Cytométire De Flux Flashcards
Quel élément n’est pas un composant d’un cytomètre en flux ?
a) Tubes photomultiplicateurs
b) Fluide gaine
c) Chambre à circulation
d) Chambre d’hémoglobine
Chambre d’hémoglobine
Quelle application est une application clinique de la cytométrie en flux ?
a) Évaluation du fer corporel total
b) Immunophénotypage
c) Amplification de l’ADN
d) Analyse cytogénétique
Immunophénotypage
Les énoncés suivants sont exacts concernant les fluorochromes, sauf
a) Ils excitent à une longueur d’onde et émettent de la lumière à une longueur d’onde
différente.
b) Ils peuvent se lier à l’ADN ou à l’ARN.
c) Ils peuvent être utilisés pour marquer des anticorps de détection.
d) Ils contribuent à la lumière diffusée causée par une cellule lorsqu’elle traverse la cellule
de débit.
Ils contribuent à la lumière diffusée causée par une cellule lorsqu’elle traverse la cellule
de débit.
Un rapport de cytofluorimétrie révèle une population de diffusion unique de petite taille
et de faible complexité. Quatre-vingt-dix pour cent des cellules de cette population ont
CD2 à leur surface. Quelle est la lignée la plus probable de la population inconnue?
a) Neutrophiles
b) Cellules T
c) Cellules B
d) Monocytes
Cellules T
Un seul groupe de cellules possédant des phénotypes aberrants identiques est défini
comme :
a) Monoclonal
b) Clonage
c) Tumorigène
d) Contour bloqué
Clonage
Lequel n’est pas un échantillon approprié pour la cytométrie en flux ?
a) Sang
b) Moelle osseuse
c) Tissu lymphoïde
d) Plasma
Plasma
Un patient séropositif se fait prélever du sang pour obtenir son compte de CD4. Ses
résultats sont les suivants : Nombre de globules blancs : 2,0 × 109/L avec 15 % de
lymphocytes. Les cellules CD4 positives représentent 10 % du nombre total de
lymphocytes. Quel est le nombre absolu de CD4 de ce patient et qu’est-ce que cela
signifie ?
a) Le nombre absolu de CD4 du patient est de 300/mcL et il a le SIDA.
b) Le nombre absolu de CD4 du patient est de 180/mcL et il a le SIDA.
c) Le nombre absolu de CD4 du patient est de 300/mcL et il n’a pas le SIDA.
d) Le nombre absolu de CD4 du patient est de 120/mcL et il a le SIDA
Le nombre absolu de CD4 du patient est de 300/mcL et il n’a pas le SIDA
Quel énoncé est utilisé pour déterminer la relation entre le contenu des cellules tumorales
et les cellules en division normales ?
a) La concentration en absorbance du fluorochrome
b) L’index ADN
c) La fraction de phase S
d) La fraction de phase G2/M
L’index ADN
Le colorant fluorescent utilisé par les analyseurs d’hématologie pour compter les
réticulocytes se lie à :
a) ADN
b) Protéines
c) ARN
d) Acides nucléiques
ARN
Le cytomètre en flux contient une chambre d’écoulement qui comporte deux colonnes de
fluide – échantillon et gaine – maintenues à des pressions différentes. Quelle affirmation
concernant la chambre à circulation est correcte ?
a) Les cellules de la colonne externe se dispersent.
b) Le fluide échantillon a un écoulement turbulent.
c) Les cellules sont alignées en file devant le laser.
d) Les deux colonnes de fluide diffèrent par la couleur.
Les cellules sont alignées en file devant le laser.
Quel est l’avantage d’utiliser des anticorps monoclonaux plutôt que des anticorps
polyclonaux dans l’immunophénotypage ?
a) Ils sont disponibles dans le commerce.
b) L’antigène peut être reconnu même si certaines parties de celui-ci sont anormales.
c) Ils ont une pureté et une reproductibilité élevées.
d) Ils peuvent être directement attachés aux fluorochromes.
Ils ont une pureté et une reproductibilité élevées.
