Citometria de Fluxo

Question 1

Citometria de Fluxo - Princípio 1/*

Answer 1

Análise de Partículas em Suspensão

*Partículas = Evento

Question 2

Partículas - Pode ser: 5/*

Answer 2

Célula

Proteína

Lipídios

Biomoléculas no geral

Material Não-Celular

*De 0,2 à 80 um

Question 3

Citometria de Fluxo - Importância 3

Answer 3

Serve para identificar células e distingui-las / separa-las

Padrão Ouro p/ Doenças Hematológicas

Separação de Células (FACS)

Question 4

Citometria de Fluxo - Importância → Parâmetros 3

Answer 4

Tamanho

Complexidade

Procurar Coisas (CD8/CD8)

Question 5

Citometria de Fluxo - Diagnóstico de: 5

Answer 5

Linfomas

Leucemia Mieloide / Linfoides

Mielomas

Pesquisa

Biotecnologia (Cultura Celular)

Question 6

Citometria de Fluxo - Problema

Answer 6

Equipamento Caro → mas custo-relativo por análise não é

Question 7

Citometria de Fluxo - Tipo de Teste 2

Answer 7

Qualitativo → ver

Quantitativo → contar

Question 8

Citometria de Fluxo - Para encontrar algo de interesse: 1/2

Answer 8

Deve ser marcado → com:

→ Ac Específico Marcado com Fluorocromos

→ Corantes Fluorescentes

Question 9

Corantes Fluorescentes - Exemplo

Answer 9

Podem corar RNA e identificar Reticulócito

Question 10

Fluorescência - Adendos na Citometria de Fluxo 2

Answer 10

Sensibilidade ñ é mto boa

Porém → na Citometria de Fluxo a sensibilidade aumenta (=ELISA) por causa do equipamento

Question 11

Citometria de Fluxo - Por que é utilizado fluorescência? 1/2

Answer 11

Porque fluorocromos diferentes podem ter cores diferentes:

→ marca estrutura diferentes

→ equipamento vê e conta (pode identificar se tiver biblioteca interna)

Question 12

Citometria de Fluxo - Separação de Células (FACS) 1/*

Answer 12

Células Viáveis de Não-Viáveis

*FACS metodologia requisito para equipamento conseguir separar

Question 13

Citometria de Fluxo - Princípio do Método 5/*

Answer 13

Partículas em suspensão (líquida) passam → de forma alinhada → por feixe de luz.

Pode haver presença de partículas marcadas com fluorocromos.

Feixe de luz (laser) inside na célula e interage com partículas.

A interação gera sinais e fluorescência, detectados por detectores apropriados.

TODA partícula possui FLUORESCÊNCIA (BRANCO)

*ñ é possível analisar tecido sólido com partículas grudadas

Question 14

Citometria de Fluxo - Partículas em Suspensão 3

Answer 14

Sangue

Aspirado de MO

Cultura Celular

Question 15

Citometria de Fluxo - TODA partícula possui FLUORESCÊNCIA (BRANCO) 2

Answer 15

Toda partícula pode fluorescer quando você incide luz → algumas células tem fluorescência própria

Branco → equipamento detecta no branco se há alguma fluorescência base