Chapitre 2 - Observations Microscopiques

Question 1

Quelles sont les sortes de microscopie?

Answer 1

Photonique et électronique

Question 2

Quelles sont les sortes de microscopie photonique?

Answer 2

• à fond clair
• à fond noir
• à contraste de phase
• à interférence différentielle
• à fluorescence

Question 3

Quelles sont les sortes de microscopie électronique?

Answer 3

• à transmission

- à balayage

Question 4

Pourquoi la microscopie à fond clair nécessite souvent une coloration (et donc une fixation —> organisme mort)

Answer 4

Pour augmenter le contraste

Question 5

Pourquoi ne faut-il pas nécessairement faire une coloration lors d’une microscopie à fond noir (ø fixation = microorganismes vivant)

Answer 5

Parce que le microorganisme est clair sur un fond sombre (bon contraste)

Question 6

Sans qu’on est besoin de faire FIXATION NI COLORATION, que peut-on observer grâce au microscope à contraste de phase?

Answer 6

Les structures fines, car on joue seulement sur l’intensité lumineuse

Question 7

Qui a-t-il de spécial sur une image de microscopie à contraste de phase?

Answer 7

Un HALO DE PHASE autour des structures

Question 8

Comment fonctionne un microscope à contraste de phase?

Answer 8

La lumière en phase qui traverse une structure cellulaire va ressortir déphasée (intensité lumière moins grande)

Question 9

Comment fonctionne un microscope à contraste d’interférence différentielle?

Answer 9

Produit une image en détectant les différences d’indice de réfraction et d’épaisseur

Question 10

Comment a l’air une image de microscopie à contraste d’interférence différentielle?

Et quelle sont les limitations?

Answer 10

• Permet de voir les structures fines
• donne un pseudo relief 3D

Limite: la préparation doit être transparente

Question 11

Comment fonctionne un microscope à fluorescence?

Answer 11

Coloration fluorescente avec des fluorochrome

Échantillon absorbe
UV —> émet lumière visible

Question 12

Comment fonctionne l’immunofluorescence?

Answer 12

Couplage chimique entre anticorps et fluorochromes.

Capable de voir où les anticorps s’attachent sur une bactérie

Question 13

Quelle sorte de microscope peut permettre d’observer des virus?

Answer 13

Microscopes électroniques

Question 14

Quelle est le grossissement max d’un microscope photonique?

Answer 14

2000x

Question 15

Quelle est le grossissement d’un microscope électronique?

Answer 15

400 000X

Question 16

Quelle est la limite de résolution d’un microscope photonique?

Answer 16

100 nm

Question 17

Quelle est la limite de résolution d’un microscope électronique?

Answer 17

0.1 nm

Question 18

Qu’est-ce qui explique la différence de limite de résolution entre le microscope photonique et le microscope électronique?

Answer 18

La longueur d’onde des électrons est plus petite que celle des photons

Question 19

Pourquoi le microscope électronique peut avoir un plus gros grossissement que le photonique?

Answer 19

À cause du limite de résolution plus faible que le photonique

Question 20

Pourquoi faut-il faire une «coloration» / préparation de métal à des échantillons avant des les observer au microscope électronique?

Answer 20

Parce que la matière organique n’absorbe pas les électrons, alors on verrait rien

Métal va absorber les électrons

Question 21

Quelle est le principe d’une image négative?

Et donne un exemple d’utilisation

Answer 21

C’est une image dont les couleurs d’origine sont inversées.
Ex: dans une microscopie électronique à transmission préparée avec la technique d’ombrage, une image positive aurait les structures en foncé et les ombres en clair

En mettant l’image négative, les ombres sont foncées et les structures claires

Question 22

Quelles sont les techniques de «coloration» pour la microscopie électronique?

Et décrit les

Answer 22

1-technique d’ombrage:

On émet un jet de métal à 45° sur l’échantillon. Ça permet de voir les reliefs. On met aussi une petite bille de taille connue pour faire une échelle de comparaison avec les structures cellulaires.

2- technique de coloration négative

On met de l’acide phosphothungstique (qui absorbe les électrons). L’acide s’accumule dans les creux. Alors, creux foncé et protubérance claires.
Donne une impression de reliefs 3D

3-cryodécapage

Gèle l’échantillon, coupe transversale.
Couplé avec technique d’ombrage, permet de voir bien les structures internes de la cellule

4-immuno-localisation cellulaire

Couple anticorps spécifique à une protéine ou structure et bille de métal pour localiser où sont les structures/protéines

Question 23

Quelles sont les sortes de microscopie électronique?

Answer 23

• à transmission

- à balayage

Question 24

Comment fonctionne un microscope électronique à transmission?

Answer 24

Les électrons traversent l’échantillon et sont recueillis par un détecteur sous l’échantillon.

L’image est traitée par un ordinateur

Question 25

Pour le microscope électronique à transmission, quelle genre d’image obtient-on?

Answer 25

Une image par transparence

Question 26

Comment fonctionne un microscope à balayage?

Answer 26

Il y a BALAYAGE de l’échantillon avec un faisceau d’électrons. Les capteurs sont latéraux, et non sous l’échantillon.

Question 27

Pour le microscope électronique à balayage, quelle sorte d’image obtient-on?

Answer 27

Un effet de 3D