Cours 1 - Cytosquelettes et protéines motrices Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que l’organisation sub-cellulaire?

A
  • un compartiment interne chez les procaryotes

- plusieurs compartiments chez les eucaryotes : limité par 1 membrane ou par 2 membranes

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Q

Comment visualiser in vivo les mouvements de cargos au sein du cytoplasme?

A

Marquage de la mannosidase-GFP (protéine membranaire) + sarl-RFP
Observation au microscope confocal

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Q

Citer une autre méthode pour visualiser in vivo le mouvement de cargos au sein du cytoplasme

A

micoscopie sur fond clair

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4
Q

Quel est l’avantage d’observer le mouvement de cargo in vivo en microscopie sur fond clair par rapport à la microscopie confocal?

A

nécessite aucune préparation

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5
Q

Citer les différents cytosquelettes

A
  • MT
  • FA
  • FI
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6
Q

Quel élément est essentiel au déplacement de cargos sur les rails du cytosquelette?

A

les protéines motrices

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7
Q

Comment faire pour montrer quel cytosquelette est impliqué dans un mouvement?

A
  • on peut inhiber l’interaction avec le cargo

- on peut inhiber l’un des cytosquelette avec un drogue

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8
Q

Citer les différents inhibiteurs des cytosquelettes

A
  • MT : colchicine, oryzalline, tubulazole (déstabilisateurs)/ taxol (stabilisateur)
  • FA : cytochalazine, latrunculine (destabilisateurs) / phalloidine (stabilisateur)
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9
Q

Quelles sont les protéines motrices des MT?

A

MAPS :

  • kinésine
  • dynéine
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10
Q

Donner le sens du mouvement des 2 MAPS :

A
  • mouvement kinésine-dépendant : vers le + du MT

- mouvement dynéine-dépendant : vers le - du MT

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11
Q

Quelless sont les caractéristiques des kinésines?

A
  • vont vers le +
  • ATP dép
  • pas progressif de 8 nm
  • mouvement en forme de bras de levier
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12
Q

Combien de familles de kinésines existe-t-il?

A

14 familles

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13
Q

Citer la kinésine particulière. En quoi est-elle particulière?

A

kinésine 14 : mouvement vers le - du MT

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14
Q

Quel domaine influe sur l’activité de la kinésine?

A

le domaine moteur

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15
Q

Où se trouve le domaine moteur dans les kinésines?

A
  • soit en N-ter
  • soit au milieu
  • soit en C-ter
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16
Q

Quelle est l’activité de la kinésine en fonction du positionnement du domaine moteur?

A
  • N-ter : mouvement vers le + du MT
  • au milieu : déstabilisatrice des MT
  • C-ter : mouvement vers le - (kinésine 14)
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17
Q

Quelle est la particularité des protéines motrices chez les plantes?

A

les dynéines n’existent pas, elles sont enrichies en kinésine 14 pour les mouvements vers le -

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18
Q

Citer des marqueurs utilisés en immunomarquage?

A
  • alexa 488
  • cyanine
  • rhodamine
  • phaloidine (FA)
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19
Q

Qu’est-ce que le complexe dynactine?

A

complexe intermédiaire qui permet l’attachement du cargo à la dynéine

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20
Q

Quelle est la particularité des familles des dynéines?

A

elles sont spécifiques : cytoplasmiques, flagellaires, axonemal

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21
Q

Durant quel cycle cellulaire les dynéines jouent un rôle primordiales?

A

interphase et mitose

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22
Q

Quelle partie de la dynéine interagit avec le cargo?

A

Tout dépend du cargo à transporter. La liaison se fait soit sur les chaines lourdes, soit les chaines intermédiaires, soit les chaines légères

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23
Q

Quelle est la protéine motrice du cytosquelette d’actine?

A

Myosine

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24
Q

Quel est le mouvement de la myosine?

A
  • ATP dép

- en bras de levier

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25
Q

Combien de familles de myosines existe-t-il?

A

17 familles

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26
Q

Quelle est la particularité des familles de myosines?

A

Le domaine moteur est commun, mais la partie caudale (queue) est divergeante

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27
Q

Dans quel type de tissus cellulaires agit la myosine 2?

A

contraction des muscles

28
Q

Donner le sens du mouvement myosine-dépendant

A

vers le + du filament d’actine

29
Q

Citer les 2 myosines particulières

A

Myosine 6 et 9 qui se déplacent vers le -

30
Q

Quelle est la particularité de la myosine 6?

A
  • se déplace vers le - du filament d’actine

- utilise un système mixte: soit les MT soit les filaments d’actine

31
Q

Quel est le point commun entre les 3 protéines motrices : kinésine/dynéine/myosine?

A

tous ces mouvements sont ATP dépendants

32
Q

Caractériser le mouvement polarisé dans les plantes

A

Mouvement vers le + du cytosquelette

33
Q

Quel est le but du mouvement polarisé vers le + du tube pollinique?

A

Croissance pour pouvoir générer une membrane au niveau apical

34
Q

Définir le tube pollinique

A

Le tube pollinique permet d’acheminer les gamètes vers l’ovule. La cellule génératrice (GC) permet de produire les gamètes

35
Q

Quel test in vitro effectuer pour caractériser les mouvements des cytosquelettes?

