Chapitre culture in vitro

Question 1

Nommez les avantages de la culture in vitro (5)

Answer 1

A) multiplication rapide 
B) vigueur comparé au bouturage 
C) Sans maladie/virus
D) production à l'année 
E) permet de CLONER des plantes qui répondent mal au bouturage ou qui se multiplie par division ex: hosta, kalmia, orchidées

Question 2

Nommez les inconvénients de la culture in vitro (3)

Answer 2

A) + $$$
B) besoin équipement + personnel qualifié
C) vulnérable aux contaminations

Question 3

Quelles sont les 4 étapes de la micropropagation in vitro ? (dites quelles étapes peuvent se faire ex vitro)

Answer 3

1. Établissement (sélection de la source, désinfection, initiation de bourgeons/plantules) (in vitro)
2. Multiplication des plantules (production de tiges) (in vitro)
3. Formation de racines (in vitro ou ex vitro)
4. Acclimatation (ex vitro)

Question 4

Lors de l’étape 1 (établissement de la micropropagation), il faut choisir le cultivar à cloner. Quels conseils donneriez vous afin que le producteur choisisse l’explant approprié ? (4)

Answer 4

1. Choisir l’endroit où est pris l’explant. Influence le port de la plante et le type d’organe produit par le tissus. Base = tige et plus on monte = fleur
2. Partir d’un explant juvénile (donne meilleur résultat que adulte)
3. La présence de bourgeon/ méristème accélère la reprise comparé à un disque foliaire ou un entrenoeud
4. Considérer le MOMENT DE L’ANNÉE.

Question 5

Comment l’explant est-il désinfecté ?

Answer 5

Passage à l’éthanol + trempage dans eau de javel dilué avec surfactant

Question 6

Dans l’étape 2 de la micropropagation = multiplication des plantules, avec quelle hormone est utilisée pour augmenter le nb de tiges produites ? (indispensable à cette étape)

Answer 6

Cytokinines

Question 7

Vrai ou faux, il faut généralement changer le milieu à toutes les 2 à 8 semaines pour éviter des carences et des problèmes de croissance lors de la multiplication des plantules ?

Answer 7

Vrai

Question 8

À l’étape 3 de la micropropagation = formation des racines, comment sont modifié les hormones en culture in vitro. Sont-elles nécéssaires à cet étape ?

Answer 8

Diminution cytokinine et augmentation auxine

Comparé à la multiplication des plantules (étape 2), l’ajout d’hormone peut être non nécéssaire à cette étape (même principe que bouturage)

Question 9

Pourquoi faire la croissance des racines ex vitro ? Quelles sont les différences notées chez les racines ?

Answer 9

In vitro = système vasculaire moins bien développé, cortex large et moins organisé

Ex vitro= permet croissance initiale plus rapide, cortex avec meilleur transport, à utiliser pour des espèce qui s’enracine facilement

Question 10

____ donne souvent des racines plus courtes et plus épaisses que l’IBA

Answer 10

NAA (acide naphtalène acétique)

Question 11

Quels sont les 2 impacts notés de la croissance in vitro dans un milieu humide sur les plantes ?

Answer 11

Surface feuille avec peu de cire

Stomate ne peuvent se fermer initialement

Question 12

Quelles sont les 3 causes possibles de la variabilité phénotypique à la suite d’une culture in vitro ?

Answer 12

1. Mutation génétique (responsable d’une faible fraction de la variabilité)
2. Épigénétique (responsable majorité des cas)
   (présence élevée de cytokinine = affecte méthylation ADN= affecte expression gènes)
3. Chimère (plusieurs génotype sur même plante)

Question 13

Les plantules peuvent être formés à partir de 2 types de bourgeons, quels sont ils ?

Answer 13

a) bourgeons formés sur la tige ex: bourgeons axillaires à la base des feuilles
b) bourgeons adventifs ex: sur feuille, entre noeud, racine, nouvelle cellule méristématique

Question 14

Qui suis-je ? Technique qui consiste à faire pousser la plante à 40C pendant plusieurs semaines ce qui permet d’empêcher la propagation du virus

Answer 14

Thermothérapie

Question 15

En culture de tige, des ____d’orchidées sont produits in vitro avec du charbon.

Answer 15

protocormes

Question 16

En production de bourgeons adventif, quelle hormone est utilisé pour favoriser la production de bourgeons ?

Answer 16

Cytokinine

Question 17

Vrai ou faux, les bourgeons adventifs donne généralement davantage de plantules permettant une production massive de clone, cependant il y a + de chance d’avoir de la variabilité somaclonale?

Answer 17

Vrai

cellule unique à l’origine du cal peut avoir mutation
cytokinine impact méthylation

Question 18

La culture in vitro est utilisée pour la germination des graines______
Pourquoi ?

Answer 18

d’orchidées

car les graines ont peu de réserves, le substrat permet de subvenir besoins plantule, normallement association avec champignon

Question 19

Quelles sont les conditions idéales (température, lumière) pour la micropropagation ?

Answer 19

T = 20 à 27 degrés C

Lumière = modérée 40-80μmol/m2/sec

Question 20

De quoi est composé le milieu de culture (5) in vitro ?

Answer 20

1. Sucre (2-3 %)
2. Nutriment
3. Agar (fait par algue rouge, mélange d’agarose et d’agaropectine)
4. Hormones
5. Vitamines (cytokinine = la + utilisée, auxine IBA + NAA)

Question 21

Quel serait le pH standard pour une culture in vitro et avec quoi est-il ajusté ?

Answer 21

5,6 à 6

ajusté avec KOH (hydroxyde de potassium)

Question 22

Quelles sont les difficultés rencontrées en culture in vitro ? Avons nous des solutions ?

Answer 22

1. HYPERHYDRICITÉ : transparence des tissus, apparence mouillée, trop d’eau et pas assez de lignine/ cellulose accumulée. Quoi faire ? augmenter agar, changer minéraux
2. CONTAMINATION (+ IMPORTANT)
3. COMPOSÉS PHÉNOLIQUES: surtout chez espèces ligneuses, ils s’oxyde et nuisent à croissance plantules. Quoi faire ? ajout antioxydant ou ajout charbon activé
4. NÉCROSE APICALE : par manque Ca, ajouter Ca

Question 23

Pendant combien de temps faut-il stériliser les instruments à l’autoclave

Answer 23

minimum 20 min

Question 24

Vrai ou Faux ? Trop de cytokinine provoque une élongation accrue des tiges

Answer 24

Faux

fera beaucoup de bourgeons avec peu de tige