Connaître les différentes étapes chronologiques de l’inoculation d’une gélose nutritive par striations (écouvillon ou manche de Koch) ou par étalement (dilutions et tige de verre). Flashcards
Étape importante striation avec manche de Koch
- chauffer au rouge le fil de latin du manche de Koch et laisser refroidir
- ouvrir le bouchon de l’éorouvette
- à deux reprise, passer à la flamme l’embouchure de l’éprouvette
- pres de la flamme, tremper le manche de koch
5.passer a nouveau 2 fois l’embouchure à la flamme - remettre le bouchon
- Encemencer proche de la flamme
- chauffer immédiatement le fil au rouge afin d’éviter la contamination
étape importante avec écouvillon
- retirer de l’enveloppe l’écouvillon stérile, donc pas passer au feu
même étape - déposer l’écouvillon souillé dans le bûcher de décontamination
nom des élément de la pipette
piston, éjecteur, molette de l’ajustement du volume, bras éjecteur, embout
dilution et étalement
- ajuster micropipette à 0,1 ml ou 10 ul
- plonger le micropipette dans un embout, PROCHE DE LA FLAMME
- avant et après de pipette, passer l’éprouvette à la flamme
- prêt du bruleur, transférer l’échantillon sur la glose nutritive
- prendre une tige de verre recourbée trempée dans l’alcool, chauffer la tige et attendre quelque seconde avant d’étaler
- déposer embout de la pipette dan récipient de décontamination
comment faire dilution ?
prendre 100 ul d’eau naturel et le mettre dans 9,9 ml d’eau stérile et agtiez délicatement (10^-2) pour le 10^-4, refaire la même chose mais prendre 0,1 ml de la solution fille 10^-2, et transférer dans une éprouvette de 9,9 ml d’eau stérile
que faut til faire avant de quitter le laboratoire
désinfecter à nouveau notre surface de travail à l’aide de la solution d’hypochlorite de sodium et désinfecter à nouveau vos mains à l’aide de la solution de Proviodine
que contient une glose nutritive ?
c’est un milieu de culture solide composé de substance nutritive et d’agar.
étape de filtration
- papier filtre plié en quatre, le mettre dans un entonnoir et filtrer l’eau naturelle
- pipetez un échantillon de 100microlitre de filtrat
3.retirer le papier filtre à l’aide d’une pince - avant de manipuler l’entonnoir, il faut le vaporiser de la solution d’hypochlorite de sodium à l’intérieur de l’entonnoir
étape filtrée et chlorée
- transférer le continu de l’éprouvette d’eau de javel dans l’éprouvette contenant le filtrat.
- agiter et laisser reposer pendant 10 min.
- avec la tige de verre, étaler sur une gélose.
pour culture bactérienne filtrée
refaire toutes les étapes de la filtration avec l’échantillon de la culture bactérienne
culture bactérienne filtre et chlorée
refaire les même étape que eau naturelle filtrée et chlorée
incubation
scellez l’ensemble des vases de pétri avec du ruban adhésif et identifier notre paquet de vase de pétri.
-placer à l’étuve pendant 24h heures à 37C nos vases de pétri en position inversée