Examen théorique Flashcards
Qu’est-ce qu’une unité formatrice de colonie (UFC) ?
L’UFC est l’origine d’une colonie de bactéries sur une gélose. Elle correspond au premier « point » de bactéries inoculé.
Les bactéries Gram - se colorent de quelle couleur?
Rose/rouge
Les bactéries Gram + se colorent de quelle couleur?
Violet/Pourpre
Dans le Test au KOH 3%, si le fil est visqueux, les bactéries sont gram + et Gram - ?
Gram -
Dans le Test au KOH 3%, si le fil est non visqueux, les bactéries sont gram + et Gram - ?
Gram +
Gélose au sang :
1) Quel type de sang
2) Quel pH et pourquoi?
3) Quelles hémolyses ?
4) Quels milieux(2) et pourquoi?
1) Mouton, cheval ou autres
2) pH légèrement acide qui favorise les réactions d’hémolyse
3) Alpha (verte), Bêta (claire) et Gamma (pas d’hémolyse)
4) Milieu enrichi : culture des bactéries fastidieuses
Milieu différentiel : hémolyse
Pourquoi les gélose au sang ne contient pas de sang humain?
Parce que le sang humain contient des inhibiteurs bactériens tels que des anticorps et autres.
Gélose phényléthanol :
1) Le phényléthanol sert à quoi?
2) Si on rajoute du sang ça fait quoi?
3) C’est quel milieu et pourquoi?
1) Inhibe temporairement la croissance des Gram - et permet la croissance des bactéries Gram +
2) Le milieu est plus riche, mais non fiable pour les réactions d’hémolyse
3) Milieu sélectif : inhibe totalement ou partiellement les bactéries Gram -
Gélose MacConkey :
1) Les sels biliaires et le cristal violet provoque quoi ?
2) Quel est l’indicateur de pH?
3) Pourquoi le rouge neutre est absorbé par les colonies?
4) Quelles colonies est lactose + et lactose - ?
5) Quels sont les milieux(2) et pourquoi?
1) Ils inhibent la croissance des Gram +
2) Rouge neutre (acide : rouge, alcalin : jaune)
3) À cause du pH acide
4) Lactose + : colonie rose-rouge
Lactose - : colonie incolore
5) Milieu sélectif : inhibe les Gram +, permet la croissance des bacilles Gram -
Milieu différentiel : lactose + ou -
Gélose mannitol-sel :
1) Le NaCl 75 g/l fait quoi?
2) Quel est l’indicateur de pH?
3) Quelles colonies est Mannitol + ou Mannitol - ?
4) Quels sont les milieux(2) et pourquoi ?
1) Il inhibe les bactéries non halophiles
2) Rouge phénol
3) Mannitol+ : colonies avec halo jaune
Mannitol- : colonies sans halo
4) Milieu sélectif : seules bactéries halophiles vont pousser
Milieu différentiel : mannitol + ou -
Que veut dire halophile?
Tolérant à de forte concentration de NaCl ( > ou = à 7,5%)
Gélose SS :
1) Les sels biliaires font quoi?
2) Le vert brillant fait quoi?(2)
3) Le thiosulfate et citrate ferrique font quoi?
4) Quel est l’indicateur de pH?
5) Quelles colonies est lactose + et lactose - ?
6) Quels sont les milieux(2) et pourquoi ?
1) Ils inhibent Gram +
2) Il inhibe totalement ou partiellement les coliformes et les bactéries lactose +
3) Ils détectent la production de gaz H2S
4) Rouge neutre
5) Lactose + : Colonie rose
Lactose - : Colonie incolore
6) Milieu sélectif : inhibe les bactéries Gram + (permet la croissance des bacilles-, surtout les bacilles- à lactose-)
Milieu différentiel : Lactose + ou - (H2S (colonie à centre noir))
Gélose EMB :
1) Éosine Y et bleu de méthylène font quoi?
2) Les deux colorants précédant forment quoi dans la colonie?
3) Décrire un Lactose +
4) Décrire un lactose + rapide (genre E. coli)
5) Décrire un lactose -
6) Nommer les deux types de milieux et ce qu’ils font
1) Ils inhibent la croissance des Gram +
2) Un complexe pourpre
3) Colonie pourpre ou colonie à centre foncé et pourtour incolore
4) Colonie à reflet vert métallique (précipitation du complexe)
5) colonie incolore
6) Milieu sélectif : inhibe les bactéries Gram + jusqu’à une certaine limite
Milieu différentiel : lactose + et -
Sélénite :
1) Rôle de Sélénite((3)
2) Nommer les deux types de milieux et ce qu’ils font
1) Inhibe la croissance des Gram +
Retarde la croissance des bacilles Gram - à lactose + (premier 18h)
Favorise la croissance des bacilles Gram - à lactose - (premier 18h)
2) Milieu sélectif : Inhibe les bactéries Gram +
Milieu d’enrichissement : Favorise la croissance des Salmonella et des Shigella
(test O/F)
Qu’est-ce que ça veut dire si mon tube qui était à la base vert ou violet est devenu jaune sans huile, mais qu’il est resté vert ou violet avec l’huile?
Oxydation
(test O/F)
Qu’est-ce que ça veut dire si mon tube qui était à la base vert ou violet est devenu jaune sans huile et avec huile et qu’il y a aussi la présence de bulles qui remontent à la surface?
Fermentation aérogène
(test O/F)
Qu’est-ce que ça veut dire si mon tube qui était à la base vert ou violet est devenu jaune sans huile et avec huile et qu’il n’y a pas la présence de bulles qui remontent à la surface?
Fermentation anaérogène
(test O/F)
Qu’est-ce que ça veut dire si mon tube qui était à la base vert ou violet n’a pas changé de couleur sans huile et avec huile?
Inactif
(test O/F)
Qu’est-ce que ça veut dire si mon tube qui était à la base vert ou violet n’a pas changé de couleur avec l’huile, mais que sans l’huile il est devenu bleu ou violet foncé?
Alcalinisant
Dans le test de mobilité, si la piqûre tend à disparaitre et que le milieu est trouble, la bactérie est mobile ou immobile?
Mobile
Dans le test de mobilité, si la piqûre ne tend pas à disparaitre et que le milieu est transparent, la bactérie est mobile ou immobile?
