extraction de l'ADN plasmidique Flashcards
Qu’est-ce qu’un plasmide?
Molécule d’ADN double brin circulaire, présente à l’état naturel dans le cytoplasme de
certains types de bactéries, capable de se répliquer et d’être transmis aux cellules filles. Un plasmide est
généralement plus petit que le chromosome bactérien.
Quelles sont les principales caractéristiques du plasmide?
Circulaire, double-brin, présent dans le cytoplasme de
plusieurs espèces bactériennes, réplication autonome, présence de divers gènes (résistance aux antibiotiques,
métaux lourds).
Est-ce que E.coli peut être dangereux pour ceux qui l’utilisent en biologie moléculaire? Expliquer.
Mais non! Ces souches utilisées en laboratoire sont dépourvues de caractère virulent.
Quels sont les organismes qui ont progressivement remplacé E.coli en biologie moléculaire?
Levure (Saccharomyces), mouche à fruit (drosophile), ver rond (Caenorhabditis elegans) et les cellules humaines.
Qu’est-ce qu’une mini-prep ?
C’est un procédé d’extraction d’ADN plasmidique sur un petit volume de culture bactérienne.
Quel est le rôle de la solution alcaline dans la miniprep ?
La dénaturation de l’ADN et des protéines.
Quel est le rôle du SDS dans la miniprep ?
La lyse cellulaire.
Quel est le rôle de la solution d’acétate de potassium et de sel dans la miniprep ?
Acétate de potassium : Acidifier le milieu, renaturation des plasmides
Sels : Permet à l’ADN de se fixer au filtre de silice
Quel est le rôle du tampon EB dans la miniprep ?
Eluer l’ADN
Quel est le rôle du tampon PB dans la miniprep ?
Éliminer les endonucléases
Pourquoi fait-on un lavage avec l’éthanol dans la miniprep?
Pour enlever les impuretés qui sont dans l’ADN plasmidique.
- Quelle association n’est pas possible dans une molécule d’ARN ?
- Quelle association n’est pas possible dans une molécule d’ARN ?
a. C-G
b. A-T
c. A-U
d. G-C
b. A-T
- À propos de la molécule d’ARNm, quelle affirmation est vraie ?
a. Contient du désoxyribose comme sucre
b. Est constituée de thymine
c. Est une copie presqu’identique du brin codant d’ADN
d. Est formée de deux hélices
c. Est une copie presqu’identique du brin codant d’ADN
- À propos des chaînes d’ADN, quelle affirmation est vraie ?
a. Elles contiennent du désoxyribose comme sucre
b. Elles sont constituées en partie de cytosine
c. Elles sont habituellement double brin
d. Elles sont complémentaires
e. Toutes ces réponses
e. Toutes ces réponses
- À propos de l’ADN des êtres vivants. Tous les énoncés suivants sont vrais concernant les différences entre l’ADN des êtres vivants sauf un, lequel ?
a. La séquence des bases
b. La nature (constitution) de l’ADN
c. Le nombre de molécules d’ADN (le nombre de chromosomes)
d. La longueur de la molécule
b. La nature (constitution) de l’ADN