Coloration De Gram Flashcards
Étapes de la coloration de gram
- Crystal Violet
- Iode
- Alcool
- safranine
Gram + après la coloration de gram
Violet/Bleu} paroi cellulaire retient le complexe du cristal violet(colorant) et de l’iode.
Gram- après la coloration de Gram
Rouge/Rose}leur paroi cellulaire ne retient pas le complexe cristal violet/iode après le lavage à l’alcool/acétone. Elles deviennent donc incolores et lorsqu’on applique un deuxième colorant rouge (safranine), elles prennent cette couleur
Gram+ < ou > couches de peptidoglycane
Couches épaisse en peptidoglycane
Gram- < ou > couches de peptidoglycane
Minces couches en peptidoglycane
Pourquoi la coloration de Gram résulte en une coloration violette pour les Gram+ et rose pour les Gram-
Comme Les Gram + on une plus épaisse couche de peptidoglycane elle peuvent se protéger de l’alcool et ne pas perdre la couleur comme gram- qui perd sa couleur car elle a une mince couche de peptidoglycane alors quand elle passe dans l’alcool elle perd sa couleur et prend celle de la safranine qui est rose/rouge.
Que se passe si une étape de la coloration de Gram est mal exécuté plusieurs exemple possible… Ex1 oubliez de fixer la lame à la chaleur.Qu’est ce que vous pensez voir?
Ex2 Fixer la lame trop longtemps à la chaleur. Qu’est-ce que vous pensez voir?
Ex3La lame trop décolorer ( exposition a l’alcool trop longue).Qu’est-ce que vous pensez voir?
Ex4 La lame pas assez décoloré (exposition à l’alcool trop courte). Qu’est-ce que vous pensez voir?
Ex5 Frottis trop épais. Qu’est-ce que vous pensez voir?
Ex6 Ne pas mettre la safranine assez longtemps . Qu’est-ce que vous pensez voir?
Ex1 => Les bactéries ne seront pas fixées à la lame. Elles décolleront de la lame et seront lavées avec les colorants.La lame sera donc vide.
Ex2 => En fixant la lame trop longtemps on va venir brûler les bactéries et leur forme va changer,Elle seront donc non-identifiables.
Ex3=> L’alcool laissé trop longtemps va briser les parois cellulaires des bactéries et le Crystal violet sera donc lavé avec l’alcool et l’eau. Ainsi, même les bactéries Gram+ vont apparaître rose à cause de la safranine.
Ex4=>Le Crystal violet ne sera pas rincé des bactéries gram-.Ainsi même les bactéries gram- vont apparaître violettes.
Ex5=>Il aura trop de bactéries et elles seront une par dessus l’autre , ce qui nous empêchera de pouvoir bien les observer.On ne verra pas leur forme et leur arrangement.
Ex6=> Les bactéries gram- vont rester non colorée et transparente et ne seront pas visibles.
Pourquoi on utilise la coloration de Gram ?
Pour identifier si une bactérie est gram- ou gram+