Quels marqueurs sont utiles dans l’immunophénotypage de la leucémie/lymphome de la
lignée cellulaire T ?
a) CD103, CD61 et CD59
b) CD38, CD59 et CD13
c) CD2, CD3, CD4, CD5, CD7 et CD8
d) CD55, CD25 et kappa
CD2, CD3, CD4, CD5, CD7 et CD8
Les néoplasmes sont constitués d’une population de cellules identiques ou d’un clone de
cellules. Une fois identifié, le clone peut conduire à la découverte d’une malignité
lymphoïde ou d’un autre trouble lymphoprolifératif. La clonalité peut être détectée par :
a) L’expression uniforme d’une chaîne légère d’immunoglobuline
b) Un mélange de cellules avec des chaînes légères kappa ou lambda
c) Une détection d’immunoglobulines de surface
d) L’intensité lumineuse de tous les marqueurs monoclonaux
L’expression uniforme d’une chaîne légère d’immunoglobuline
Le pourcentage de lymphocytes CD4 positifs est déterminé par cytométrie en flux en
utilisant une coloration avec des anticorps marqués par fluorescence contre CD3 et CD4
suivi d’une lyse des globules rouges du sang total. Quels calculs la double plate-forme
utilise-t-elle pour déterminer le nombre absolu de cellules CD4 positives ?
a) Compte absolu de CD4 100
b) Nombre de cellules CD4+ 100
c) Nombre absolu de lymphocytes % lymphocytes CD4+/100
d) % lymphocytes % lymphocytes CD4+/100
Nombre absolu de lymphocytes % lymphocytes CD4+/100
Les cellules peuvent être séparées lors de l’analyse des données par gating. Ce processus
d’isolement des cellules peut être basé sur quelles propriétés ?
a) Taille et granularité des cellules
b) Densité cellulaire
c) Forme du noyau
d) Couleur du cytoplasme
Taille et granularité des cellules
Quels sont les deux marqueurs CD utiles pour identifier différemment la LLC à partir de
la leucémie à tricholeucocytes ?
a) CD19 et CD5
b) CD5 et CD11c
c) CD5 et CD10
d) sIg et CD25
CD5 et CD11c
Un échantillon de sang d’un patient suspecté de LLA est reçu dans le laboratoire de flux
pour immunophénotypage. L’analyse est effectuée et des marqueurs de cellules B
standard sont présents, mais le patient est également CD33-positif. Quelle est la raison la
plus probable de cet événement?
a) Le patient a un pronostic plus sombre que la LLA standard.
b) Le patient répond à la chimiothérapie.
c) Le patient est atteint de LLA avec des antigènes cellulaires myéloïdes aberrants.
d) Il ne peut pas être déterminé par les informations fournies.
Le patient est atteint de LLA avec des antigènes cellulaires myéloïdes aberrants.
Quel élément est considéré comme un inconvénient de l’immunophénotypage d’une
suspicion de leucémie aiguë ?
a) CNP LBC
b) Hétérogénéité de la lignée
c) Manque de sensibilité
d) Manque de spécificité
Hétérogénéité de la lignée
Dans le diagnostic de l’HPN (hémoglobinurie paroxystique nocturne), quel test est le plus
sensible à sa détection ?
a) Phénotype d’ancrage GPI
b) Test de Ham
c) Test de lyse du saccharose
d) Test de fragilité osmotique
Phénotype d’ancrage GPI
Quel analyte est le meilleur indicateur de l’image globale du système immunitaire chez un
patient séropositif ?
a) Compte absolu de CD4
b) Nombre relatif de lymphocytes
c) Nombre de globules blancs
d) Compte relatif des CD4
Compte absolu de CD4
cellule inconnue ressemblant à une hématogone (Les hématogones sont des
précurseurs lymphoïdes bénins dont la morphologie et l’immunophénotype sont
similaires aux blastes retrouvés dans la LAL) possède les antigènes CD19 et CD20.
