Exam #3: Mutagenèse Par Transposition Flashcards
Introduction…
> banque de mutants à couverture large, complète
collection de clones possédant des mutations dans presque chacun des gènes
identification et/ou mieux comprendre le(s) gènes impliqués dans les divers processus physiologiques des bactéries
stratégie efficace de mutagenèse à grande échelle:
-insertions aléatoires d’un transposons par séquençage
-identification du site d’insertion du transposons par séquençage
analyse phénotypique de la banque ordonnée de mutants de Pseudomonas aeruginosa
Matériel et méthode…
> transposons avec un gène de résistance tétracycline
souche p. Aeruginosa
sélection colonie tetR, et repiquage (arrayed) dans des plaques de 384 puits
détermination de la séquence de la jonction ADN-chromosome et du transposons
-déterminer le site d’insertion du transposons
-localisation de la mutation: gène inactivé
Rendu 3-résultats
P.2 mutagénèse par transposition