Immobile
Dans le test de l’oxydase, une réaction positive(violet) veut dire quoi?
Qu’il est oxydase +, donc oxydé (Absence de H+)
Dans le test de l’oxydase, une réaction négative(incolore) veut dire quoi?
Qu’il est oxydase -, donc réduit (présence de H+)
Dans le test de réduction des nitrates en nitrites, si le tube devient rouge dans les temps au tout début ça veut dire quoi?
Qu’il est nitrate+
(le + indique la présence d’une réaction)
Tous les nitrate ont été transformé en nitrites
Dans le test de réduction des nitrates en nitrites, si le tube ne devient pas rouge dans les temps au tout début, mais qu’il devient rouge avec l’ajout de zinc ça veut dire quoi?
Indique qu’il y avait encore des nitrates, car le zinc vient de les transformé en nitrites.
Donc nitrate - (- car les nitrates étaient encore des nitrates avant le zinc/en d’autres mots : aucune réaction avec les réactifs A et B)
Dans le test de réduction des nitrates en nitrites, si le tube ne devient pas rouge dans les temps au tout début et qu’il ne devient pas rouge non plus avec l’ajout de zinc ça veut dire quoi?
Indique que le nitrate a complètement été réduit en ammoniac(NH3) ou en azote gazeux(N2)
(visible par des bulles)
Il y a bien eu une réaction avec les réactifs donc nitrate +
Quelles sont les conditions nécessaires pour qu’un milieu de culture soit adéquat ? (4)
Il doit être stérile au départ.
Il doit contenir tous les éléments nutritifs et énergétiques nécessaires à la croissance de la bactérie.
Il doit correspondre aux conditions physiques optimales de l’environnement naturel de la bactérie (température, pH, etc.).
Il doit être exempt de substances nocives.
Quelle est la différence entre un milieu défini et un milieu complexe ?
Milieu défini : La composition chimique est connue.
Milieu complexe : La composition chimique exacte est inconnue; les éléments nutritifs proviennent d’extraits de tissus animaux ou végétaux.
Quelle est la principale caractéristique d’un milieu liquide ?
Les éléments nutritifs y sont dissous dans l’eau, et les microorganismes y croissent submergés dans le liquide.
Qu’est-ce qu’un milieu solide et comment est-il rendu rigide ?
Un milieu solide contient des éléments nutritifs et un agent gélifiant, généralement de l’agar, qui le rend rigide.
Comment distingue-t-on un milieu semi-solide d’un milieu solide ?
Les milieux semi-solides contiennent moins d’agent gélifiant, ce qui donne une texture de gelée molle, contrairement aux milieux solides qui sont rigides.
Quel est l’agent gélifiant le plus utilisé ?
L’agar
Pourquoi les milieux complexes sont-ils utilisés malgré leur composition inconnue ?
Ils fournissent une variété de nutriments essentiels grâce aux extraits de tissus animaux ou végétaux, ce qui est utile pour cultiver des microorganismes exigeants ou inconnus.
1 : Que signifie une culture pure ?
2 : Qu’est-ce qu’une colonie isolée ?
3 : Pourquoi les colonies isolées sont-elles importantes en microbiologie ?
1 : Une culture pure est une culture contenant une seule espèce de bactérie, provenant d’une seule cellule.
2 : Une colonie isolée est une colonie bactérienne qui ne touche pas d’autres colonies sur le milieu de culture.
3 : Elles permettent d’obtenir des cultures pures en prélevant une seule colonie pour une nouvelle inoculation.
1 : Qu’est-ce que le repiquage ?
2 : Dans quel but utilise-t-on le repiquage ?
1 : Le repiquage est une technique de transfert de bactéries d’un milieu à un autre.
2 : Pour isoler des bactéries, maintenir des cultures pures, ou les transférer vers un milieu de culture plus adapté à leur croissance ou à leur conservation.
1 : Qu’est-ce qu’un examen à l’état frais ?
2 : Pourquoi l’examen à l’état frais est-il important en microbiologie ?
1 : Une technique rapide permettant d’observer des microorganismes vivants en suspension dans un liquide, sans coloration.
2 : Il permet d’étudier rapidement les microorganismes vivants, notamment leur forme, leur mobilité et leur division cellulaire, sans nécessiter de coloration.
Quelles informations peut-on obtenir avec l’examen à l’état frais ? (5)
Présence de microorganismes.
Forme générale des microorganismes.
Mobilité due aux flagelles.
Observation du bourgeonnement des levures.
Identification de certains constituants cellulaires, comme les vacuoles et le noyau chez les levures.
1 : Quel est le grossissement utilisé pour l’examen à l’état frais ?
2 : Pourquoi ne pas utiliser les objectifs 4X, 10X et 40X avec de l’huile ?
1 : Un grossissement de 400X (objectif 40X), avec très peu de lumière.
2 : Seul l’objectif 100X est conçu pour être en contact avec l’huile. Les autres objectifs peuvent être endommagés et compromettre la vision si utilisés avec de l’huile.
Pourquoi ne pas utilisé l’objectif 100X lors d’un état frais? (4)
Nécessité d’huile à immersion
Proximité avec la lamelle
Réflexion de la lumière
Grossissement suffisant avec 40X
Comment différencier la mobilité des bactéries d’autres mouvements ?
Mobilité réelle : Direction donnée ou culbutes grâce aux flagelles.
Mouvement Brownien : Vibrations dues aux collisions avec des molécules environnantes.
Courant de convection : Mouvement uniforme et dans une seule direction dû à la chaleur.
Pourquoi utilise-t-on des colorations en microscopie ?
Pour augmenter le contraste, faciliter l’observation de la forme, de l’arrangement et des structures bactériennes, et utiliser un grossissement élevé.
Quels sont les types de colorations ?
Simples : Utilisent un seul colorant pour visualiser la forme et l’arrangement des microorganismes.
Différentielles : Utilisent plusieurs colorants pour distinguer les types de bactéries (ex. Gram + et Gram -).
Structurales : Mettent en évidence des structures spécifiques (spores, capsules, flagelles).
Pourquoi une vieille culture donne-t-elle de moins bons résultats ?
Les acides libérés neutralisent les charges négatives des surfaces bactériennes, ce qui réduit l’efficacité de la coloration.
À quoi sert la fixation avant la coloration ?