Quelle est la lignée de la cellule inconnue ?
a) Myéloïde
b) Monocytaire
c) Lymphoïde
d) Érythroïde
Lymphoïde
L’EWGCCA (European Working Group on Clinical Cell Analysis) recommande
d’effectuer quel élément avec le dénombrement CD34 ?
a) Double coloration avec CD45
b) Indice ADN
c) FIR
d) Exclure les cellules avec de faibles niveaux d’expression de CD 45
Double coloration avec CD45
L’expression de plusieurs antigènes de deux lignées différentes complique la
catégorisation du diagnostic en LMA ou LLA. Cette expression biphénotypique vers plus
d’une lignée, restreint l’utilisation de l’immunophénotypage. Pour différencier la LMA et
la LLA, la coloration avec laquelle des colorations cytochimiques suivantes indique la
LMA ?
a) PAS
b) Giemsa
c) Myélopéroxydase
d) Orange thiazole
Myélopéroxydase
L’immunophénotypage est essentiel pour diagnostiquer la LLA, séparer la LLA des
lignées T et B et identifier les sous-types de la LLA de la lignée B. Quels marqueurs les
blastes peuvent-ils exprimer dans le précurseur des lymphocytes B LLA ?
a) CD10 et TdT
b) CD1 et CD2
c) CD4 et CD8
d) CD41 et CD61
CD10 et TdT
L’«exemple à suivre» pour le diagnostic de la LMA repose sur quelles informations ?
a) Immunophénotypage et morphologie
b) Morphologie et études cytogénétiques
c) Immunophénotypage et études cytogénétiques
d) Coloration cytochimique et immunophénotypage
Morphologie et études cytogénétiques
Le dénombrement des CD34 est utile dans la greffe de moelle osseuse et de cellules
souches du sang périphérique. Pour cette énumération, les recommandations de
l’EWGCCA incluent une technique et une interprétation appropriées de l’analyse par
cytométrie en flux. Quelle norme a été recommandée pour une acquisition appropriée des
événements ?
a) Inclure les plaquettes et les globules rouges non lysés et les débris
b) Inclure uniquement les populations de coloration faible du CD34
c) Utilisez des conjugués fluorochromes brillants d’anticorps monoclonaux de classe II ou
III qui détectent toutes les glycoformes de CD34
d) Acquérir seulement 10 cellules positives CD34
Utilisez des conjugués fluorochromes brillants d’anticorps monoclonaux de classe II ou
III qui détectent toutes les glycoformes de CD34
Les résultats de flux sur un échantillon de patient ont révélé une absence de CD20 et
CD19 sur les lymphocytes B ainsi qu’une absence de BTK dans les monocytes et les
plaquettes. Quel est le diagnostic le plus probable?
a) Syndrome d’hyper IgM
b) Maladie granulomateuse chronique
c) Syndrome de Wiskott-Aldrich
d) Agammaglobulinémie congénitale liée à l’X
Agammaglobulinémie congénitale liée à l’X
Le rituximab, un anticorps anti-CD20, s’est avéré efficace pour traiter :
a) Polyarthrite rhumatoïde
b) VIH
c) Cancer du sein
d) LAD1
Polyarthrite rhumatoïde
Une stratégie pour déterminer la MRD (Minimal residual disease) dans la LMA qui a été
préconisée est :
a) Panneau : CD38, CD138 et CD45
b) Panneau : CD20/CD38/CD19/CD5
c) “Différent de la normale”
d) Déclenchement booléen
“Différent de la normale”
Quel élément est un composant d’un cytomètre de flux ?
a) Chambre d’écoulement
b) Source de lumière laser
c) Détecteurs de lumière
d) Tout ce qui précède
Tout ce qui précède
Quelle propriété des cellules analysées par cytométrie en flux est liée à la diffusion de la
lumière en angle avant (FS) ?
a) Granularité
b) Complexité nucléaire
c) Taille
d) Forme
Taille
Quelle déclarations explique l’utilisation des fluorochromes dans l’immunophénotypage par
cytométrie en flux clinique ?
a) Tous les fluorochromes émettent de la lumière à la même longueur d’onde.
b) Les fluorochromes se lient de manière non spécifique aux leucocytes.
c) La longueur d’onde de la lumière émise est la même que celle de la lumière incidente.
d) Plusieurs fluorochromes peuvent être excités par la lumière d’une seule longueur d’onde.
Plusieurs fluorochromes peuvent être excités par la lumière d’une seule longueur d’onde.
