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Quelle différence principale et ressemblance y a-t-il entre les microscope photoniques et électroniques ?
Les photoniques fonctionnent avec des photons tandis que les électroniques fonctionnent avec des électrons. Ils ont des principes physiques semblables.
Avec quel type de microscope le premier virus a-t-il pu être observé ?
Avec un microscope électronique.
Quelles différences y a-t-il entre les photons et les électrons, au niveau du microscope ?
Les électrons ont des longueurs d’onde beaucoup plus petites que les photons. Les photons ont des longueurs d’ondes particulières.
Quelle formule permet de calculer la limite de résolution ?
LR = longueur d’onde / 2nsin(teta)
Quel est le domaine de longueurs d’onde visibles à l’oeil ?
Entre 400 et 700 nm.
Quel type de rayon se retrouvent entre 180 et 400nm ?
Les UV.
Pourquoi est-il nécessaire d’ajouter de l’huile à immersion ?
L’huile à immersion (n=1,56) permet d’avoir un indice de réfraction plus près de celui de verre (n=1,50), comparativement à l’air (n=1,0). Ainsi, on perd beaucoup moins de faisceaux lumineux.
Quels sont les avantages d’observer des microorganismes à l’état frais ?
- Permet d’observer la morphologie;
- Permet d’observer la motilité;
- Permet d’observer l’axe de division cellulaire des protozoaires ;
- Corps d’inclusion cytoplasmique.
Quel est le désavantage de la coloration et fixation ?
On doit observer des microorganismes morts.
La morphologie s’observe mieux avec ou sans colorant ?
Avec colorant car il y a un plus grand contraste.
Quel type de coloration, soit simple ou différentielle, permet de distinguer des structures en particulier ?
La coloration différentielle.
En quoi consiste la coloration simple ?
Échantillon sur la lame, on trempe l’échantillon dans le colorant puis on rince.
Qu’est ce qui permet d’observer des structures claires sur un fond noir ?
L’éclairage oblique.
Quels sont les avantages du microscope à fond noir ?
- Aucune coloration nécessaire, donc organismes vivants;
- Aucune modification à l’échantillon;
- Plus grand contraste.
Quel est le principe du microscope à contraste de phase ?
Il est composé de 2 anneaux de phases, soit un dans l’objectif et un dans le condensateur. Les anneaux retardent l’onde lumineuse afin qu’on puisse traduire une différence de luminosité.
Quel microscope permet la variation de l’angle de polarisation de la lumière et ainsi, permet d’avoir différentes réfractions ?
Le microscope à contraste d’interférence différentielle.
Quels avantages offre le microscope à contraste d’interférence différentielle ?
- Coloration vive donc cellules vivantes;
- Relief 3D;
- Absence de halo de diffraction.
Quelle est la limite du microscope à contraste d’interférence différentielle ?
Les préparations sont transparentes.
Qu’est ce que le fluorochrome ? Et comment fonctionne-t-il ?
Un colorant fluorescent. L’absorption par le colorant de la lumière UV excite le colorant et donc, il retourne à son état de base en éclairant.
Pourquoi le fluorochrome permet d’observer des cellules vivantes ?
Car substance vitale
Qu’est ce qui est utilisée comme diagnostique pour la détection des pathogènes ?
Immunofluorescence
Qui a construit le premier microscope électronique fonctionnel ?
Siemens en 1939
Qu’est ce qui permet une si grande résolution chez les microscopes électroniques ?
la longueur d’onde plus courte des électrons
quelle différence y a-t-il entre l’oculaire d’un microscope électronique et photonique ?
photonique: en verre
électronique: électro aimant
Vrai ou faux : un microscope électronique doit se situé dans un sous-sol ?
Faux
Vrai ou faux : l’oeil humain voit le faisceau des électrons ?
Faux
Quelles sont les limites du microscope électronique ?
Les électrons voyagent dans le vide
◦Intérieur du microscope: vide
◦Échantillons ⇒matériel non-vivant
Les électrons sont non-pénétrants:
◦Coupes ultra-fines (20-100 nm)
Imprégnation
Pourquoi les échantillons d’un microscope électrique ne sont pas vivants ?
car ne peuvent vivre dans vide
En quoi consiste la technique de «coloration» de l’ombrage ?
Vaporisation de métaux Angle précis Recouvre l’échantillon Projette une ombre ◦Billes témoins ⇒taille prédifinie Comparaison des ombres Détermination de l’élévation
Quels sont les types de préparation/«colorations» pour les microscopes électriques ?
Coloration négative
Cryodécapage (freeze etching/fracture)
Quel acide est utilisé lors de la coloration négative ?
acide phosphotungstique
Comment agit la coloration négative ?
acide phosphotungstique ◦Accumulation dans les creux creux ⇒sombres protubérances ⇒claires relief structure des virus
Quel est le principe du cryodécapage ?
◦Congélation T°⇓⇓-180°C) ◦Coupe transversale Fractures aux zones de faiblesse ◦Suivie de la technique d’ombrage Intérieur des cellules et structures
Quelle technique permet la localisation précise d’une protéine dans une cellule ?
Immuno-localisation cellulaire
Comment fonctionne l’immuno-localisation cellulaire ?
Anticorps spécifique protéine/structure ◦Anticorps-billes Fe ou Au ◦Localisation d’une protéine dans la cellule
Quels sont les deux types de microscopes électroniques ?
Microscope électronique à transmission
Microscope électronique à balayage
Comment fonctionne le microscope électronique à transmission ?
Électrons traversent l'échantillon ◦Détecteur sous l’échantillon Images par « transparence » ◦Limite de résolution ⇓ Structures très fines
Comment fonctionne le microscope électronique à balayage ?
Balayage de la surface de l’échantillon ◦Électrons ⇒réfléchis. ◦Détecteur latéral. ◦Surfaces = effet 3D Limite de résolution ⇑
Quel microscope photonique fonctionne avec l’illumination par laser ?
Microscope confocal à balayage laser
Qu’est ce qui rend le microscope à confocal à balayage laser beaucoup plus puissant ?
Détection de la fluorescence Exclusivement du plan au foyer Élimination de la fluorescence des plans hors foyer ⇑contraste, ⇓interférence
Comment fonctionne le microscope à force atomique ?
Déplace sonde effilé à la surface de l’échantillon tout en maintenant constante la distance entre pointe de la sonde et surface
