Cours 8 - Cycle cellulaire partie 2 Flashcards
Role wee1 et cdc25
wee1 inhibe CDK/cycline en phosphorylant tyr15 (reg negative
cdc25 = phosphatase et annule effet de wee1 en dephospo CDK-cycline (reg positive)
Au niveau de la base structurale de l’inhibition de CDK par les CDKi que font Cip/Kip et INK ?
- Cip/Kip agit comme une mimique moléculaire de l’ATP
- INK altère l’orientation des 2 lobes des CDK
C’est quoi le mécanisme d’action des CDKi ? L’effet paradoxal ?
- Cip/Kip stabilise (augmente l’activité) de Cycline D-CDK4/6 au début de G1
- Puis, Cip/Kip inhibe l’activité kinase des complexe Cycline-CDK dans G/S
- INK4 inhibe l’interaction entre Cyc.D/CDK4/6 tt le long
Comment inactiver les inhibiteurs de CDK de la famille Cip/Kip (ex. p21/p27) ? 3 façons pour la 3ème explique comment ça marche
1- Dilution : synthese CDK-cyclines pr neutraliser p27
2- Export nucléaire : phosphorylation par AKT pour inactiver p27 et exportation nucléaire
3- Destruction par le SCF
p27 est ubiquitine puis degrade
(les cdki doivent dabord etre polyphospho par les complexes cdk-cyc pr etre reconnus par SCF puis ubi)
C’est quoi le mode de fonctionnement de l’ubiquitine ?
Mode de fonctionnement de l’ubiquitine : proteine a lys ubi –> va être dégradé par le protéasome
Qui contrôlent la dégradation des cyclines (ubiquitination) ?
Les ubiquitines ligases (E3)
Quels sont les 2 types d’E3 ligases ? avec période
2 types d’E3 ligases
a. En M et G1 : Anaphase promoting complex (APC) : active par la protéine Cdc20/Fizzy en
métaphase et par Cdh1 en télophase et G1
b. En G1/S : Ubiquitine ligase SCF
Comment fonctionne un protéasome ?
extrémité reconnaît une chaîne de poly-ubiquitine d’au
moins 4 unités de long ; le « cap » recycle l’ubiquitine et déplie les protéines pour qu’elles y soient
dégradées
Quels sont les deux sous unités qui régulent APC ? a quel moment chacune d’elle fait effet ? ont elles un effet paradoxale ? Est ce qu’elles donnent specif au substrat?
Cdc20 : mitose (metaphase)
Cdh1 : fin mitose (telophase) début G1
oui car phosphorylation de L’une active APC l’autre devien inactive et vice-versa
(permet quelles ne sont pas actives en mm temps)
OUiiiii
c’est quoi le complexe APC ?
ctrl cycle cell specifiquement metaphase -> anaphase
et entree en G1
De quoi est responsable le SCF ? comment ça se fait ? (2)
SCF detruit prot phospho (specifiquement cycl D et E en G1/S)
elle a une fbox pr reconnaitre substrat phospho (ago pr cycl E et fbx4 pr cycl D)
*Degrade aussi p27
Les 7 modes de régulation des CDK les 3 neg et 4 positifs
- Transcription des cyclines et formation d’un complexe avec CDK
- Phosphorylation de la thréonine 160 dans la boucle d’activation (Boucle T) par CAK
- Phosphorylation de la tyrosine 15 par Wee1 (négatif)
- Déphosphorylation de la tyrosine 15 par la phosphatase Cdc25
5.Association CDKi positif –> cipkip G1 - Association avec les CKDi (négatif) –> INK G1 et cipkip g1/s/g2
- Dégradation par le protéasome (négatif)
Par quoi est marqué le début de la mitose ?
