Biotechnologie Flashcards
CBA
séquence unique d’ADN pouvant identifier chaque espèce eucaryote
Résultats du CBA identiques
Certaines espèces étroitement apparentées
Comment différencier des CBA identiques
Utilisation de plusieurs régions CBA
Tampon de lyse
Solubilise les lipides des membranes plasmiques et des autres organites cellulaires
Solution de protéinase K
Enzyme s’attaquant aux protéines
Broyage mécanique
Aide à briser les parois des cellules et autres matériaux cellulaires rigides
Tampon de dénaturation
Dénature les protéines afin de les libérer de l’ADN
Éthanol 95%
Dissoudre les contaminants et Réduire la solubilité de l’ADN
Colonne de centrifugation
Sépare l’ADN des autres contaminants
Deux étapes de lavage
Détacher des contaminants restants de notre ADN
Tampon d’élution
Détache l’ADN de la membrane
Amplification en chaine par polymérase (permet?)
Permet de multiplier (in vitro) une séquence d’ADN spécifique en millions de copies
Cycles de l’amplification
- Dénaturation
- Hybridation
- Élongation
ACP
On constitue une solution d’amplification contenant la séquence d’ADN à amplifier, une enzyme Taq polymérase, des nucléotides d’ADN, des amorces spécifiques à la séquence d’ADN à amplifier et un tampon
Électrophorèse sur gel
Sépare les molécules selon leur taille et leur charge dans un champ électrique