Examen 1 Flashcards
Qu’est-ce qui change par rapport à l’ADN selon son organisme?
1.Organsiation
2. Quantité
3. Régulation
Quelles sont les 3 composantes de la dogme central?
ADN
ARNmessager
Protéines
Combien de paires de bases possèdent une cellule?
Environ 3 milliards de pb
Définir le génome et donnez sa forme.
1 à plusieurs molécules d’ADN
Sous forme de chromosomes
Quels sont les 3 rôles de l’ADN?
Caractère hériditaire
Matériel génétique contenant information
Variation/mutation génétique
Combien de liaison d’hydrogène A-T et G-C ont-ils? Laquelle de ces liaisons est la plus stable?
2 liaisons A-T
3 liaison G-C (plus stable et plus difficile à séparer)
Pourquoi isoler un gène est important?
- Déterminer la séquence d’un gène
- Transférer des gènes d’un organisme à un autre
À quoi servent les clones d’ADN?
À créer une bande d’ADN (nécessite plusieurs bactéries pour connaître plus de séquence)
Vrai ou faux, on coupe les plasmides pour insérer un fragment d’ADN.
Vrai
Qu’est-ce que chaque colonies de bactéries sur une pétri représente?
Une séquence codant pour formation d’une bande d’ADN
Nommez une enzyme de restriction.
EcoR1 (coupe 6 nucléotides)
Combien de nucléotides peuvent être couper par des enzymes de restriction?
4 à 6 nucléotides
Définir : Système immunitaire pour les bactéries.
Enzyme de restriction
Est-ce qu’on peut utiliser EcoR1 pour créer bande d’ADN?
Oui
À quoi servent les endonucléases?
À couper à l’intérieur des molécules d’ADN
Quelles sont les 2 façons d’isoler l’ADN?
Centrifugation
Choc thermique
Décrire un peu le choc thermique qui permet l’isolation de l’ADN.
Bactérie compétante avec une membrane perturbé par Calcium puis CHOC THERMIQUE qui fait sortir le calcium et qui fait rentrer le plasmique à l’intérieur
Définir lac-, gal- et tetr.
Lac- : pas capable d’utiliser du lactose comme source de carbone
Gal- : pas capable d’utiliser du galactose comme source de carbone
Tetr : gène de résistance à la tétracycline
À quoi sert ori dans un plasmide?
Origine de réplication pour faire fourche de réplication
Si nous coupons avec BamH 1 375, à quelle endroit l’ADN va s’installer?
Après BamH
Vrai ou faux, le plasmide se replit rarement sur lui-même?
Faux, la plupart de temps, le plasmide se replit sur lui-même
Quel gène code la bêta-galactosidase?
Lac Z
Pourquoi chaque enzyme coupe seulement à une place?
Seulement présent à un endroit, car n’existe pas ailleurs donc coupe à un endroit spécifique
Dans un plasmide, qu’est-ce qui est toujours présent?
Origine de réplication (ori)
Résistance à antibiotique
Quelle est la simple différence entre pUC ori et f1 ori?
Nombre de réplication varie entre les 2 types d’ori
Définir T7
Promoteur pour les procaryotes nécessaire pour faire ARNmessager
Définir Pcmv
Promoteur utiliser chez les eucaryotes pour faire ARNmessager
Définir SV40
Provient du gène de l’herpès
Définir BGH pA (2)
Site de polyadénisation
Provient de l’hormone de croissance de la vache
Pourquoi la topoisomérase rend le clonage plus facile?
Topo reconnaît vecteurs donc 2 extrémités ne peuvent pas se coller ensemble donc rend plus facile le clonage
À quoi se lie le GFP dans le gène?
V5 épitope et His6
Qu’est-ce que les enzymes de restriction coupe précisément?
Palindrome
Donnez 3 caractéristiques claires des enzymes de restriction.
- Produites par bactéries pour se défendre contre les phages
- Coupent l’ADN du phage, ce qui l’inactive
- Coupent à endroits précis de l’ADN
Les enzymes de restriction coupent effectivement à des endroits précis de l’ADN, où se trouvent ses séquences?
Dans TOUTES les molécules d’ADN
Définir palindrome.
2 brins ont la même séquence mais orientation antiparallèle
Après le clivage, comment est l’extrémité?
Extrémité collante (ou cohésive)
Sma1 est une enzyme de restriction à bout franc ou bout collant?
Bout franc, comme Hae3
Quel est le rôle de la méthylation et nommez les 2 nucléotides où la méthylation peut se produire.
Protège la bactérie contre la coupure par ses propres enzymes de restriction
Sur A et C
Décrire les bactéries utilisées en biomol.
Déficientes en méthylases et en enzymes de restriction
Rôle de l’ADN ligament
Relier les molécules d’ADN
À quoi sert la phosphatase.
Enlève groupement phosphate donc plasmide ne se referme pas, même avec ligase, mais quand il va être mis dans bactérie = il va se refermer
Est-ce qu’une bactérie peut avoir plusieurs plasmides?
Oui, après l’amplification (réplication)
Nommez les 5
Vecteur d’expression
Phages simple-brin
Cosmides
Fosmides
Plasmides
Qu’est-ce que permet les plasmides?
Permet clonage de grosses molécules d’ADN
Nommez les 2 avantages des fosmides.
1 seule copie
Moins de toxicité
Les plasmides sont inutilisables si insert supérieur à combien de kb
20 kb
À quoi sert le gène de résistance à un antibiotique dans les plasmides?
Sélection phénotypique
Que signifie la sélection pour une colonie blanche.
ADN présent
Pas de clivage de X-gal
Que signifie la sélection pour une colonie de bactéries bleue
Pas ADN
Enzyme clive X-gal
Nommez les 2 avantages des phages pour le clonage de gène.
- Empaquetage d’environ 50 kb
- Bras de 15 kb à chaque extrémité de l’insert