Faire adhérer les bactéries à la lame pour éviter leur perte au lavage.
1 : Quels colorants sont utilisés dans la coloration simple ?
2 : Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration de Gram ?
1 : Colorants basiques comme le bleu de méthylène ou le cristal violet, qui colorent les microorganismes en bleu et laissent les spores et vacuoles incolores.
2 :
Cristal violet : Colorant primaire, colore toutes les bactéries en bleu-violet.
Iode (Lugol) : Mordant, renforce l’affinité du colorant pour les bactéries.
Alcool à 95 % : Agent décolorant, élimine le cristal violet des Gram -.
Safranine : Contre-colorant, colore en rose les Gram - décolorées.
1 : Qu’est-ce que la coloration de Gram et pourquoi est-elle importante ?
2 : Pourquoi les Gram + et Gram - apparaissent-ils différemment ?
1 : C’est une méthode différentielle qui divise les bactéries en deux groupes :
Gram + : Retiennent le cristal violet et apparaissent violets.
Gram - : Perd le cristal violet et apparaît rose après contre-coloration.
Elle aide à identifier les bactéries selon la composition de leur paroi cellulaire.
2 : Les différences sont dues à la structure de leur paroi :
Gram + : Paroi épaisse de peptidoglycane qui retient le cristal violet.
Gram - : Paroi plus fine avec une membrane externe, décolorée par l’alcool
Qu’est-ce que le test au KOH 3% ?
Une méthode rapide pour différencier les bactéries Gram + des Gram - lorsque les résultats de la coloration de Gram sont incertains.
Sur quoi repose le test au KOH 3% ?
Il est basé sur les différences biochimiques de la paroi cellulaire :
La paroi des Gram - est fragile et se brise en présence de la solution alcaline (KOH 3%).
La paroi des Gram + est robuste et résiste à la solution.
- Qu’est-ce qu’un milieu sélectif ?
- Qu’est-ce qu’un milieu d’enrichissement ?
- Qu’est-ce qu’un milieu enrichi ?
- Qu’est-ce qu’un milieu différentiel ?
- Qu’est-ce qu’un milieu sélectif ?
Un milieu qui inhibe les bactéries indésirables pour favoriser celles recherchées.
Exemple : Gélose MacConkey. - Un milieu qui stimule la croissance des bactéries spécifiques présentes en faible nombre.
Exemple : Milieu sélénite. - Un milieu contenant des substances nutritives additionnelles pour favoriser les bactéries fastidieuses.
Exemple : Gélose au sang. - Un milieu permettant de distinguer des bactéries par leur apparence ou leurs réactions sur le milieu.
Exemple : Gélose MacConkey.
Quels sont les types d’hémolyse observables sur une gélose au sang ?
Hémolyse alpha : Zones vertes.
Hémolyse bêta : Zones claires.
Hémolyse gamma : Pas d’hémolyse visible.
Quelle est la particularité de la gélose mannitol-sel ?
Favorise les bactéries halophiles (tolèrent ≥ 7,5 % NaCl) comme Staphylococcus.
Comment interpréter la gélose MacConkey ?
Colonies roses : Utilisation rapide du lactose.
Colonies incolores : Utilisation lente ou nulle du lactose.
Pourquoi le milieu sélénite est-il sélectif et enrichissant ?
Il favorise Salmonella et Shigella tout en inhibant les Gram + et retardant les Gram - lactose +.
Pourquoi ne peut-on pas autoclaver le milieu sélénite ?
Il est dégradé par une chaleur excessive.
Comment détecte-t-on la production de H₂S sur un milieu ?
Par la formation d’un précipité noir résultant de la réaction entre H₂S et les ions ferriques.
- Qu’est-ce qu’un endoenzyme ?
- Qu’est-ce qu’un exoenzyme ?
- Une enzyme produite et utilisée à l’intérieur de la cellule bactérienne.
- Une enzyme sécrétée à l’extérieur de la cellule pour décomposer des substances dans l’environnement.
Comment créer un milieu anaérobie simple ?
Faire bouillir le milieu 20 minutes, refroidir rapidement, inoculer sans agiter et sceller avec une couche d’huile minérale.
Quels composés peuvent réduire l’oxygène dans un milieu ?
L’acide thioglycolique ou la cystéine.
Qu’est-ce qu’une jarre « Gas Pack » ?
Une jarre utilisée pour cultiver des bactéries anaérobies, avec un système absorbant l’oxygène et une bandelette indicatrice (bleu de méthylène ou résazurine) qui devient incolore en absence d’O2.
Où se développent les différents types respiratoires dans une gélose profonde ?
Anaérobies strictes : au fond.
Aérobies strictes : à la surface.
Aérobies-anaérobies facultatives : sur toute la hauteur.
Quelle est la méthode pour chasser l’O2 d’une gélose profonde ?
Faire fondre la gélose, la laisser bouillir 20 minutes, puis la maintenir liquide à 45°C pour l’ensemencement.
Pourquoi est-il important d’utiliser une culture jeune pour le test de mobilité ?
Une culture jeune est nécessaire car une vieille culture, encombrée de cellules mortes, rend l’examen difficile.
Comment fonctionne le test de mobilité sur gélose semi-solide ?
Une gélose nutritive contenant 0,5% d’agar est ensemencée. Les bactéries mobiles se diffusent de la ligne d’ensemencement vers les parois du tube après incubation.
Quels sont les facteurs importants à prendre en compte pour le test de mobilité ?
Température d’incubation : certaines bactéries sont mobiles à 20°C et immobiles à 37°C.
Type respiratoire : ce test convient mieux aux bactéries aérobies-anaérobies facultatives qu’aux aérobies strictes et anaérobies strictes.
Que doit-on faire si le test de mobilité est négatif à 37°C ?
Réincuber à 22°C pendant 2 jours avant de considérer le test comme négatif.
1 : Qu’est-ce que le test à l’oxydase détecte ?
2 : Quel est le délai pour interpréter le test à l’oxydase ?
1 : Il détecte la présence de l’enzyme cytochrome oxydase en faisant réagir un réactif, le tétraméthyl-p-phénylènediamine, qui devient violet en cas de réaction positive.
2 : La réaction est quasi-instantanée, et il ne faut pas interpréter les résultats après 30 secondes.
Quel est l’objectif des tests d’oxydation-fermentation (O/F) ?