Le point de départ = la synthèse des cyclines mitotiques début en phase S (cycline B)
Quelle est la situation en fin de G2 ? (4) niveau des cyclines et tout ça
La situation en fin de G2…
o Cycline A-CDK1 : actif et au noyau
o Cycline B-CDK1 : inactif (boucle activation non-phosphorylé) et dans le cytosol
o Wee1 actif = phospho tyr15 de cycline B-CDK 1
o Cdc25 est exclu du noyau et Plk1 est inactif
qu’est ce qui marque vraiment la transition vers la mitose
Transition vers la mitose : activation de cycline B-CDK1 via plk1
(plk1 recoit signaux dactivation et donc phospho cdc25 et celle ci transloc au noyau, puis inhibe wee1 pr permettre lactivation de CDK/Cyline-B)
Dans l’initiation de la mitose quels sont les renforcements positifs ? constitutifs faibles ? Inductible fort ?
- Système constitutif faible
o Cycline A-CDK1
o Cdc25B
o Plk1 - Système inductible fort : axe Cycline B-CDK1, Plk1, Cdc25A-C
Dans l’initiation de la mitose quels sont les renforcements inhibition forts ? (3)
- Wee1
- Exclusion nucléaire de Cdc25C
- Exclusion nucléaire de Cycline B-CDK1
Comment l’APC arrête-t-il de détruire les cyclines en G1 ?
L’APC détruit sa propre enzyme ubiquitine E2
après avoir dégradé tous les autres substrats.
La mitose est rapide ?
Oui très rapide
est ce que les chromo ont des domaines spécifiques même en interphase ?
oui Domaines chromosomiques = positionnement spécifique chromosome dépendent
ou se trouvent les séquences codantes et non codantes (ALU) dans le noyau
Les séqueces ALU ont tendance à se retrouver en périphérie et permettent d’ancrer les chromosomes et les séquences codantes à l’intérieur
Quel est le but premier de la prophase et le problème associé ? Donne les 7 solutions qu’apporte la prophase
- Condenser les chromosmes : sinon génome est trop grand, chromatine trop flexbile, caténation
(enchevetrement enorulement) durant phase S
o Solution 1 : diviser genome en chromo
o Solution 2 : sous-div chromo avec centromere
o Solution 3 : position metacentrique centromeres
o Solution 4 : compacter l’ADN en chromatine avec les histones H3-H4 et H2A-H2B
o Solution 5 : compaction chromatine avec histone H1= nucléosomes
o Solution 6 : échafaudage chromosomique par les boucles de chromatine avec les condensines
et l’enzyme topoisomérase II (localisation mutuellement exclusive) = chromatine en
nucléosome mitotiques
o Solution 7 : formation de supertours dans l’ADN avec condensine (activité ATPase). La condensine est activé par phosphorylation par CDK
est ce que la prophase est reliée à la répression transcriptionnelle ?
OUi
- La plupart des gènes ne sont pas exprimés en mitose
- La condensation de la chromatine bloque l’accès des facteurs de transcription aux promoteurs
Que se passe il en prométaphase ?
- Destruction de l’enveloppe nucléaire = permettre aux microtubules d’avoir accès aux chromosomes
Comment l’enveloppe nucléaire est elle déchirée?
phospho des lamines (prot de la membrane nuc) par les CDK = - dinteraction entre les lamines
Comment se forme le fuseau de microtubules bipolaires ?
Fait de tubuline par polarisation
quels sont les 3 types de Microtubules formés en pro métaphase et leur rôle ?
3 types de fibres de MTs
Fibres « k » = kinétocores qui se connectent aux centromères
Fibres interpolaires = éloignent les 2 cellules filles
Fibres astraux = créer une résistance stabilise les poles
Donne le nom d’un antimitotique qui bloque la depolymérisation des microtubules ?
Taxol
C’est quoi le centromère et c’est quoi le kinétochore ?
Le centromère est le centre des chromo ou est construit le kinetochore.
kinetochore sert de pont entre chromo et MT du fuseau mito
donne les 4 couches fonctionnelles kinetochores et fct
Couronne et kinétochore externe = attachement aux MTs
Kinétochore interne = attachement à la chromatine
Centromère interne = chromatine spécialisée
Quels sont les seules attachements stables ?
