DNA recombinante

Question 1

etapas de ingeniería genetica

Answer 1

1- localizar el gen
2- aislar el gen con enzimas que cortan DNa
3- insertar otro segmento del DNA
4- introducir DNa recombinado en celula huesped
5- confirmar que celula huesped tiene propiedades del DNMa transferido

Question 2

cuales son los dos tipos de ADN que tienen las bacterias

Answer 2

DNA cromosomico y no cromosomico

Question 3

que contiene el ADN cromosomico de las bacterias

Answer 3

los genes necesarios para vivir

Question 4

que contiene el ADN no cromosomico de las bacterias

Answer 4

lo que le da caracteristicas extra

Question 5

que es el DNa recombinante

Answer 5

secuencia de DNA derivadas de mas de una fuente

Question 6

DNA recombinante->

Answer 6

enzimas de restriccion

Question 7

las enzimas de restriccion son…

Answer 7

endonucleasas

Question 8

definición de enzimas de restriccion

Answer 8

mecanismo de defensa de las bacterias frente a la entrada de ADN foráneo

Question 9

que hacen las enzimas de restriccion

Answer 9

• degradan el DNa extraño
• no degradan el DNA propio de la bacteria

Question 10

que son los bacteriofagos

Answer 10

virus que atacan a las bacterias

Question 11

en donde hacen el corte las endonucleasas

Answer 11

en medio

Question 12

cual es el acronimo de 3 letras cursivas para la nomenclatura de enzimas de restriccion

Answer 12

1: genero de la bacteria
2 y 3: nombre de la especie

Question 13

cual es la nomenclatura de las enzimas de restriccion

Answer 13

• acronimo de 3 letras cursivas
• letras números segun la cepa o serotipo
• numeros romanos segun cronologia en que se aislaron

Question 14

EcoR I
EcoR V

Answer 14

Eco= escherichia coli
R= cepa de la que se saco enzima de restriccion
I, V= cronologia en que se aisló

Question 15

dos funciones de las enzimas de restriccion

Answer 15

• monitorear el ADN que entra en la celula y destruirlo si lo reconoce como extra
• sistema de defensa natural de las bacterias

Question 16

Endonucleasas que hacen

Answer 16

degradan el DNA extraño, reconocen ausencia y cortan el ADN

Question 17

que hacen las enzimas de modificacion en las enzimas de restriccion y cual es

Answer 17

Metilasas:
modifican el ADN propio para que no sea degradado

Question 18

en que residuos de la bacteria se metila

Answer 18

adenina o citosina

Question 19

Porque el ADN metilado es inmune

Answer 19

porque si no seria degradado

Question 20

por que razon meterían las enzimas de restriccion el DNa bacteriofago al DNa cromosomico

Answer 20

como memoria

Question 21

cuantos tipos de enzimas de restriccion hay

Answer 21

4

Question 22

e. de r. tipo 1 que hace

Answer 22

reconoce secuencia especifica
corta miles de pares de bases
lejos de donde lo encontro

Question 23

la enzima de restriccion tipo 1 es simetrica o asimetrică

Answer 23

asimetrica

Question 24

donde es el sitio de corte en los tipo 1

Answer 24

aleatorio, rio arriba o rio abajo

Question 25

que tipo de enzimas de restriccion usamos en laboratorio

Answer 25

tipo 2

Question 26

que reconocen los tipo 2

Answer 26

secuencias PALINDROMICAS

Question 27

caracteristica de tipo 2

Answer 27

sitio de reconocimiento es igual al sitio de corte (se lee igual de izq a der que de der a izq)

Question 28

tipo 3

Answer 28

asimétrico, quien sabe donde se hace corte

Question 29

diferencia entre tipo 1 y topo 3

Answer 29

que uno corta mas cerca y otro mas lejos

Question 30

de que tipo no se sabe mucho

Answer 30

4

Question 31

reconoce DNA metilado

Answer 31

enzimas de restriccion tipo 4

Question 32

tipos de corte

Answer 32

cohesivo y romo

Question 33

corte cohesivo

Answer 33

cortes en diferente posición, asimétricos y con 3-5 nt libres

Question 34

corte romo

Answer 34

corte simétricos sin nt libres

Question 35

que es el DNa recombinante

Answer 35

el DNA de dos fuentes diferentes se tratan con una enzima de restriccion que genera cortes cohesivos

Question 36

son complementarios los fragmentos generados por la misma enzima de restriccion?

