Biotecnologia Flashcards

1
Q

Qual a diferença de biotecnologia e engenharia genética?

A
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Q

Qual a primeira e principal ferramenta da engenharia genética, como ela funciona e pra que serve?

A
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3
Q

Fale sobre a DNA ligase.

A
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4
Q

Fale sobre os plasmídeos.

A
  • Plasmídeo se replica independente da replicação da bactéria
  • Há vários plasmídeos num célula
  • Um plasmídeo é um vetor, transportador, carreador de genes que tenho interesse, ele leva o que eu quero para dentro da bactéria.
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5
Q

Quais as 4 finalidades da tecnologia do DNA recombinante?

A
  • A finalidade:
    • Criar transgênicos
    • Clonar genes de interesse
    • Síntese de substâncias de origem PROTEICA, a partir do gene de interesse.
      • Hormônios, anticorpos, antígenos, enzimas, mediadores químicos, insulina…
    • Vacina de DNA (pois a bactéria só clona o DNA)
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6
Q

Quais as 6 etapas da tecnologia do DNA Recombinante?

A
  • Etapas:
    • Isola-se o gene no DNA doador, com uma enzima de restrição.
    • Isola-se o plasmídeo bacteriano/fungico
    • Abertura do plasmídeo, COM A MESMA ENZIMA USADA PARA ISOLAR O GENE DE INTERESSE.
    • Une-se o plasmídeo ao gene de interesse com o auxílio da DNA ligase.
    • Devolução do plasmídeo recombinante para a bactéria.
    • Multiplicação da bactéria, sintetizando a substância proteica e simultaneamente clonando os genes.
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7
Q

O que é e para que serve o DNA complementar ou DNAc

A

DNAc (muito usado para a insulina)
* DNA só com éxons
* Produzidos a partir de um RNAm
* Etapas:
* Descobre qual o RNAm depois do splicing (DNA secundário, só com éxons) que realmente produz insulina
* Tira da célula e em laboratório aplica a transcriptase reversa transformando em uma fita de DNA.
* Aplica a DNA polimerase e transforma ela em uma fita dupla de DNA só com éxons para a insulina
* Ai, sim coloca na bactéria.
* Não coloca em fungo por causa do splicing alternativo

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8
Q

Transgênicos
a] Existe transgênico natural?
b] O que são transgênicos?
c]Quais as 4 principais técnicas para gerar um transgênico?

A

Transgênicos
* Todo transgênicos são artificiais
* Organismos geneticamente modificados, pela ação do homem, usando as ferramentas da engenharia genética e a tecnologia do DNA recombinante.
* Seres que incorporam genes de uma outra espécie , passando a expressar uma característica que não possuíam.
* Técnicas:
* Microinjeção (animais)
* Canhão de tungstênio e ouro (biobalística, normalmente para vegetais)
* bolinhas + que atraem o DNA - e da tiro
* Eletroporação
* Aplica uma corrente e os poros do protoplasto (sem parede celular) abrem e o gene do meio entra.
* Agrobactérium tumefaciens
* Cancerígenas, tiram o que causa tumor na planta e coloca o gene de interesse

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9
Q

O que são células tronco?

A
  • Pode se diferenciar em outros tipos de células
  • Não pode se diferenciar em qualquer uma, dependendo da célula
    • Algumas podem
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10
Q

O que são células troncos totipotententes?

A
  • Totipotentes
    * Se diferencia em qualquer tipo de célula e anexos embrionários
    * Retirada da mórula
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11
Q

O que são células troncos pluripotentes?

A
  • Pluripotentes
    * Se diferencia em qualquer tipo de células menos os anexos embrionários
    * Retiradas da blástula (blatocele, massa interna que não se diferenciou)
    * Mais usada que as totipotentes por serem de fácil manuseio e maior quantidade
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12
Q

Quais são os dois tipos de células troncos embrionárias?

A

As totipotentes e pluripotentes

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13
Q

Quais os 3 tipos de células troncos adultas?

A

Multi
Oligo
e unipotentes

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14
Q

O que são as células troncos multipotentes?

A
  • Multipotente
    * Consegue se diferenciar na maioria dos tipos celulares, muito semelhante a uma pluripotente.
    * Retirada do cordão umbilical, polpa do dente, da medula óssea…
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15
Q

O que são as células troncos oligopotentes?

A
  • Oligopotente
    * Se diferencial em células do mesmo tecido ou linhagem de onde foram retiradas.
    * Célula tronco oligopotente mieloide: Hemácia, plaquetas, neutrófilos, basofilos, eosinófilos e monócitos.
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16
Q

O que são as células troncos unipotentes?

A
  • Unipotente
    * Só se diferencia em um único tipo de célula.
    * Eritoblasto: eritrócito
    * Leucoblasto: leucócito
17
Q

O que é o PCR?