Seuls les attachement bi-orienté « amphitélique » sont stables
Quels sont les deux points importants dans le checkpoint du fuseau mitotique ?
kinétochores inattaches
tension des MTs
C’est quoi l’évenement clé de la métaphase ?
Événement clé est la congression des chromosomes sur la plaque métaphasique
C’est quoi l’évènement clé de l’anaphase ?
Événement clé est la perte de la cohésion entre les chromatides soeurs et leur migration à des pôles
opposés de la cellule
Par quoi est effectuée la cohésion des chromatides soeurs
La cohésion est effectuée par le complexe cohésine, qui agit comme un anneau qui restreint
physiquement le mouvement des chromatides soeurs
Qu’elle est la protréase qui clive la sous-unité de cohésine ? a quel moment ? activé par quoi ? Est ce une étape critique du cycle ?
Séparase clive ss-u de cohesine durant meta-ana.
separase est activee par la destruction de securine par APC-cdc20
Oui étape la plus critique du cycle cellulaire ; irréversible
Role MT ds anaphase A et B
A: depoly des MT attaches aux kinetochores pr raccourcir et rapprocher des poles
B: Elongation MT interpol
Qu’est ce qui caractérise la télophase ?
eliminer CDK-cyc B par dephospho de leurs substrats = inactiv mitose
De quoi est fait l’anneau contractile lors de la cytokinese ? (4)
Anneau contractile fait d’actine, myosine, septine, aniline
Rôle de l’aniline dans cytokinèse ?
Aniline connecte les 3 systèmes de filament (myosine, actine et septine)
C’est qui les moteurs dans la contraction de l’anneau en cytokinèse ?
Myosine - actine
C’est quoi les Hallmarks of cancer ? On peut viser qui pour éviter le cancer ?
continue les signaux prolifératifs, évade les suppresseurs de croissance, métastases,
immortelle, induit angiogenèse, résiste à la mort cellulaire, instabilité du génome et mutations…
inhibiteur EGFR, inhibiteurs des CDK, inibiteurs des télomérases, inhibiteurs PPAR, mimétique BH3
pro-apoptotique…
en gros inhiber les oncogènes ou réactiver les inhibiteur de tumeur
Dans la carcinogenèse quelle est la seule phase ou la cellule est sensible à l’environnement?
G1 est unique : représente le seul moment où la cellule est sensible aux signaux environnementaux
extra-cellulaire avant de se diriger irrémédiablement vers la phase S
Dans la carcinogenèse Quels sont les composants les plus impliqués dans l’oncogenèse et ils régulent quelle partie du cycle ?
Composants du cycle cellulaire les plus impliqués dans l’oncogénèse (p53/pRB) sont impliqués dans la
régulation G1/S ce sont les complexes cycline-CDK de type D/E et les CDKi
4 manières de déclencher un cancer par aberration du cycle cellulaire
- Mutation/abération des voies de signalisation stimulant la prolifération (gains accélérateur)
- Inactivation de p53
- Phosphorylation excessive de Rb
- Inactivation des CDKi (perte des freins)
Que fait p53 ? il active qui ? bloque qui ? explique aussi son retour dans le cycle cellulaire
Suprresseur de tumeur p53 et cycle cellulaire : l’activation de p53 (facteur de transcription) cause l’activation
de p21 (CDKi) qui bloque G1.
Retour dans le cycle cellulaire par un système de rétro-action négative basée sur
l’ubiquinitation (par famille MDM2/X) qui dégrade p53 et WIP1 qui déphosphoryle p53.
Donne moi le nom de 10 protéines que si elles sont mutées elles donnent des cancers
ATM
ATR
RB1
TP53
CDKN2A
CDKN1A
CHEK2
CHEK1
MDM2
PPM1D(WIP1)