Answer 36

verdadero

Question 37

una vez que el plasmido agarra al DNa que cortamos, que se hace?

Answer 37

ponemos lugasa para unir

Question 38

que es un vector

Answer 38

molecula de dsDNA con capacidad de albergar un fragmento de DNA exógeno

Question 39

tipos de vectores

Answer 39

clonacion y expresión

Question 40

cuales entran dentro de los vectores de clonacion

Answer 40

plasmidos, bacteriofagos, fagemidos, cosmidos

Question 41

cuales estan dentro de los vectores de expresión

Answer 41

plasmidos y bacteriofagos

Question 42

que tipo de corte es preferido en estas situaciones

Answer 42

cortes cohesivos

Question 43

que tiene el vector de clonacion

Answer 43

- origen de replicacion - sitio multiple de clonacion - marcador de seleccion

Question 44

que es el sitio multiple de clonacion

Answer 44

secuencia especifica que es reconocida por las enzimas de restriccion para poder insertar el DNa complementario

Question 45

que tiene el vector de expresión

Answer 45

- origen de replicacion - sitio múltiplee de clonacion - marcador de selección - promotor - IRES - secuencia de poli A

Question 46

que es el ires o para que funciona

Answer 46

sitio de entrada a ribosoma

Question 47

que son los plasmidos

Answer 47

moleculas circulares de DNA de doble hebra que replican de forma autónoma en bacterias

Question 48

tamaño de plasmidos

Answer 48

10 kb

Question 49

ventajas de plasmidos

Answer 49

- faciles de manipular - alta eficacia de transformación - Multiples cities de clonacion

Question 50

aplicaciones de los plasmido

Answer 50

- clonacion simple - expresión de proteinas en bacterias

Question 51

ejemplo de bacteriofago wue hemos usado en lab

Answer 51

lambda

Question 52

tamaño de bacteriofago

Answer 52

10-20kb

Question 53

ventajas de bacteriofagos

Answer 53

- permite seleccion por lisis de placas - alta eficacia de empaquetamiento

Question 54

aplicaciones de bacteriofagos

Answer 54

- clonacion de enotecas

Question 55

que es un cosmido

Answer 55

híbrido entre plasmido y fago

Question 56

tamaño de cósmico

Answer 56

hasta 45kb

Question 57

ventajas del comido

Answer 57

- capacidad para fragmentos grandes - transformación eficiente como plasmido

Question 58

aplicaciones de cosmido

Answer 58

- genotecas genéricas - clonacion de genes grandes

Question 59

cuantos y cuales son los cromosomas artificiales en el DNa recombinante

Answer 59

(2) --->>BAC( bacteria) y YAC (levadura)

Question 60

tipos de huesped

Answer 60

- bacterias - levaduras

Question 61

ventaja de la bacteria como huesped

Answer 61

- rapido crecimiento - bajo costo - faules de transformar bien caracterizados genéticamente

Question 62

limitaciones de las bacterias como huesped

Answer 62

- no realizan modificaciones postraduccionales - problemas con plegamiento de proteinas eucariotas complejas

Question 63

aplicaciones del uso de bacterias

Answer 63

- producción de proteinas simples amplificacion de plasmidos

Question 64

ventajas del uso de levaduras como huesped

Answer 64

- sistema eucaristía simple - capacidad de glucpsilacion - facil manipulation genetica

Question 65

limitaciones de levaduras

Answer 65

- glucosilacio distinta a la humana y puede afectar su funcionalidad

Question 66

aplicaciones del uso de bacterias

Answer 66

producción de proteinas recombinantes con estructura compleja

Question 67

pasos de clonacion

Answer 67

1- preparación del inserto que se va a clonar 2- preparación del vector 3- ligación inserto-vector 4- preparación de celulas competentes 5- transformación celular 6- identificación de las colonias celulares con el vector recombinante

Question 68

que quiere decir el paso 5 con transformacionales celular

Answer 68

- adiquision del gen exógeno - nuevo fenotipo a la celula

Question 69

con que se prepara el inserto en pas 1

Answer 69

enzima de restriccion

Question 70

que implica la preparación del vector

Answer 70

- enzima de restriccion - desfosforliacion del vector - purificación del plasmido