A

immunomarquage AC anti-myosine et AC anti-kinésine

36
Q

Qu’a montré l’immunomarquage in vitro contre la myosine et la kinésine?

A
  • le mouvement de l’actine est plus rapide

- le mouvement de MT est plus lent

37
Q

Donner la proportion des mouvements des vésicules de Golgi et des mitochondries

A

80 % sont actine-dépendants

20 % sont Mt-dépendants

38
Q

Qu’a montré l’analyse fine des mouvements des mitochondries en présence d’inhibiteurs du cytosquelette?

A
  • en dépolymérisant les MT, les mouvements s’accélèrent

- en dépolymérisant les FA, les mouvements sont bloqués

39
Q

Quel type de mouvement les inhibiteurs touchent le plus?

A

les mouvements les plus rapides (actine)

40
Q

Citer une méthode permettant de visualiser le mouvement de vésicules dans le tube pollinique

A

décoration en point de flèche

41
Q

En quoi consiste la décoration en point de flèche?

A
  • perméabilisation des cellules et fixation
  • côté pointu vers le - (lent)
  • côté barbé vers le + (dynamique)
42
Q

Quelle est la polarité des mouvements de vésicules dans le tube pollinique?

A
  • dans le cortex (périphérie du tube) : + vers la pointe du tube
  • dans le tube : + vers le côté barbé
    => orientation opposée
43
Q

Caractériser la croissance des vésicules dans la tube pollinique

A
  • croissance polarisée vers le +

- actine-dépendant

44
Q

Expliquer le rôle du cytosquelette lors de la neurulation

A
  • les MT permettent de changer la morphologies des cellules (rectangulaires)
  • l’actine va permettre de donner une forme en ‘bouteille’ = incurvation de la plaque neurale pour former le tube neural
45
Q

Quel cytosquelette est indispensable pour la neurulation?

A

Les 2 cytosquelettes : MT et FA

46
Q

Quelle est l’orientation du cytosquelette dans le neurone?

A
  • axone : les cytosquelettes sont parallèles

- dendrites : les cytosquelettes sont en sens opposés

47
Q

Définir les mouvements antérogrades et rétrogrades

A
  • antérograde : kinésine, du corps axonal vers la synapse (du - vers le +)
  • rétrograde : dynéine, de la cellule vers le corps axonal (du + vers le -)
48
Q

Quelle méthode peut-on utiliser pour visualiser des mouvements du cytosquelette?

A

photoconversion

49
Q

En quoi consiste la photoconversion?

A

marquage mEos2 : fluorochrome va révéler le cytosquelette. Il y a un flash laser et va transformer la couleur du fluorochrome

50
Q

Peut-on réparer les cassures du cytosquelette?

A

Oui.

  • MT et FA : uniquement sur les extrémités
  • FI : sur tout le filament
  • neurofilaments: ressouder par les MT
51
Q

Qu’est que des mélanosomes?

A

cellules épidermiques

52
Q

Nommer les drogues qui agissent sur les mélanosomes et leur effets

A
  • MCH : agrégation

- MSH : dispersion

53
Q

Quel rôle joue l’AMPc dans les mélanosomes?

A

L’AMPc permet la dispersion

54
Q

Citer les rôles des 2 cytosquelettes dans les mélanosomes

A
  • MT permettent une agrégation et une dispersion précoce

- FA permettent une dispersion tardive

55
Q

Expliquer la compétition dynéine/kinésine dans les mouvements des mélanosomes

A
  • dynéines : mouvement le - => agrégation

- kinésines : mouvement vers le + => dispersion précoce

56
Q

Expliquer le phénomène de dispersion tardive

A
  • L’AMPc phosphoryle la mélanophiline et va bloquer l’action des MT (pas d’agrégation)
  • la mélanophiline phosphorylée se lie à la myosine V = dispersion
57
Q

Quel cytosquelette est privilégié pour les mouvements des vésicules Golgiennes?

A

Filament d’actine car fin

58
Q

Le cytosquelette microtubulaire peut-il intervenir dans le mouvement des vésicules golgiennes?

A

Oui : la kinésine 13A

59
Q

Défini la cyclose

A

mouvement circulaire périphérique des chloroplastes dans le cytoplasme

60
Q

Quelles sont les caractéristiques des mouvements de cyclose?

A
  • ATP dépendant
  • actine-dépendant
  • liaison avec la myosine XI
61
Q

Quel cytosquelette est privilégié pour le mouvement des chromosomes?

A

les MT

62
Q

Comment s’appelle le mécanisme de réorientation des chromosomes?

A

recherche et capture

63
Q

Définir le mécanisme de recherche et capture

A
  • capture du kinétochore
  • stabilisation
  • réorientation des chromosomes : dynéine-dépendant
  • mouvement des chromosomes : kinésine-dépendant
64
Q

Quelle est la dynamique des MT en métaphase?

A
  • fluorochrome vert pour les chromosomes
  • fluorochrome rouge pour les MT
    => pas de mouvement des chromosomes (plaque équatoriale)
    => lignes obliques : déplacement des SU au sein du MT
    => les SU des MT migrent vers les pôles
    => incorporation de dimères de tubulines au kinétochores
65
Q

Quelles est la dynamique des MT en anaphase?

A

Les chromosomes restent sur la plaque équatoriales, mais le signal perd en intensité
=> dépolymérisation importante des kinétochores