A
  • Polimerase Chain Reaction (reação de polimerização em cadeia)
  • Promove a clonagem do DNA, ou seja, amplificação da quantidade de DNA.
18
Q

Quais os componentes para fazer um PCR?

A
  • Componentes
    • Amostra de DNA
    • Nucleotídeos
    • DNA polimerase da Thermus aquaticus (árquea)
      • Taq. polimerase
    • Primers de DNA (sintértico, não são fragmentos de RNA, Inicializadores ou sinalizadores))
    • Termociclador (equipamento)
19
Q

Quais as etapas, explique-as e quais as temperaturas de cada uma no PCR?

A
  • Etapas (1 a 2 min)
    • 1ª etapa (95˚C)
      • Desnaturação do DNA
        • Separa as duas fitas do DNA, rompendo as pontes de hidrogênio
    • 2ª etapa (60˚C)
      • Anelamento do Primer
        • O primer se liga na extremidade 3 (porque ela lê e gera de 5 para 3` da fita molde)
          • O primer delimita o que vai ser copiado
    • 3˚ etapa (72˚C)
      • Plimerização do DNA
        • Apartir do primer, a DNA polimerase, sintetiza a fita complementar.
20
Q

O que é o RT-PCR? Fale sobre.

A

RT-PCR
* Exame que detecta a presença de qualquer vírus de RNA
* Etapas:
* SOAB, com a secreção
* RNA viral, então usa a RT, transcripitase reversa
* Taq gera a segunda fita do DNA
* Faz PCR para ter grande quantidade de DNA viral

21
Q

Fale sobre o exame de covid por antígeno.

A
  • Etapas
    • Coloca o SOAB num solvente
    • Dissolve o vírus e deixa várias spikes
    • No reservatório tem anti-spike
    • Se tiver vão aparecer 2 traços

-Igual o de gravidez

22
Q

DNA Fingerprints
O que é?
Quais os usos?
Quais as ferramentas?

A
  • Impressão digital do DNA
  • Usos:
    • Criminalística
    • Exame de paternidade
  • Ferramentas:
    • PCR
    • Enzima de restrição
    • Gel de eletroforese
      • Separa fragmentos de DNA e proteínas pelo peso molecular.
23
Q

Como é a aplicação do DNA Fingerprints na criminalística?

A
  • Criminalistica
    • A prova tem que ter todas as bandas iguais ao do suspeito para ser o culpado.
    • Usa-se a mesma enzima de restrição.
24
Q

Como funciona o DNA Fingerprints para teste de paternidade?

A
25
Q

O que é a clonagem?

A
  • Forma de reprodução assexuada
    • Naturalmente (bipartição, brotamento …)
    • Artificial
      • Terapêutica
        • Objetivo de obter células tronco para produzir novos órgãos para transplante.
      • Reprodutiva
        • Criação de clones para criar copias idênticas de um novo ser.
26
Q

Qual o processo de uma clonagem artificial?

A
  • Processo:
    • Pega uma célula somática (teoricamente qualquer, mas nem sempre)
      • Formam tecidos, órgãos e sistemas
    • Usa se um óvulo da mãe ou de qualquer mulher da família por parte de mãe
      • Mais fácil fazer clone de mulher porque pega o próprio óculo.
      • Pois o DNA mitocondrial interfere no DNA celular, logo tem que ser o mais compatível possível.
    • Retiro o núcleo do óvulo
    • Transfiro o núcleo da célula somática para o óvulo
    • O núcleo ainda está diferenciado, tem que desprogramar com descargas elétricas e substâncias químicas.
    • Logo, vira um zigoto.
      • Mórula -> Blástula -> se virar um novo ser é reprodutiva (proibido por ser antiético)
      • Mórula -> Blástula (com a massa celular interna que é tronco) -> retira células troncos e produz tecidos e órgãos para transplante -> clonagem terapêutica
        • Ser humano só produz tecidos, órgãos ainda não.
27
Q

O que é a técnica IPS para produzir células troncos?

A
  • A célula tronco pode ser criada a partir da indução de 4 genes (IPS) que são introduzidos em qualquer célula somática.
    • Células tronco produzidas pela técnica do IPS
28
Q

O que é CRISPR e Cas-9?
Como acontece na natureza e na tecnologia gênica?

A
  • CRISPR
    • Sequências palindrômicas repetidas igualmente interespaçadas.
    • É a memória imunológica da bactéria / memória imunológica contra vírus
    • Armazena DNA Viral (só funciona em vírus de DNA)
    • Para produzir um RNA CRISPR, que é um guia
  • Cas-9
    • Enzima que corta o DNA em qualquer lugar desde que guiada por RNA guia
    • É uma nuclease da bactéria (fica no nucleoide - núcleo da bactéria que não é organizado.)
  • Os cientistas usam os dois para editar o DNA em qualquer lugar (Editoração)
  • CRISPR só mexe em genes e não em cromossomos.
  • Usado para curar doenças causadas por genes errados.