Quelle propriété est / sont utilisées pour le contrôle dans la cytométrie en flux clinique ?
a) Diffusion de la lumière d’angle avant
b) Diffusion de la lumière à angle latéral
c) Intensité de la coloration CD45
d) Tout ce qui précède
Tout ce qui précède
Quelles sont des applications cliniques de la cytométrie en flux ?
a) Quantification de l’ADN
b) Immunophénotypage
c) Comptage des réticulocytes
d) Tout ce qui précède
Tout ce qui précède
Quelle méthode de cytométrie en flux serait la plus appropriée pour le diagnostic et la
classification de la leucémie lymphoïde chronique ?
a) CD34, énumération
b) Quantification de l’ADN
c) Immunophénotypage
d) Quantification de l’ARN
Immunophénotypage
Quel élément est détecté lors de l’immunophénotypage par cytométrie en flux ?
a) Anticorps utilisant des antigènes de détection
b) Anticorps utilisant des fluorochromes de détection
c) Fluorochromes à l’aide d’anticorps de détection
d) Antigènes utilisant des anticorps de détection
Antigènes utilisant des anticorps de détection
Quel échantillon est le plus approprié pour l’immunophénotypage par cytométrie en flux ?
a) Caillot d’aspiration de moelle osseuse fixé au forgéline
b) Biopsie des ganglions lymphatiques frais
c) Biopsie de moelle osseuse congelée
d) Sang périphérique anticoagulé EDTA d’une semaine
Biopsie des ganglions lymphatiques frais
Une population de cellules avec des marqueurs CD identiques est connue sous le nom de :
a) Phénotype
b) Hématogone
c) Clone
d) Sous-type malin
Clone
Quelle séquence décrit le mieux la procédure d’immunophénotypage cytométrique en flux ?
a) Aspirer dans la cellule d’écoulement / Suspension de cellule de coloration / Mesurer la
diffusion de la lumière et la fluorescence / Afficher les diagrammes de points
b) Suspension de cellules de coloration/Aspirer dans la cellule d’écoulement/Mesurer la
diffusion de la lumière et la fluorescence/Afficher les diagrammes de points
c) Suspension de cellules de coloration/Mesure de la diffusion de la lumière et de la
fluorescence/Aspiration dans la cellule d’écoulement/Graphiques de points d’affichage
d) Suspension de cellules de coloration/Aspiration dans la cellule d’écoulement/Graphiques
de points d’affichage/Mesure de la diffusion de la lumière et de la fluorescence
Suspension de cellules de coloration/Aspirer dans la cellule d’écoulement/Mesurer la
diffusion de la lumière et la fluorescence/Afficher les diagrammes de points
Quel échantillon est le plus approprié pour les tests cytométriques en flux ?
a) Biopsie ganglionnaire fixée dans le for formel
b) Sang périphérique anticoagulé à l’EDTA
c) Frottis d’aspiration de moelle osseuse
d) Liquide céphalorachidien maintenu pendant 1 semaine à température ambiante
Sang périphérique anticoagulé à l’EDTA
Un échantillon de moelle osseuse est obtenu dans le cadre d’une évaluation de la stadification
d’un diagnostic récent de lymphome. Quel paramètre peut être évalué par
immunophénotypage cytométrique en flux ?
a) Schéma nodulaire d’infiltration tissulaire
b) Clone de cellules avec translocation t (14 ;18)
c) Cellules lymphoïdes avec un phénotype anormal
d) Réarrangement du gène de l’immunoglobuline clonale
Cellules lymphoïdes avec un phénotype anormal
Quelle propriété ferait un fluorochrome idéal pour les tests cytométriques en flux ?
a) Exciter à une longueur d’onde différente des autres fluorochromes dans le test
b) Émettre à la même longueur d’onde que les autres fluorochromes dans le test
c) Émettre à une seule longueur d’onde
d) Tout ce qui précède
Émettre à une seule longueur d’onde
Le rapport des études cytométriques en flux effectuées sur un échantillon de sang
périphérique indique la présence d’une population de cellules à forte diffusion latérale de la
lumière. Quelle cellule correspondrait le plus probablement à cette description ?
a) Lymphocytes
b) blasts
c) Neutrophiles
d) Monocytes
Neutrophiles
Les anticorps sont utilisés dans l’immunophénotypage cytométrique en flux parce qu’ils :
a) Se lier spécifiquement aux antigènes
b) Émettre de la lumière à une longueur d’onde définie
c) Diffusion de la lumière laser
d) Sont déjà présents dans le sérum
Se lier spécifiquement aux antigènes
Un échantillon de moelle osseuse contient des blastes qui ne représentent qu’environ 10 %
des cellules présentes. On y trouve aussi des lymphocytes, des granulocytes et des
monocytes. Quelle stratégie serait le plus susceptible d’être utilisée pour isoler les blasts
en en attendant une caractérisation plus poussée ?
