Electrophorese Des Proteines Flashcards
Les deux réactifs ajoutés pour provoquer la polymérisation?
TEMED et APS(persulfate d’ammonium)
Réactifs employé pour réduire les ponts disulfures des protéines ?
Bêta mercapto ethanol
Vers quelle électrode migrent les protéines en SDS-PAGE
Anode rouge
Pourquoi la glycine migre moins vite que les protéines dans le SDS-PAGE
Car à pH =6,8 elle est presque neutre
Sur quels principes reposent la séparation en 2D?
Charge(pI) puis taille
À pH >pI
Chargés négativement donc migrent vers anode(+)
Quand utilise-t-on le PAGE
Pour conserver la structure d’une protéine en vue de l’analyser
Qu’est-ce qu’un gel non dénaturant ?
Gel sans SDS donc la migration dépend de la forme taille et charge nette de la protéine et du PH
PH>PI =- donc vers +
PH<PI=+ donc vers -
Qu’est-ce que la focalisation isoélectrique?
C’est une electrophorese réalisé en condition non dénaturante en présence d’ampholyte pour construire un gradient de PH
A quoi sert la spectrométries de masse
Identifier la protéine et sa taille
Pourquoi le SDS permet de séparer uniquement selon la taille ?
Il confère aux protéines une charge nette indépendante et de leur composition en acide aminés
Quel est le rôle du SDS
Briser les liens non- covalents des protéines
Se fixer à la chaîne peptidique
Empêcher les protéines dénaturées de s’agréger et précipiter
A quoi sert le gel de concentration
Permet aux protéines d’arriver en même temps au gel de séparation donc permet aux protéines de même taille de migrer en une zone étroite
Qu’est-ce que l’immunbuvardage
Le procédé selon lequel les molécules présentes dans un gel sont transférées après l’électrophorese sur une membrane de nitrocellulose ou PvDF
Quel est l’avantage du 2D-DIGE
Utilise les marquage de protéines selon leur provenance pour analyser deux ou plusieurs échantillons ≠ensemble