Déterminer le type de métabolisme (oxydation ou fermentation) des sucres, et révéler la différence entre ces deux voies métaboliques, notamment le besoin ou non d’oxygène.
- Quelles bactéries peuvent fermenter les sucres ?
- Quelles bactéries peuvent uniquement oxyder les sucres ?
- Les bactéries aéro-anaérobies facultatives peuvent fermenter les sucres, un processus anaérobique produisant plus d’acidité que l’oxydation.
- Les bactéries aérobies strictes ne peuvent que réaliser l’oxydation du glucose, un processus aérobie.
Quel est le rôle des indicateurs de pH dans les milieux de base utilisés pour les tests O/F ?
L’indicateur de pH (bromothymol bleu ou bromocrésol pourpre) permet de détecter l’acidité produite lors de l’oxydation ou de la fermentation des sucres.
Bromothymol bleu : Alcalin (bleu), Neutre (vert), Acide (jaune).
Bromocrésol pourpre : Alcalin (violet foncé), Neutre (violet pâle), Acide (jaune).
Quel est l’objectif du test de réduction des nitrates en nitrites ?
Déterminer si un microorganisme peut réduire les nitrates (NO₃⁻) en nitrites (NO₂⁻) ou en azote gazeux (N₂).
Pourquoi les boîtes de gélose Sabouraud ne doivent-elles jamais être ouvertes ?
Elles ne doivent pas être ouvertes car les spores fongiques (de mycètes) qu’elles contiennent peuvent contaminer l’air ambiant.
À quoi sert le milieu de Sabouraud ?
Le milieu de Sabouraud est principalement utilisé pour la culture des mycètes (champignons). Il favorise (mais n’aide pas) leur croissance tout en inhibant celle de nombreuses bactéries.
Quels composants sont présents dans le milieu de Sabouraud ?
Le milieu de Sabouraud contient du dextrose, ce qui permet de soutenir la croissance des mycètes tout en empêchant la croissance de plusieurs bactéries.
Pourquoi le milieu de Sabouraud est-il considéré comme sélectif ?
Il est sélectif car son pH acide (environ pH 5) empêche la croissance de nombreuses bactéries tout en permettant la croissance des mycètes.
Quelles sont les spores de mycètes et quel est leur rôle ?
Les spores de mycètes sont des structures reproductrices qui permettent la propagation et la survie des champignons dans des environnements variés. Elles peuvent se former de manière sexuée ou asexuée, selon le type de champignon.
Comment se présente la croissance de Candida albicans et de Saccharomyces cerevisiae sur gélose Sabouraud ?
Candida albicans forme des colonies lisses, blanc-crème, opaques, avec une odeur de levure.
Saccharomyces cerevisiae forme aussi des colonies blanches et odorantes de levure, mais sa température optimale de croissance est de 25°C à 37°C.
Quels sont les aspects microscopiques de Candida albicans et Saccharomyces cerevisiae ?
Candida albicans est ovale (2-3 µm x 4-6 µm) et présente souvent des bourgeonnements. Sur gélose à la farine de maïs, il forme un pseudomycélium avec des chlamydospores et des blastospores.
Saccharomyces cerevisiae est aussi ovale (3 µm x 5 µm) mais avec moins de bourgeonnements et parfois des vacuoles. Sur gélose à la farine de maïs, il forme occasionnellement des courts pseudomycélia.
Quel est le résultat du test de filamentation germ tube pour Candida albicans et Saccharomyces cerevisiae ?
Candida albicans présente un test de filamentation positif, avec des filaments à parois parallèles provenant de la cellule mère.
Saccharomyces cerevisiae présente un test de filamentation négatif, ne formant pas de filaments caractéristiques.
Quelles sont les différences dans l’utilisation de Candida albicans et Saccharomyces cerevisiae dans les milieux de culture ?
Candida albicans peut croître rapidement dans un milieu contenant du dextrose et est souvent utilisé pour identifier des infections fongiques pathogènes.
Saccharomyces cerevisiae est utilisé principalement dans la production industrielle de produits alimentaires comme le pain, le vin et la bière.
Quelle est la température optimale de croissance de Candida albicans par rapport à Saccharomyces cerevisiae ?
Candida albicans peut se développer à une température optimale de 37°C, adaptée aux infections humaines.
Saccharomyces cerevisiae préfère une température de 25°C à 37°C, utilisée pour des processus fermentatifs industriels.
Quelles sont les caractéristiques des bacilles Gram- concernant leur oxydase et leur fermentation du glucose ?
Les bacilles Gram- sont oxydase négatifs.
Ils fermentent le glucose.
Comment différencier les souches lactose+ et lactose- sur milieu MacConkey ?
Les colonies lactose+ sont de couleur rose ou avec un centre rose et un pourtour incolore.
Les colonies lactose- sont incolores.
À quoi sert le milieu Kligler ?
Il est utilisé pour identifier les bacilles Gram- et catalase+ comme les entérobactéries.
Il permet de déterminer la fermentation du glucose et du lactose ainsi que la production de gaz et de H2S.
Quels sont les trois patrons de fermentation des sucres observés dans le milieu Kligler ?
Fermentation du glucose seulement : pente rouge, culot jaune (R/J).
Fermentation du glucose et du lactose : pente jaune, culot jaune (J/J).
Aucune fermentation : pente rouge, culot rouge (R/R).
Comment détecte-t-on la production de gaz dans le milieu Kligler ?
La production de gaz est détectée par l’apparition de bulles ou de coupures dans la gélose.
Comment se manifeste la production de H2S dans le milieu Kligler ?
La production de H2S est indiquée par un précipité noir dans le culot du milieu.
Information d’extra:
Ce gaz est soluble et réagit avec les ions ferriques pour former ce précipité.
Le H2S ne peut se produire qu’en milieu acide (culot jaune).
Ça veut dire quoi?
R/J + -
J/N + +
R/J + - : fermentation du glucose seulement avec de production de gaz sans H2S
J/N + + : fermentation du glucose et du lactose, production de gaz et de H2S.
Quel est l’objectif principal du test à l’ONPG ?
Détecter la présence et l’activité de l’enzyme B-galactosidase.
Distinguer les bactéries lactose- des bactéries lactose+ lent.
Le test à l’ONPG
1 : Quelles sont les caractéristiques des bactéries lactose+ selon ce test ?
