Examenul microscopic in diagnosticul bacteriologic si parazitologic Flashcards
Componentele microscopului
- piesa mecanica
* baza, brat, condesator, platina - piesa optica
* obiective, ocular - sistem de iluminat
Marirea microscopului
Produsul dintre puterea de
marire a:
obiectivul (uscat/imersie)
ocularul
Tipuri de preparate
- preparate microscopice umede
- preparate microscopice colorate
Ce se poate observa prin utilizarea preparatelor proaspete?
-
mobilitatea microorganismelor (bacterii, paraziți)
- mobilitatea spirochetelor (microscopie în câmp
întunecat) - forma microorganismelor (paraziți, fungi, bacterii)
Ce se poate observa prin utilizarea preparatelor colorate?
observarea caracteristicilor morfologice și tinctoriale
Frotiul: definitie si etape
Def: materialul biologic (produs patologic sau cultura microbiană) etalat într-un strat subțire și uniform pe lama microscopului.
Etape:
1. Etalare
2. Uscare
3. Fixare (la flacara)
Tipuri de coloratie
- Coloratii simple: Albastru de metilen
- Colorații diferențiale:
* Gram
-Gram-pozitiv
-Gram-negativ
* Ziehl-Neelsen
-BAAR (bacili acido-alcoolo-rezistenți)
-Bacterii non-acido-alcoolo-rezistente - Colorații speciale
* Colorații pentru spori
Etapele coloratiei Gram
- Colorare cu violet de metil, spalare
- Mordanțare (fixare culoare) cu sol. Lugol (conț. iod), nu se spala
- Decolorare cu alcool-acetona, se spala
- Recolorare cu safranina (rosie), spalare
Rezultatul colorației Gram:
Bacterii Gram-pozitive = violet (peptidoglican gros)
Bacterii Gram-negative = roșu (peptidoglican subtire+strat lipidic)
Controlul calitățiipentru colorația Gram
1.frotiu martor (coci GP + bacili GN)
2.frotiul din produs patologic
Erori coloratia Gram
subdecolorare - bacteriile gram-negative și celulele sunt violet
supradecolorarea - bacteriile gram-pozitive sunt roșii
Importanța medicală a colorației Gram
I etapă în identificarea bacteriilor
* ghid pentru terapia antibiotică de primă linie
* alegerea medii de cultură adecvate
Descrierea caracterelor microscopice ale bacteriilor
- forma/variația formei: coci, bacili, cocobacili
- aranjarea
- afinitatea tinctorială
- mărimea
- capsula - nu se coloreaza Gram, aspect de halo (nu e caracter taxonomic primar - nu e caracter de specie)
- sporul (endosporul): formă(ovalar/sferic), dimensiune(deformant/nedefromant), localizare(central/subterminal/terminal)
Avantajele examinării microscopice
- permite detectarea rapidă a microorganismelor
- cost redus
- ușor de realizat
- ghidează următoarele etape ale diagnosticului microbiologic
- evidențiază bacteriile necultivabile sau cu creștere lentă
- oferă informații privind cantitatea de bacterii prezente în probă
1 bacterie/câmp microscopic = 100.000 bacterii/ml (PRAG DE INFECTIOZITATE)
Dezavantajele examinării microscopice
-
sensibilitate scăzută - bacteriile nu pot fi observate atunci
când numărul lor este scăzut -
specificitate scăzută - mai multe specii pot avea aceleași
caracteristici microscopice