Chapitre 1 : la cellule

Question 1

caractéristique des archébactéries ?

Answer 1

1) Certaines bactéries méthanogènes ou thermophiles
2) bien que de la famille des procaryotes, possèdent certaines caractéristiques biochimiques propres aux eucaryotes comme :
- réplication
- transcription et traduction
- histones
- introns

Question 2

Les virus est ce que vivant ?

Answer 2

position unique entre vivant et non vivant

Question 3

comment s’appelle un virus de bactérie ?

Answer 3

phages

Question 4

matériel génétique du virus

Answer 4

ADN OU ARN

Question 5

Les cellules eucaryotes animales possèdent une organisation….

Answer 5

microscopique générale commune

Question 6

Différence cellules eucaryotes et procaryotes ?

Answer 6

• cellule eucaryote 1000 fois plus large en volume que cellule procaryote
• cellule eucaryote possède un cytosquelette, un noyau avec membrane nucléaire double + organites
• cellule eucaryote ne possèden pas de paroi cellulaire contrairement à procaryotes.

Question 7

Comment sont apparu les eucaryotes ?

Answer 7

cellule procaryote primordial prédatrice qui capturait d’autres cellules comme mitochondries
- elle avait une membrane cellulaire souple et un cytoplasme complexe capable de faire bouger cette membrane pour gobber)

Question 8

Des cellules eucaryotes sans le problème du développement multicellulaire (sert de modèle cellulaire eucaryote) et pourquoi ?

Answer 8

saccharomyces cerevisiae (levure de boulanger)
Pourquoi ? se reproduit par voie végétative (simple division-forme diploide) ou sexués (méiose-forme haploide) et génome très petit !

Question 9

les 4 modèles d’organisme pour les études en biologie + bonus embryologie

Answer 9

1- le ver nématode
2- la mouche Drosophila melanogaster
3- la souris Mus musculus
4- l’Homo sapiens (séquençage du génome)
En embryologie : aussi la grenouille Xenopus laevis et le zebrafish

Question 10

Pourquoi isoler une cellule ?

Answer 10

pour caractériser de façon biochimique les composés de la cellules, tester des drogues, étudier la fonction des gènes par transfection

Question 11

Comment isoler protéines abandontes ?

Answer 11

1- récupérer directement d’un tissu qui contient bcp de protéines recherchées
2-après amplification en culture primaire (sans autres purifications)

Question 12

Comment isoler des cellules ? abondante ou rare

Answer 12

Défaire la matrice extracellulaire et jonctions intercellullaires chimique (enzyme + EDTA) et physique
si cellule rares, il sera nécessaire de faire un enrichissement supplémentaire d’un type cellulaire.

Question 13

Comment enrichir une cellule rare (2)

Answer 13

Isolement de cellules au FACS
Purification à l’aide d’un aimant et de billes magnétiques

Question 14

Comment fonctionne le FACS

Answer 14

échantillons passe à travers un laser. cellule fluorescentes au passage du laser vont devenir chargées négativement puis déviés par un chamos électrique

Question 15

Comment fonctionne la purification avec des billes magnétiques ?

Answer 15

deux type : sélection négative et sélection positive.
Dans la sélection positive : l’anticoprs se lie à la cellule indésirés et les billes magnétiques se lient à l’anticorps) c’est le contraire pour sélection positive - cellule désiré se lie à l’anticorps

Question 16

À quoi sert les cultures cellulaire ?

Answer 16

Utiles pour manipulations génétiques et pour tester différentes substances

Question 17

Culture primaires ? culture secondaire ?

Answer 17

Culture primaire : Culture de cellules isolées directement du tissus. on va les décoller lorsqu’elles arrive à confluence avec de la tripsine puis on va les diluer recultiver à confluence (culture secondaire)
À la culture secondaire : semaines à quelques moi sur même échantillon - conservent beaucoup les propriétés du tissu d’origine

Question 18

Problème avec cultures primaire et secondaire ?

Answer 18

cellules vont dégénéré et mourir

Question 19

Pourquoi cellules cultures primaires et secondaires meurt ?