2 : Que se passe-t-il avec les bactéries lactose+ lent dans ce test ?
3. Comment se présentent les bactéries lactose- dans ce test ?
1 : Elles possèdent les deux enzymes (B-galactosidase et perméase), ce qui entraîne une fermentation rapide du lactose.
Sur MacConkey, elles forment des colonies roses.
- Que se passe-t-il avec les bactéries lactose+ lent dans ce test ?
Elles possèdent l’enzyme B-galactosidase mais ont une perméase moins active ou en faible quantité.
Sur MacConkey, elles forment des colonies à centre rose et pourtour incolore. - Comment se présentent les bactéries lactose- dans ce test ?
Elles ne possèdent ni l’enzyme B-galactosidase ni la perméase, mais parfois la perméase est présente en faible quantité.
Sur MacConkey, elles forment des colonies incolores, et elles n’arrivent pas à dégrader le lactose.
Pourquoi le test à l’ONPG ne doit-il pas être réalisé à partir de milieux sélectifs comme MacConkey ?
Les milieux sélectifs contiennent des inhibiteurs qui peuvent fausser les résultats du test.
Quels sont les résultats du test à l’ONPG ?
Test positif : milieu jaune, indiquant la présence de B-galactosidase.
Test négatif : milieu incolore, indiquant l’absence de B-galactosidase.
Quels tests font partie du système IMViC et que mesurent-ils ?
I : Indole - Détecte la capacité d’un microorganisme à utiliser le tryptophane.
M : Rouge méthyl - Mesure le pH du milieu après fermentation du glucose, indiquant le type de produits terminaux (acides).
V : Voges-Proskauer - Détecte la production de butylène glycol par fermentation.
C : Citrate - Mesure la capacité d’un microorganisme à utiliser le citrate comme seule source de carbone.
Quel est le but et les résultats du test de l’indole ?
But : Déterminer la capacité d’un microorganisme à utiliser le tryptophane comme source d’azote, de carbone et d’énergie dans un bouillon tryptoné.
Résultats:
I+ : Formation d’un anneau rouge à la surface du milieu après l’ajout du réactif.
I- : Formation d’un anneau jaune à la surface du milieu après l’ajout du réactif.
Quel est l’objectif et les résultats du test au rouge de méthyle ?
But : Distinguer les microorganismes selon leur taux de production d’acides après fermentation du glucose.
Résultats :
MR+ : Milieu rouge cerise, indiquant un pH ≤ 4,4 (acides produits).
MR- : Milieu jaune ou orange, indiquant un pH ≥ 6,0 (absence d’acides).
Quel est le but et les résultats du test de Voges-Proskauer ?
But : Déterminer si une bactérie produit une fermentation de type butylène glycol, un produit basique.
Résultats:
VP+ : Milieu rouge-rose, indiquant la production de butylène glycol.
VP- : Milieu incolore, indiquant l’absence de butylène glycol.
Quel est l’objectif et les résultats du test de citrate ?
But : Déterminer si un microorganisme peut utiliser le citrate comme seule source de carbone, ce qui entraînerait une alcalinité du milieu.
Résultats :
C+ : Pente bleu franc et croissance bactérienne, indiquant que le citrate a été utilisé comme source de carbone.
C- : Pas de croissance et pas de changement de couleur (reste vert), indiquant que le citrate n’a pas été utilisé.
Quel est l’objectif et les résultats du test de l’uréase ?
But : Détecter la présence de l’enzyme uréase, qui dégrade l’urée en ammoniac et en dioxyde de carbone.
Résultats:
Urée+ : Culot et/ou pente rose-violet, indiquant la présence de l’enzyme uréase.
Urée- : Pente orange, jaune ou très peu rosée, indiquant l’absence de l’enzyme uréase.
Utilisation du glucose : Milieu jaune et formation de bulles de gaz, indiquant la production d’acidité et de gaz.
Quel est l’objectif et les résultats du test à l’acide phénylpyruvique (APP) ?
But : Détecter la présence de l’enzyme phénylalanine désaminase, qui transforme la phénylalanine en acide phénylpyruvique. Il est utile pour différencier les genres Proteus, Morganella, et Providencia des autres entérobactéries.
Résultats :
APP+ : Coloration verte de la pente après l’ajout du réactif chlorure ferrique, indiquant la présence d’acide phénylpyruvique.
APP- : Pas de coloration verte après l’ajout du réactif, indiquant l’absence d’acide phénylpyruvique.
Quel est l’objectif des tests de décarboxylase (arginine, lysine, ornithine) ?
Mesurer l’habileté enzymatique d’un organisme à décarboxyler un acide aminé. Ces tests sont utilisés principalement pour les bactéries fermentantes et non fermentantes.
Quels sont les résultats des tests de décarboxylase pour les bactéries fermentantes ?
Test + : Croissance (trouble) et milieu violet, indiquant la décarboxylation de l’acide aminé.
Test - : Croissance (trouble) et milieu jaune (comme le contrôle), indiquant l’absence de décarboxylation.
Quels sont les résultats des tests de décarboxylase pour les bactéries non fermentantes ?
Test + : Croissance (trouble) et milieu violet, indiquant la décarboxylation de l’acide aminé.
Test - : Croissance (trouble) et couleur initiale (comme le contrôle), indiquant l’absence de décarboxylation.
Quel est l’objectif de la recherche de la catalase ?
Détecter la présence de l’enzyme catalase, ce qui permet de distinguer les streptocoques des staphylocoques.
Comment est effectuée la détection de la catalase ?
On ajoute du peroxyde d’hydrogène (3%) à une suspension bactérienne et on observe la production de bulles de gaz.
Quels sont les résultats du test de la catalase ?
Catalase+ : Production de bulles de gaz, indiquant la présence de catalase.
Catalase- : Pas de production de gaz, indiquant l’absence de catalase.
Test du disque d’optochine pour Streptococcus α-hémolytique :
1 : Quel est le but du test du disque d’optochine ?
2 : Quel est le résultat d’un test positif à l’optochine pour Streptococcus pneumoniae ?
3 : Quel est le résultat d’un test négatif à l’optochine pour Streptococcus α-hémolytique ?
1 : Tester la sensibilité d’un microorganisme à l’optochine, afin de distinguer Streptococcus pneumoniae (sensible) des autres Streptococcus α-hémolytiques (résistants).
