CLASSE 02

Question 1

Quais bactérias se coram de roxas ?

Answer 1

Gran positivas

Question 2

Quais bactérias se coram de vermelhas?

Answer 2

Gran negativas

Question 3

Por que a Gran negativa fica meio vermelha/rosa ?

Answer 3

Por que possuem uma fina camada de peptidoglicano e uma membrana externa composta por bicamada lipídica, a qual se solubiliza na presença do álcool-acetona (agente diferenciador), perdendo a coloração do cristal violeta (corante primário), adquirindo a coloração rosa ou vermelho do corante secundário, safranina ou fucsina

Question 4

Por que a Gran Positiva fica meio Roxo mais escuro?

Answer 4

Já as bactérias Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptidoglicano e grandes quantidades de ácido teicóico, adquirem a coloração violeta ou roxa pela capacidade em reter o corante primário na presença do
agente diferenciador

Question 5

Como funciona a técnica de GRAM ?

Answer 5

Cobrir com cristal violeta por 1 minuto.
Lavar com água corrente.
Cobrir com lugol 1% por 1 minuto.
Lavar com água corrente.
Aplicar o agente diferenciador álcool-acetona 95% por 10 a 20 segundos. Lavar com água corrente.
Cobrir com fucsina ou safranina
(0,1 a 0,2%) por 30 segundos. Lavar com água corrente e secar com papel-filtro.
Observar

No microscópio óptico com objetivas de 40x. Colocar uma gota de óleo de imersão sobre a lâmina e ajustar para objetiva de 100x (limpar o óleo de imersão delicadamente com papel absorvente se for voltar a utilizar outras objetivas ou trocar a lâmina).

Question 6

Qual o objetivo da tecnica de gram?

Answer 6

Visualizar as diferentes morfologias entre as bactérias Gram-positivas e Gramnegativas.

Compreender e aprender sobre a técnica de Gram;

Question 7

Quais os materiais utilizado na técnica de gram ?

Answer 7

 Cultura de bactérias Gram-positivas e/ou cultura de bactérias Gram-negativas;
 Solução salina;
 Alça de repicagem;
 Lâminas para microscopia;
 Bico de Bunsen;
 Cristal-violeta (corante);
 Lugol (mordente);
 Álcool-acetona (descorante);
 Fucsina ou safranina (corante);
 Papel absorvente;
 Óleo de imersão;
 Microscópio óptico.

Question 8

Como faz a Confecção do esfregaço

Answer 8

colocando uma gota de salina sobre a lâmina; com a alça bacteriológica tocar a colônia isolada e espalhar na salina com movimentos ovais. Fixar com calor, passando a lâmina sobre chama de bico de Bunsen de 2 a 3 vezes até completa
secagem do esfregaço.