Answer 19

car racourcissement des télomères et choc de culture (méchanisme de contrôle pète les cable

Question 20

Comment déjouer problème de mort des cellules en cultures primaire et secondaire

Answer 20

immortaliser les cellules

Question 21

Comment immortaliser les cellules (4)

Answer 21

1- en réintroduisant les télomérases
2- en inactivant les contrôles du cycle cellulaire
3- avec des produits chimiques
4- le choc de culture peu-être éviter suite à une mutation durant la culture

Question 22

C’est quoi une cellule transformée?

Answer 22

cellules dérivés de tumeurs, produites en introduisant des oncogènes ou infectées par des virus oncogéniques

Question 23

Propriétés des cellules transformées

Answer 23

immortelles, prolifèrent à haute densité, pas besoin d’être attacher pour pousser, produisent des tumeurs lorsqu’injectées dans des souris.

Question 24

est ce que cellules transfrormées et immortelles sont les mêmes cellules ?

Answer 24

non,mode de création différente

Question 25

définition de la transfection

Answer 25

la transfection = insertion d’un acide nucléique (ADN ou ARN) dans une cellules animales en utilisant des méthodes chimiques, physique ou biologiques (virus).

Question 26

À quoi sert la transfection?

Answer 26

-étudier la fonction et la régulation des gènes
-produire des organismes transgéniques

Question 27

efficacité constantes chez les types cellulaire ?

Answer 27

non, l’efficacité va varier en fonction des types cellulaires et de la méthode de transfection

Question 28

quelles cellules sont plus difficiles à transfecter ?

Answer 28

les cellules primaires sont en générale plus difficiles à transfecter

Question 29

explication méthode de transfection chimique

Answer 29

faire rentrer dans une cellule chargée négativement des molécules chargées négativement (adn et arn) en neutralisant la charge ou charger positivement en le complexant avec du calcium phosphate ou des polycations. ou des lipides pour former liposomes (rentrer par endocytose ou fusion avec la membrane plasmique)

Question 30

explication méthode de transfection physique

Answer 30

microinjection dans les cellules souches embryonnaires (ES) ou électroporation

Question 31

transfection transitoire

Answer 31

1 - l’adn rentre dans la cellule
2 - le plasmide rentre dans le noyau ou le gène étudié sera transcrit puis traduit.
3 - expression élevée durant un temps limitée (expression max après 48-72h post transfection)
4- après max 8 jours, plasmide sera dégradé et diluéé lors des divisions cellulaires

Question 32

quel adn rentre le plus facilement dans la cellule

Answer 32

l’ADN super-enroulé, car très compacte

Question 33

transfection stable

Answer 33

transfection transitoire qui peut se solder par transfection stable soit intégration du plasmide (ex: gène de résistance) au génome de la cellule et transmis aux cellules filles après division cellulaire.

Question 34

comment fonctionne la transfection stable avec gène de sélection et gène de résistance sur le même plasmide ou sur plasmide différent (co-transfection)

Answer 34

le plasmide transfecter contient un gène de sélection qui sélectionnent un groupe de cellules. ensuite parmi ce groupe, le gène de résistance va s’exprimer de façon transitoire ou à long terme selon la cellule. les cellules résistantes à long terme vont intégré le plasmide dans le génome qui sera transmis aux cellules filles
N.B : dans la co-transfection, même chose, mais on va augmenter la quantité de plasmide contenant le codage pour protéine étudié (ex : gène de résistance) pour augmenter la probabilité que les cellules sélectionnées contiennent les 2 plasmides

Question 35

transduction

Answer 35

transfection en utilisant un vecteur viral

Question 36

Méthode biologique de transfection

Answer 36

Plus efficace que les méthodes chimiques/physiques utilisant de virus recombinant comme ADV, AAV, RV et LV

Question 37

Quel virus ne peut être transfecté une vitro ?

Answer 37

le virus AAV, car il ne s’intègre pas au génome de la cellule

Question 38

quels virus ont des transfections stable et très efficace ?

Answer 38

RV et LV