Diagnóstico de laboratorio de infecciones virales-Parte 2 Flashcards
Cómo se observan los fragmentos de ADN amplificados de la PCR?
Electroforesis de ADN en gel de agarosa
Con que se tiñe los fragmentos de ADN para observarlos en la electroforesis?
Bromuro de etilio
Cómo se observan los fragmentos de ADN en la electroforesis?
Luz UV
Qué PCR se utiliza para la detección de virus de ADN?
PCR tradicional
Qué PCR se utiliza para la detección de virus de ARN?
Reacción en cadena de la polimerasa transcriptasa inversa
De qué depende la velocidad de migración del fragmento de ADN en el gel para electroforesis?
Del tamaño de la molécula
Verdadero o falso: los fragmentos más grandes de ADN van a migrar más lejos
Falso
Qué paso extra se agrega para detectar virus de ARN por PCR?
Una transcriptasa inversa para obtener ADN del ARN viral
Qué es la PCR multiplex?
PCR que se utiliza múltiples pares de primers en la misma reacción de amplificación
Para qué se utiliza la PCR multiplex?
Para detectar varios genomas a la vez
Verdadero o falso: la PCR en tiempo real es la más sensible
Verdadero
Verdadero o falso: en la PCR en tiempo real se usa la electroforesis para observar los resultados
Falso
Qué elemento se agrega a la PCR en tiempo real?
Una sonda
Función de la sonda en la PCR a tiempo real
Primer modificado que emite fluorescencia si es que está presente la secuencia viral
Función del quencher en la sonda
Absorbe la luz emitida por el flurocromo de la sonda
Qué secuencia tiene la sonda en la PCR tiempo real?
Una secuencia que se encuentra entre los dos primers
Cómo funciona la hibidración de sonda en la PCR a tiempo real?
Una vez alineada la sonda, la taq polimerasa empezará a agregar nucleótidos, y si esa secuencia viral se encuentra ahí, la sonda se rompe y hay una emisión de señal luminosa porque el quencher no estará cerca para absorber la emisión de luz
Cómo se observan los resultados en una PCR tiempo real?
Se observan curvas que nos muestran la presencia del virus
Cuáles son las limitaciones de la serología?
Reacciones cruzadas con virus relacionados antigénicamente entre sí
Inmunidad pasiva en los animales jóvenes puede persistir varios meses
Vacunación
Qué se encuentra al fondo del pocillo en la ELISA para detectar la presencia de anticuerpos virales?
Un antígeno viral
A qué se unirá el anticuerpo de la muestra en la ELISA para detección de anticuerpos?
Al antígeno viral
A qué se une el Anti-IgG en la ELISA para detección de anticuerpos?
A la región constante del anticuerpo de la muestra
Ventajas de la inmunocromatografía
Pruebas rápidas
Pruebas fáciles
Desventajas de la inmunocromatografía
No suele ser muy sensible
Qué muestra se utiliza en la inmunocromatografía?
Muestra de sangre/suero
Muestra líquida
A qué están unidos los antígenos de la prueba de inmunocromatografía?
A oro coloidal
Función del oro coloidal en la inmunocromatografía
Se muestra rojo al aire para que se observen las tiras en la prueba
Qué se encuentra en la tira M de la inmunocromatografía?
Anticuerpos anti-IgM fijados
Qué se encuentra en la tira G de la inmunocromatografía?
Anticuerpos anti-IgG fijados
Qué se encuentra en la tira de control de la inmunocromatografía?
Anticuerpos anti IgG de conejo
Cómo es el complejo formado en la tira M de la inmunocromatografía?
Parte constante del anticuerpo IgM unido a la parte variable del anticuerpo anti-IgM y al antígeno viral con oro coloidal en la parte variable
Cómo es el complejo formado en la tira G de la inmunocromatografía?
Parte constante del anticuerpo IgG unido a la parte variable del anticuerpo anti-IgG y al antígeno viral con oro coloidal en la parte variable
Cómo es el complejo formado en la tira de control de la inmunocromatografía?
Parte variable del anticuerpo IgG de conejo unido a la parte variable del anticuerpo anti-IgG de conejo y unido al oro coloidal en su parte constante
Qué es la prueba de Coggins?
Prueba oficial de referencia para el diagnóstico de la AIE
En qué mecanismo se basa la prueba de Coggins?
En la inmunoprecipitación
Qué virus produce la AIE?
lentivirus de la familia Retroviridae
Cómo funciona la prueba de Coggins?
En la mitad se encuentra el antígeno viral. Saltando uno se colocan los sueros de los animales e intercalado se colocan los sueros positivos. Se observa la línea creada entre los antígenos y los sueros, si aparece una línea es positivo