a) Lyse des globules rouges
b) «Gate» sur la diffusion de la lumière vers l’avant par rapport à la diffusion latérale de la
lumière
c) «Gate» sur les cellules avec CD45 faible et faible diffusion de la lumière latérale
d) Compensation
«Gate» sur les cellules avec CD45 faible et faible diffusion de la lumière latérale
Quel élément décrit le mieux l’utilisation de la cytométrie en flux dans l’analyse de l’ADN ?
a) Détection de la liaison d’anticorps marqués par fluorescence à l’ADN
b) Détection du réarrangement clonal des gènes
c) Compter les globules rouges circulants avec une teneur élevée en ADN
d) Quantification de l’ADN par la détection d’un colorant fluorescent lié
Quantification de l’ADN par la détection d’un colorant fluorescent lié
Quel résultat détecté par immunophénotypage cytométrique en flux pourrait être utilisé pour
supporter le diagnostic d’un néoplasme ?
a) Expression uniforme d’une chaîne légère d’immunoglobulines
b) Expression anormale d’antigènes myéloïdes sur les lymphoblastes
c) Lymphocytes T sans coloration pour CD5 et CD7
d) Tout ce qui précède
Tout ce qui précède
L’analyse cytométrique en flux d’un ganglion lymphatique ne révèle pas de phénotype
anormal. Le pathologiste est convaincu que le ganglion est impliqué par le lymphome. Une
préparation tactile (empreinte) réalisée à partir de la biopsie contient de nombreuses grosses
cellules absentes d’une lame de cytocentrifugeuse fabriquée à partir de la suspension cellulaire
préparée pour la coloration. Quelle explication est la plus probable?
a) L’échantillon reçu pour la cytométrie en flux n’est pas représentatif de la malignité.
b) Les cellules malignes ont un phénotype normal.
c) Les cellules malignes ont été perdues lors de la désagrégation manuelle des cellules.
d) Les cellules malignes ont été exclues de la porte.
Les cellules malignes ont été perdues lors de la désagrégation manuelle des cellules.
’analyse répétée du cas décrit dans la question précédente augmente le nombre de grosses
cellules présentes dans la suspension colorées et analysées sur le cytomètre en flux. Un
phénotype anormal n’est toujours pas détecté. Quel néoplasme peut être difficile à détecter par
des études d’antigènes de surface cellulaire de cytométrie en flux ?
a) Néoplasmes plasmocytaires
b) Lymphome à cellules T
c) Maladie de Hodgkin
d) Tout ce qui précède
Tout ce qui précède
Un patient a présenté des blastes circulants. L’immunophénotypage par cytométrie en flux
effectué sur le sang périphérique a révélé le phénotype suivant : CD19+, CD10+,
immunoglobuline de surface IgM kappa. Quel élément est le diagnostic le plus probable ?
a) Leucémie myéloïde aiguë
b) Leucémie lymphoblastique aiguë, type précurseur de lymphocytes T
c) Leucémie lymphoblastique aiguë, type de cellules B matures
d) Leucémie lymphoblastique aiguë, type précurseur à cellules B
Leucémie lymphoblastique aiguë, type de cellules B matures
Un patient a été trouvé avec des blastes circulants. Aucun corps d’Auer n’a été identifiée et
toutes les colorations cytochimiques étaient négatives. L’immunophénotypage par cytométrie
en flux a révélé la présence d’antigènes myéloïdes. Quel élément est le diagnostic le plus
approprié ?
a) Leucémie lymphoïde chronique
b) Leucémie lymphoblastique aiguë
c) Leucémie myéloïde aiguë
d) Leucémie myéloïde chronique
Leucémie myéloïde aiguë
Un échantillon de sang périphérique contenant de nombreux blastes a été soumis à des tests
cytométriques en flux. Les blastes se sont révélés positifs pour CD34, négatifs pour les
antigènes myéloïdes, négatifs pour CD19, négatifs pour CD1, CD2, CD3, CD5 et positifs
pour CD7. Quel est le meilleur diagnostic ?