2 : Une zone d’inhibition autour du disque d’optochine indique que Streptococcus pneumoniae est sensible.
3 : Il n’y a pas de zone d’inhibition, indiquant que l’organisme est résistant à l’optochine.
Test de solubilité dans les sels biliaires pour Streptococcus α-hémolytique :
1 : Quel est le but du test de solubilité dans les sels biliaires ?
2 : Quel résultat indique une souche de S. pneumoniae dans le test de solubilité dans les sels biliaires ?
3 : Quel résultat indique une souche de Streptococcus α-hémolytique non S. pneumoniae ?
1 : Vérifier la résistance à la solubilité d’une souche bactérienne dans les sels biliaires, pour distinguer S. pneumoniae des autres streptocoques α-hémolytiques.
2 : La lyse des colonies, avec disparition des colonies sans affecter l’hémolyse alpha dans la gélose.
3 : Les colonies restent intactes, sans lyse.
Test du disque de bacitracine pour Streptococcus β-hémolytique :
1 : Quel est le but du test du disque de bacitracine ?
2 : Quel est le résultat d’un test positif à la bacitracine pour Streptococcus pyogenes ?
3 : Quel est le résultat d’un test négatif à la bacitracine pour Streptococcus pyogenes ?
1 : Tester la sensibilité d’un microorganisme à la bacitracine pour distinguer Streptococcus pyogenes (groupe A) des autres Streptococcus β-hémolytiques.
2 : Une zone d’inhibition autour du disque de bacitracine, indiquant que Streptococcus pyogenes est sensible.
3 : Il n’y a pas de zone d’inhibition, indiquant que l’organisme est résistant à la bacitracine.
Test de Camp pour Streptococcus β-hémolytique :
1 : Quel est le but du test de Camp ?
2 : Quel est le résultat d’un test positif au facteur CAMP ?
3 : Quel est le résultat d’un test négatif au facteur CAMP ?
1 : Déterminer la production du facteur CAMP, ce qui aide à l’identification des Streptococcus du groupe B.
2 : Une lyse complète apparaît sous forme de flèche à la jonction du Streptococcus et du Staphylococcus, indiquant une réaction positive.
3 : Il n’y a pas de flèche de lyse, indiquant l’absence de production du facteur CAMP.
Identification des Streptococcus du groupe D et Enterococcus faecalis sur BEA (Bile Esculin Azide Agar) :
1 : Quel est le but du test BEA (Bile Esculin Azide Agar) ?
2 : Quel résultat indique une hydrolyse de l’esculine sur BEA ?
3 : Quel résultat indique qu’une bactérie n’a pas hydrolysé l’esculine sur BEA ?
4 : Que signifie l’absence de croissance sur BEA ?
1 : Déterminer la capacité d’un microorganisme à hydrolyser l’esculine en esculétine et en glucose, en présence de bile, pour distinguer les Enterococcus et les Streptococcus du groupe D des autres streptocoques.
2 : Le milieu et les colonies deviennent noirs, ce qui indique que la bactérie est escule-positive et tolère la bile.
3 : Le milieu et les colonies restent incolores, ce qui indique que la bactérie est escule-négative.
4 : La bactérie ne tolère pas la bile ou l’azide de sodium, ce qui signifie que ce n’est pas un Enterococcus.
Fermentation du mannitol pour l’identification de Staphylococcus aureus :
1 : Quel est le but du test de fermentation du mannitol ?
2 : Quel résultat indique que la bactérie fermente le mannitol ?
3 : Quel est le résultat d’un test de fermentation du mannitol négatif ?
4 : Pourquoi le test de fermentation du mannitol ne fonctionne pas avec certaines bactéries ?
1 : Distinguer les bactéries qui fermentent le mannitol de celles qui ne le fermentent pas, ce qui est utile pour identifier Staphylococcus aureus.
2 : La croissance bactérienne avec jaunissement du milieu, indiquant que la bactérie a fermenté le mannitol.
3 : La croissance bactérienne sans jaunissement du milieu, indiquant que la bactérie ne fermente pas le mannitol.
4 : Parce que certaines bactéries ne tolèrent pas une concentration de 7,5% de NaCl dans le milieu, ce qui empêche leur croissance.
Présence de coagulase pour l’identification de Staphylococcus aureus :
1 : Quel est le but du test de la coagulase ?
2 : Quel est le résultat d’un test de coagulase positif ?
3 : Quel est le résultat d’un test de coagulase négatif ?
1 : Détecter la présence de l’enzyme coagulase, qui est produite uniquement par Staphylococcus aureus chez l’humain.
2 : Formation d’un caillot de fibrine, indiquant que la bactérie produit de la coagulase.
3 : Absence de formation de caillot, indiquant que la bactérie ne produit pas de coagulase.
Présence de DNase pour l’identification de Staphylococcus aureus :
1 : Quel est le but du test de DNase ?
2 : Quel est le résultat d’un test de DNase positif ?
1 : Détecter la présence de l’exoenzyme DNase, produite par Staphylococcus aureus et certaines autres bactéries.
2 : Une zone claire autour de la zone d’ensemencement de la gélose ADN, indiquant que la bactérie produit de la DNase. (Un plus plus compliqué que ça, voir p.186)
Culture des Haemophilus :
1 : Quelle est la principale caractéristique des bactéries du genre Haemophilus ?
2 : Quels sont les facteurs de croissance nécessaires à la culture des Haemophilus ?
3 : Pourquoi faut-il chauffer le sang à 80°C lors de la culture des Haemophilus ?
4 : Quelle gélose est couramment utilisée pour cultiver les Haemophilus ?
1 : Les bactéries du genre Haemophilus sont des bacilles Gram négatif et non sporulés, qui nécessitent des facteurs de croissance spécifiques pour leur culture.
2 : Les Haemophilus ont besoin des facteurs X (trouvé dans le plasma) et V (trouvé dans les globules rouges) pour leur croissance.
3 : Le chauffage à 80°C détruit les inhibiteurs du facteur V présents dans le sang des mammifères, permettant ainsi à ce facteur de devenir disponible pour la culture.
4 : La gélose chocolatée est utilisée car elle permet de libérer le facteur V et fournit également le facteur X présent dans le plasma.
