Caracterización biológica Flashcards
Diga las diferencias entre in-vitro e in-vivo
in-vitro (dentro de vidrio): ensayos realizados en un ambiente controlado fuera de un organismo vivo
in-vivo (dentro de vivo): ensayos que ocurren dentro o en un organismo vivo (animalitos y ensayos clínicos)
Diga las tres pruebas (al menos de curso) de biocompatibilidad
Citotoxicidad
Hemocompatibilidad
Genotoxicidad
La actividad antibacteriana (ensayos de contacto directo, contacto indirecto y de extractos) están dados por la norma ISO…
ISO-10993-12
Diga los dos tipos de ensayos citotóxicos
LDH (Lactato deshidrogenasa)
MTT (tetrazol con nombre muy largo)
Explique que pasa en la prueba de MTT (en dónde se lleva a cabo, qué ocurre, qué indican los resultados, colorimetría y interpretación)
Se basa en la reducción de MTT a MTT-formazan gracias a la actividad catalítica de la enzima succinato deshidrogenasa mitocondrial. Por lo tanto, depende de la integridad de la maquinaria de respiración mitocondrial (metabolismo celular). Ocurre en la mitocondria
El MTT es amarillento y cuando se metaboliza es MTT-formazan de color morado.
Entre más morado mejor porque indica que las células están vivas, con su metabolismo celular intacto.
Explique que pasa en la prueba LDH (en dónde se lleva a cabo, qué ocurre, qué indican los resultados, colorimetría y interpretación)
La enzima lactato deshidrogenasa se encuentra dentro del citoplasma celular por lo que cuando la célula se rompe, esta se libera. Una vez salen, actúan sobre el lactato que se encuentre en el medio y lo catalizan a piruvato (coloración roja)
Entre más rojo, peor xq hay mayor muerte celular. Una mayor absorbancia es peor.
Ensayos de citotoxicidad están dados por la ISO…
ISO10993-5
Diga los dos tipos de pruebas de hemocompatibilidad
Hemólisis
Agregación plaquetaria
Ensayos de hemocompatibilidad están dados por la ISO…
ISO10993-4
La sangre para la prueba de hemolisis en qué tubo se almacena y porqué
El tubo con tapa morada de EDTA (Acido Etilendiamintetraacético)
Tiene un efecto quelante sobre el calcio (Ca2+). Al fijarlo, impide la activación de la trombina (protrombina), la conversión del fibrinógeno en fibrina y, por tanto, la coagulación sanguínea.
EDTA
La sangre para la prueba de agregación plaquetaria en qué tubo se almacena y porqué
El tubo con tapa azul de citrato de sodio
Tiene el efecto de impedir que el calcio se ionice, evitando así la coagulación.
Citrato de sodio
Diga el principio en el cuál se basa la prueba de hemólisis y cómo se analizan los resultados cuantitativos
Esta prueba evalúa la capacidad de
que significa mutagenesis
Compuesto o material capaz de inducir mutaciones en el ADN
que significa carcinógeno
Compuesto o material capaz de inducir procesos cancerígenos.
Diga las dos pruebas de genotoxicidad
Cometa
Ames
Diga los controles + y - para hemolisis
+ ->Tritón (detergente)
- -> PBS (solvente fisiológico)
Diga los controles + y - para agregación plaquetaria
+ -> epinefrina
- -> PBS (solvente fisiológico)
Diga los agregantes plaquetarios y su nivel de acción
epinefrina y trombina (fuerte)
colágeno (medio)
ADP (suave)
En que consiste la prueba de Ames
Es una prueba bacteriana que evalua la genotoxicidad de un material a corto plazo para la identificación de carcinógenos que utiliza la mutagenicidad en bacterias (salmonella)
Se ubica la Salmonella en un medio que carece de histidina esta no debería crecer, si se da un crecimiento bacteriano es porque el material es mutagenotoxico
En que consiste la prueba de cometa
prueba con electroforesis y se observa la estela que deja el ADN en el gel. Si esta esta presente es xq el ADN se degradó con el contacto del material
Cual es la norma estandar para la actividad antibacteriana
Clinical and laboratory standars intitute (CLSI)
