemble des molécules d’ADN sont dans plusieurs chromosomes
c. Représente l’ensemble des molécules d’ADN contenues dans un chromosome d’une espèce
- Toutes les affirmations suivantes concernant la biologie moléculaire sont fausses sauf une, laquelle ?
a. Un nucléotide est formé d’un sucre, d’une base azotée et d’un groupement phosphate
b. Les bases puriques sont composées de 1 cycle et les bases pyrimidiques de 2 cycles
c. La thymine et la cytosine sont des bases puriques
d. La guanine et la cytosine sont des bases puriques
a. Un nucléotide est formé d’un sucre, d’une base azotée et d’un groupement phosphate
- Laquelle des propositions suivantes sur la complémentarité des bases est vraie ?
a. Dans l’ADN, les paires A et T sont stabilisées par 3 liaisons hydrogène
b. Dans l’ADN, les paires C et G sont stabilisées par 3 liaisons hydrogène
c. La base adénine est exclusivement complémentaire avec la thymine
d. La base cytosine est exclusivement complémentaire avec l’uracile
b. Dans l’ADN, les paires C et G sont stabilisées par 3 liaisons hydrogène
- Laquelle des affirmations suivantes sur la biologie moléculaire est fausse ?
a. Le sucre de l’ADN est le désoxyribose tandis que celui de l’ARN est le ribose
b. La durée de vie des ARNm est très courte
c. L’ADN et l’ARN sont constitués de deux hélices
d. La thymine est remplacée par l’uracile dans la molécule d’ARN
c. L’ADN et l’ARN sont constitués de deux hélices
- Laquelle des affirmations suivantes est vraie ?
a. Les virus sont constitués de séquences d’ADN les plus longues
b. L’ADN des procaryotes est situé dans le noyau et possède une forme circulaire
c. On retrouve de l’ADN dans les mitochondries des eucaryotes
d. Les cellules procaryotes ne contiennent jamais de petits morceaux d’ADN circulaires appelés plasmides
c. On retrouve de l’ADN dans les mitochondries des eucaryotes
- À propos des bases nucléotidiques, laquelle des affirmations suivantes est vraie ?
a. Sont des composés cycliques phosphatés
b. Dérivent d’un noyau purique ou pyrimidique
c. Entrent uniquement dans la composition de l’ADN
d. Sont au nombre de 4
b. Dérivent d’un noyau purique ou pyrimidique
- Sur quel carbone du sucre (ribose ou désoxyribose) la base azotée est-elle fixée au nucléotide ?
a. 1
b. 2
c. 3
d. 4
e. 5
a. 1
- Dans une chaîne d’acides nucléiques, les nucléotides sont fixés entre eux par quel type de liaison?
a. Peptidique
b. Glucidique
c. Phosphodiester
d. Phosphorique
e. Hydrogène
c. Phosphodiester
- De quoi est constitué un nucléotide ?
a. Un sucre et un phosphate
b. Un sucre et une base
c. Un sucre, un phosphate et une base
d. Une base et un phosphate
e. Aucune de ces réponses
c. Un sucre, un phosphate et une base
- À propos de l’ARN de transfert (ARNt), lequel des énoncés suivants est faux ?
a. Porte un acide aminé à son extrémité 3’
b. Est constitué d’une séquence de 3 nucléotides qui reconnait une séquence de 3 nucléotides sur l’ARNm
c. Est porteur du codon
d. Possède une courte séquence d’ARN antiparallèle et complémentaire au codon de l’ARNm
c. Est porteur du codon
- Dessiner le brin complémentaire de la matrice d’ADN de la figure suivante.
P 5’ – sucre – P – sucre – P – sucre – P – sucre – 3’OH
| | | |
A G C G
T C G C
l l l l
3’OH – sucre – P – sucre – P – sucre – P – sucre – P 5’
- Quelles sont les principales différences entre l’ADN et l’ARN?
Le sucre est un ribose chez l’ARN et un désoxyribose dans l’ADN. L’uracile remplace la thymine dans l’ARN. L’ARN est généralement simple brin et non double brin comme l’ADN. L’ARN est instable, l’ADN est stable
- À quoi doit-on l’interaction entre les deux brins d’ADN?
Aux liaisons hydrogène.
- Quel type de liaison unit les nucléotides dans une molécule d’acide nucléique?
Liaison phosphodiester
- La double hélice de l’ADN possède deux brins de polarité opposée : on dit donc qu’ils sont
antiparallèles
- Quelle est la sous-unité de base de la chromatine?
Le nucléosome
- Dans la figure suivante d’un gène hypothétique, les nucléotides soulignés font partie du promoteur, alors que les nucléotides en italique font partie du terminateur de transcription
voir p: 15