Quelle est la première étape de l’identification des espèces Haemophilus après le Gram ?
La première étape est de déterminer les exigences en facteurs X et V, qui sont essentiels pour leur croissance.
Pourquoi est-il important de contrôler les microorganismes ?
- Prévenir la transmission des maladies et de l’infection;
- Prévenir la décomposition et la détérioration;
- Prévenir la contamination.
Quels sont les trois grands types de moyens de contrôle des microorganismes ?
- Agents et processus physiques;
- Agents chimiques;
- Agents chimiothérapeutiques.
Pourquoi le temps de contact est-il important ?
Tous les microorganismes ne meurent pas instantanément après l’application de l’agent antimicrobien. Un temps d’exposition suffisant est nécessaire pour détruire toutes les bactéries.
Quelle différence existe entre un effet « cide » et un effet « statique » ?
Effet cide : L’agent tue les microorganismes.
Effet statique : L’agent inhibe leur croissance sans les tuer.
Comment la concentration d’un agent antimicrobien influence-t-elle son efficacité ?
Plus la concentration est élevée, plus le temps nécessaire pour tuer les microorganismes est court.
À faibles concentrations, l’agent est souvent microbiostatique, alors qu’à hautes concentrations, il devient microbiocide.
Quel est l’impact de la température sur l’efficacité d’un agent antimicrobien ?
Une température élevée augmente souvent l’effet destructeur de l’agent antimicrobien.
Comment le pH du milieu influence-t-il l’action d’un agent antimicrobien ?
L’acidité ou l’alcalinité peut modifier l’interaction de l’agent avec les microorganismes, augmentant ou réduisant son efficacité selon l’agent utilisé.
Pourquoi le type de microorganisme cible est-il un facteur important dans l’action des agents antimicrobiens ?
Certains agents sont plus efficaces contre des groupes spécifiques de microorganismes (ex. : bactéries, virus ou moisissures).
Quelle phase est plus sensibles aux agents antimicrobiens entre la phase exponentielle et la phase stationnaire?
Les cellules en phase exponentielle de croissance sont plus sensibles aux agents antimicrobiens que celles en phase stationnaire.
Comment la concentration des microorganismes influence-t-elle l’efficacité d’un agent ?
Plus la concentration en microorganismes est élevée, plus il faut de temps ou d’agent antimicrobien pour les éliminer complètement.
Pourquoi l’environnement est-il un facteur critique dans l’action des agents antimicrobiens ?
Les propriétés chimiques et physiques du milieu (ex. : présence de matière organique, humidité, etc.) peuvent altérer l’efficacité de l’agent antimicrobien.
Basses températures :
- Que signifie qu’une bactérie est “dormante” à basse température ?
- La congélation est-elle toujours bactéricide ?
- Cela signifie qu’elle est vivante, mais qu’elle ne montre aucune activité métabolique détectable.
- Non
Hautes températures :
- Quels facteurs influencent l’efficacité de la chaleur pour détruire les microorganismes ? (5)
- Quel est le mode d’action de la chaleur sèche ?
- Donnez un exemple d’utilisation de la chaleur sèche en laboratoire.
- La relation temps/température,
la nature du microorganisme,
sa forme (végétative ou sporulée),
le type de chaleur (sèche ou humide) et
la concentration en microorganismes. - Elle agit en oxydant les protéines des microorganismes.
- La flamme est utilisée pour stériliser les fils de nichrome.
Pourquoi la chaleur humide est-elle plus efficace que la chaleur sèche ?
Parce qu’elle est plus pénétrante. Si l’humidité est faible, le temps d’exposition doit être plus long.
Principes de l’autoclave :
- Quels sont les paramètres standards de température et de pression d’un autoclave ?
- Comment l’autoclave détruit-il les micro-organismes ?
- Quelles sont les applications principales de l’autoclave ?
- 121°C à 15 lb/po² pendant au moins 15 minutes.
- Il utilise de la vapeur saturée pour pénétrer les matériaux, provoquant la dénaturation des protéines et détruisant les micro-organismes, y compris les spores bactériennes.
- Stérilisation d’instruments, de milieux de culture et de déchets biologiques.
Contrôle de qualité avec les ampoules Killit/Sterikon :
- Que contiennent les ampoules Killit/Sterikon ?
- Quelle est la procédure pour vérifier l’efficacité de l’autoclave avec ces ampoules ?
- Des spores de Geobacillus stearothermophilus, un bouillon de culture, du sucre et un indicateur de pH.
2.
Placer l’ampoule dans l’autoclave pendant le cycle.
Incuber à 60°C pendant 48 heures.
Vérifier le résultat :
Milieu clair : stérilisation réussie.
Milieu trouble : stérilisation échouée.
Entre Bacillus (spores) et E. coli, lequel est le plus résistant aux températures élevées ?
Les spores de Bacillus sont beaucoup plus résistantes.
De quelle manière, les rayons UV affectent différemment Bacillus (spores) et E. coli ?
Les spores de Bacillus résistent aux rayons UV, contrairement à E. coli, qui est plus sensible.
Quel microorganisme nécessite des conditions d’autoclave pour être détruit ?
Les spores de Bacillus
Quel est le but principal d’un antibiogramme ?
Déterminer la sensibilité d’une bactérie aux antibiotiques afin de sélectionner celui qui est le plus efficace.
Comment réalise-t-on un antibiogramme ?
En plaçant des disques imprégnés d’antibiotiques sur une gélose MH ensemencée avec la souche bactérienne, puis en observant l’effet des antibiotiques sur la croissance bactérienne.
Quelle est la nature de l’antibiogramme (quantitative ou semi-quantitative) ?
C’est une méthode semi-quantitative.
Dans quel cas utilise-t-on la méthode de la CMI ?
Lorsque l’on doit déterminer la concentration exacte d’antibiotique qui inhibe la croissance d’une souche bactérienne pathogène.
Quelle est la méthode utilisée pour déterminer la CMI ?
On réalise des dilutions en tube (méthode en milieu liquide) pour identifier la concentration minimale d’antibiotique nécessaire pour inhiber la croissance bactérienne.
La méthode de la CMI est-elle quantitative ou semi-quantitative ?
C’est une méthode quantitative.
Où peut-on trouver des bactériophages ?
Ils peuvent être trouvés dans plusieurs types d’environnements, comme l’eau d’égout.