a) Leucémie aiguë avec hétérogénéité de lignée
b) Leucémie myéloïde aiguë
c) Leucémie aiguë indifférenciée
d) Leucémie lymphoblastique aiguë
Leucémie aiguë indifférenciée
Un garçon de 5 ans est évalué à la suite d’une chimiothérapie pour une leucémie
lymphoblastique aiguë d’un phénotype à cellules T. L’immunophénotypage cytométrique en
flux détecte une petite population de cellules immatures, CD34+, CD10+, CD19+. Quelle
anomalie cette population représente-t-elle le plus probablement ?
a) Lymphome folliculaire
b) Leucémie résiduelle
c) Leucémie lymphoblastique aiguë d’un phénotype à cellules B
d) Hématogones
Hématogones
On a demandé à votre laboratoire de cytométrie en flux de dénombrer les cellules CD34+
pour soutenir une nouvelle clinique de greffe de moelle osseuse. Quel élément est le plan
d’action le plus approprié ?
a) Refusez parce qu’il n’a pas été prouvé qu’il est d’une utilité clinique.
b) Appliquer le dosage utilisé pour l’immunophénotypage de routine des échantillons de
leucémie.
c) Introduisez une nouvelle procédure qui peut détecter avec précision 0,1 % de cellules
CD34+.
d) Offrez le test une fois par mois en raison de la faible fréquence des demandes.
Introduisez une nouvelle procédure qui peut détecter avec précision 0,1 % de cellules
CD34+.
Une femme de 55 ans s’est avérée avoir une leucémie mégaloblastique et a fait l’objet d’un
essai thérapeutique sur l’acide folique oral. Une semaine après le début du traitement, il n’y a
pas eu de changement significatif dans son hémoglobine, quelques neutrophiles
hypersegmentés sont notés lors de l’examen de son frottis sanguin, et l’analyse cytométrique
en flux détecte une augmentation de la fraction réticulocytes immatures (IRF). Quelle est la
ligne de conduite la plus appropriée ?
a) Augmentez la dose d’acide folique.
b) Continuez avec le traitement actuel.
c) Passez à la thérapie B12.
d) Passez à l’acide folique intraveineux.
Continuez avec le traitement actuel.
Un homme de 25 ans a subi une biopsie ganglionnaire pour évaluer la lymphadénopathie. Le
rapport d’histologie indique la présence d’un lymphome, mais aucune population anormale
n’est identifiée par immunophénotypage cytométrique en flux. Quel élément pourrait
expliquer l’écart ?
a) C’est un lymphome à cellules T qui manque d’expression aberrante de l’antigène.
b) C’est un lymphome à cellules B qui manque d’immunoglobuline de surface.
c) Toutes les réponses sont correctes.
d) C’est le lymphome hodgkinien.
Toutes les réponses sont correctes.
Quel éléments est le diagnostic le plus probable pour le cas décrit ci-dessus ?
a) Leucémie lymphoïde chronique
b) Leucémie à tricholeucocytes
c) Leucémie lymphoblastique aiguë
d) Mononucléose
Leucémie à tricholeucocytes
Un échantillon de sang périphérique contenant de nombreux blastes a été transmis au
laboratoire de cytométrie en flux. Des études d’immunophénotypage ont démontré une
coloration des blastes pour CD61. Quel est le diagnostic le plus probable ?
a) Lymphome blastique à cellules du manteau
b) Leucémie mégacaryoblastique aiguë
c) Leucémie lymphoblastique aiguë
d) Leucémie aiguë promyélocytaire
Leucémie mégacaryoblastique aiguë
De quelles façons l’immunophénotypage cytométrique en flux peut-il aider à la gestion des
tumeurs malignes lymphoïdes ?
a) Détecter les antigènes pour un traitement potentiel par anticorps monoclonaux.
b) Évaluer les marqueurs pronostiques.
c) Identifier un phénotype caractéristique d’un sous-type de malignité lymphoïde.
d) Tout ce qui précède est correct.
Tout ce qui précède est correct
La lumière diffuser aux petit angle (froward scatter) détecter quoi
La taille
L’angle de 90° (side scatter détecter quoi)
La forme
La structure interne
La granularité cellulaire
