Elisa

Question 1

Cite para que o Elisa é usado:

Answer 1

• Detecção de várias moléculas infecciosas
• Detecção de enfermidades autoimunes
• Detecção de alergias
• Detecção de muitos vírus
• Aquilo que ativa o SI produzindo anticorpos e/ou que tiver proteínas disponíveis em fase liquida

Question 2

Quais são as características do Elisa?

Answer 2

• Ensaios em fase sólida
• Anticorpos ou antígenos marcados com enzimas
• Complexo resultante possui atividade imunológica e enzimática (conjugado imunoenzimático)
• Substrato cromogênico
• Produto colorimétrico
• Detecção de antígenos ou anticorpos
• Alta sensibilidade e especificidade
• Baixo custo
• Reprodutibilidade
• Versatilidade

Question 3

Quais são os tipos de métodos usados detectar antígeno e anticorpos, respectivamente?

Answer 3

Direto e indireto

Question 4

Quais são os tipos de Elisa para detectar antígeno?

Answer 4

Direto, competitivo e Sandwich (duplo anticorpo)

Question 5

Quais são os tipos de Elisa para detectar anticorpo?

Answer 5

Indireto, competitivo, Sandwich indireto e avidez

Question 6

No Elisa direto para que serve a solução bloqueadora?

Answer 6

Para impedir que anticorpos se liguem a antígenos e partes da placa não cobertas, pois daria um falso positivo

Question 7

Por que são feitas lavagens?

Answer 7

Para tirar as proteínas que não se aderiram a placa

Question 8

Diga se é verdadeiro ou falso:

Em Elisas que usam anticorpo anti-Ig, esse pode ser de todas as espécies incluindo humana

Answer 8

Falso, não pode ser do homem

Question 9

Por que eu uso o sandwich direto em uns casos e o direto em outros?

Answer 9

Devido a sensibilidade. O sandwich direto se liga com alta sensibilidade ao antígeno, sendo usado quando tiver pouco antígenos

Question 10

Para que é aplicado o Elisa direto?

Answer 10

Titulação de anticorpos conjugados às enzimas

Question 11

Para que é aplicado o Elisa indireto?

Answer 11

Detecção/ titulação de anticorpos em fluidos biológicos

Question 12

Para que é aplicado o Elisa sandwich direto?

Answer 12

Detecção/quantificação de antígenos em fluidos biológicos

Question 13

Para que é aplicado o Elisa sandwich indireto?

Answer 13

Detecção/quantificação de anticorpos em fluidos biológicos

Question 14

Por que eu faço o sandwich indireto no lugar do indireto?

Answer 14

Devido a afinidade, se tiver pouco anticorpo uso esse método

Question 15

No Elisa sandwich amplificado ao que a biotina e a avidina se ligam respectivamente?

Answer 15

Biotina se liga a porção Fc e a avidina se liga a biotina

Question 16

Para que é aplicado o sandwich amplificado?

Answer 16

Quantificação de antígenos em fluidos biológicos

Question 17

Como é feito a análise dos resultados no Elisa competitivo?

Answer 17

Aqui quanto mais colorido mais negativo é o resultado

Question 18

Para que é aplicado o Elisa competitivo?

Answer 18

Detecção/ quantificação de antígenos em fluidos biológicos

Question 19

No Elisa para determinação da avidez de IgG anti T. gondii, o que acontece quando se retira a uréia?

Answer 19

Retira os anticorpos com menor afinidade

Question 20

Como é calculado o índice de avidez?

Answer 20

Densidade optica da ureia positiva dividido pela DO de ureia negativa multiplicado por 100

Question 21

Classifique o índice de avidez:

Answer 21

Menor que 30 é baixa avidez; entre 30 e 60 avidez intermediária; maior que 60 alta avidez

Question 22

Diga se é verdadeiro ou falso:

Posso considerar que a gestante está imune quando IgG for reagente e IgM não

Answer 22

Falso, nunca considerar que a gestante está imune

Question 23

Geralmente para uma interação entre antígeno-anticorpo a Elisa é feita em Overnight. O que pode acelerar essa interação?

Answer 23

Aumentar a temperatura e controlar o pH.

Question 24

Quais são as melhores substâncias bloqueadoras?

Answer 24

Leite desnatado em pó e Soroalbumina bovina - (soros de coelho/equino/cabra)

Question 25

Como pode-se caracterizar sensibilidade?

Answer 25

O quanto o teste é eficaz em identificar corretamente dentre todos os indivíduos avaliados, aqueles que realmente apresentam a característica de interesse, ou seja verdadeiros positivos

Question 26

Como pode-se caracterizar especificidade?

Answer 26

Quanto um teste é capaz de identificar corretamente os indivíduos que não apresentam a condição de interesse, ou seja, verdadeiros negativos

Question 27

Como devo agir com cut off em pesquisas?

Answer 27

Aumentar o valor, mas faz surgir alguns falsos negativos

Question 28

Como devo agir com cut off em laboratório?

Answer 28

Diminuo o valor, assim eu pego todos os doente mais alguns não doente