Qu’est-ce qu’un bactériophage ?
Un virus qui parasite les bactéries, spécifiquement les infecte pour se reproduire à leur détriment.
Quelle est la spécificité des bactériophages ?
Chaque phage est très spécifique à son hôte bactérien.
Quelle est la différence entre un cycle lysogène et un cycle lytique ?
Cycle lysogène : Le génome du phage s’intègre à celui de la bactérie, se reproduit synchrone avec l’hôte sans produire de phages infectieux, et peut être rompu artificiellement.
Cycle lytique : Le phage infecte une cellule hôte, la détruit, libère plusieurs phages dans le milieu, qui peuvent à leur tour infecter d’autres cellules.
Comment détecte-t-on la présence des bactériophages dans un échantillon ?
Par l’observation de la formation de plages (zones claires) dans une couche uniforme de bactéries sur une gélose, causées par la destruction des cellules bactériennes par les phages.
Qu’est-ce qu’une Unité Formant des Plages (UFP) ?
C’est une mesure utilisée pour quantifier le nombre de phages présents dans un échantillon, basée sur le nombre de plages formées.
C’est quoi CMB?
Concentration minimale bactéricide
Est-ce possible que CMI = CMB ?
Si oui, expliquer pourquoi.
Oui
Cela peut être égal lorsque l’antibiotique tue les bactéries à la même concentration qui arrête leur croissance, surtout pour les antibiotiques bactéricides (qui tuent les bactéries).
Comment on détermine la CMB ?
- On prépare plusieurs tubes avec différentes concentrations de l’antibiotique.
- On ajoute les bactéries dans chaque tube et on les laisse incuber.
- Après incubation, on prélève un peu de chaque tube et on le met sur une gélose pour voir si les bactéries survivent.
- La CMB est la plus faible concentration d’antibiotique où aucune bactérie ne survit sur la gélose (pas de colonies).
À quoi sert un témoin?
Un témoin sert de référence pour comparer les résultats d’une expérience.
Peut-on toujours utilisé un témoin?
Le témoin est toujours obligatoire. Cependant, si les bactéries du témoin n’ont pas eu de croissance, l’expérience ne peut être interprétée, car on n’a plus l’«objet» de comparaison pour faire nos interprétations.
C’est quoi la différence en CMI et CMB ?
CMI : concentration minimale pour inhiber la croissance.
CMB : concentration minimale pour tuer les bactéries.
Quels milieux de culture ne peuvent pas être autoclavés ?
Ceux qui contiennent du sérum, des sucres, des vitamines ou des antibiotiques
Quelle méthode est utilisée pour stériliser des milieux non autoclavables ?
La filtration.
Pourquoi la phase de culture est-elle importante dans la stérilisation ?
Une culture en phase exponentielle (jeune) est moins résistante qu’une culture en phase stationnaire.
Que doit-on faire si le volume à stériliser est important ?
Augmenter le temps d’exposition à la chaleur humide.
Quelles sont les deux catégories principales des techniques de dénombrement des bactéries ?
a) Les techniques mesurant le nombre total de bactéries (vivantes et mortes).
b) Les techniques mesurant le nombre de bactéries viables (vivantes).
Pourquoi utilise-t-on les unités UFC/ml pour exprimer les résultats des bactéries viables ?
Chaque colonie sur une gélose provient généralement d’une seule bactérie viable. En comptant les colonies, on obtient le nombre de bactéries viables par unité de volume. Ces résultats sont exprimés en Unités Formant Colonies (UFC) par millilitre.
Quelle est la marge d’erreur typique des techniques de dénombrement des bactéries viables ?
La marge d’erreur typique est d’environ 10 %.
Quelle bactérie est considérée comme strictement d’origine fécale ?
E. coli
Que signifie la présence d’entérocoques dans l’eau d’un puits ?
La présence d’entérocoques dans l’eau d’un puits peut indiquer une contamination fécale ou une infiltration d’eau de surface.
Que révèlent les coliformes totaux dans une analyse de qualité d’eau ?
Les coliformes totaux indiquent une dégradation générale de la qualité bactérienne de l’eau.
Quel est le principe de la méthode de la membrane filtrante ?
Le principe de la méthode est de faire passer un liquide à travers un filtre afin que les bactéries soient retenues à la surface de celui-ci.
Ensuite, on place le filtre sur un milieu de culture stérile.
Comme les éléments nutritifs peuvent diffuser à travers le filtre, les bactéries pourront se multiplier et former des colonies sur la surface du filtre.
Quelle porosité de filtre est nécessaire pour retenir les bactéries dans la méthode de la membrane filtrante ?
Une porosité de 0,45 µm ou 0,22 µm est utilisée pour retenir les bactéries.
Quels sont les types de comptes bactériens réalisés avec la méthode de la membrane filtrante ? (4)
Compte total sur un milieu nutritif.
Compte des coliformes totaux (CT) sur le milieu m-Endo.
Compte des coliformes fécaux (CF) sur le milieu mFC.
Compte des entérocoques sur le milieu m-enterococcus.
Comment sont identifiés les coliformes totaux sur le milieu m-Endo ?
Les coliformes totaux apparaissent comme des colonies rouges à reflet vert métallique sur le milieu m-Endo.
Quels sont les critères d’identification des coliformes fécaux sur le milieu mFC incubé à 44,5 °C ?
Les coliformes fécaux fermentent le lactose et apparaissent comme des colonies bleues
Pourquoi utilise-t-on le milieu m-enterococcus pour détecter les entérocoques ?
Le milieu m-enterococcus inhibe la croissance des bactéries Gram négatif, favorisant ainsi la détection spécifique des entérocoques, qui apparaissent comme des colonies rouge foncé.
Quelles sont les deux formes principales des protozoaires ?
Trophozoïte : forme végétative/active.
Kyste : forme de résistance (enkystée) lorsque les conditions sont défavorables.
Quelle est la nature cellulaire des protozoaires ?
Les protozoaires sont des organismes unicellulaires eucaryotiques.
Les protozoaires sont-ils capables de mouvement ?
Oui, ils sont généralement doués de mouvement pendant une partie plus ou moins longue de leur cycle de vie.
Que représente le kyste chez les protozoaires ?
Le kyste est une forme de résistance des protozoaires qui leur permet de survivre dans des conditions défavorables.
