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HBC > Bioquímica Clinica > Flashcards

Bioquímica Clinica Flashcards

1
Q

Para que serve Bioquímica Clinica?

A

1.Triagem
2.Confirmar Diagnósticos
3. Monitorizar doenças
4. Decidir Tratamentos
5. Monitorizar resposta a tratamento
6. Conhecer Mecanismo da doença

Isto através da analise de fluidos corporais

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2
Q

Processo da Bioquímica Clinica

A
  1. Questões Clinicas
  2. Dados Clínicos (Biomarcadores)
  3. Colheita de Amostras
  4. Transporte de Amostras
  5. Receção das Amostras
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3
Q

Que testes podem ser solicitados para avaliar os biomarcadores e o que consistem?

A
  1. Testes de Emergência- Em ambiente não clinico, resultados em menos de 24h, existe pouca variedade. Com o objetivo de tomar decisões rápidas.
  2. Point-Of-Care- Testes rápidos sem necessidade de profissionais. Podem ser paper-based (Covid, gravidez), chip-based(monitorização de glucoses) ou dispositivos moveis de assistencia
  3. Analises regulares- Resultados 24h- dias
  4. Organ Papel- Analises regulares mas focados num ou alguns orgãos; Resultados 24h- dias

5.Moleculares- Ao material genetico; Resultados 48h- semanas

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4
Q

Quais são os bioespecimes?

A
  1. Sangue
  2. Urina
  3. Fluido Cefalo- Raquidiano
  4. Liquido pleural, pericárdio, sinovial, saliva
  5. Fezes
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5
Q

Tipos de teste e Biomarcadores no sangue

A
  1. Hemograma- Eritrócitos, hemoglobina, hematrócitos, distribuição de eritrócitos; leucócitos, neutrófilos, basófilos; plaquetas; coagulação (fibrinogénio)…
  2. Anemia- nidrémia, capacidade de liagção ao ferro, ferritina…
  3. Bioquimica- Glicémia, lactato, ácido úrico, creatinina, parametros inflamatórios, eletrólitos, proteinas e lipidos séricas, enzimas, marcadores cardiacos, hormonas tiroide, hormonas sexuais, hormonas suprarenais, biomarcadores tumorais…
  4. Hemocultura- testes de sensibildade a antibioticos…
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6
Q

Tipos de teste e Biomarcadores na urina

A
  1. Propriedades físicas (cor)
  2. Propriedades quimicas( pH, osmolidade)
  3. Testes Bioquimicos( eletrolitos, hormonas)
  4. Urocultura (meter bichinhos e ver se crescem)
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7
Q

Como funciona a recolha de amostras)

A

O sangue é retirado por flebotomia, coleta através de uma veia.

As cores dos tubos indicam os testes realizados.

Os testes devem ser feitos por uma certa ordem.

A agitação, temperatura, exposição à luz deve ser controlada.

Labelling é importante e deve conter: Nome do paciente, tipo de amostra, data, quem recolheu amostra

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8
Q

O que é importante no transporte da amostra?

A

A agitação, temperatura, exposição à luz deve ser controlada. Tambem podem existir cuidados especificos.

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9
Q

O que faz uma amostra ser rejeitada?

A
  1. Os requisitos não serem cumpridos
  2. Mau labelling
  3. Bioespecimes em más condições
  4. Temperaturas não adequadas
  5. Amostras Antigas
  6. Pouca quantidade
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10
Q

Quais são os métodos de analise?

A
  1. Espectrofotometria
  2. Espetroscopia UV- Vis
  3. Espetroscopia de IV
  4. Colorimetria
  5. Espectroscopia de Massa
  6. Espectroscopia de NMR
  7. Citometria de Fluxo
  8. Células Ativadas por flurorescencia
  9. Cromatografia em Papel
  10. Cromatografia em Camada Fina
  11. Cromatografia de Exclusão de Tamanho
  12. Cromatografia Trocas Iónicas
  13. Cromatografia Perfomance de Lipidos
  14. Eletroforese
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11
Q

Espectrofotometria

A

-Interação da radiação com a amostra: atenuação, absorção, dispersão…
-Baseada na Lei de Beer- Lambert: A concentração da substancia é proporcional á luz absorvida para um certo comprimento de onda.
-Permite detetar a concentração do analito, de impurezas, estrutura dos compostos orgânicos, cinética, grupos funcionais, comprimento molecular da substancia

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12
Q

Espetroscopia UV- Vis

A

-Comprimento de Onda: 190-900 nm
-Permite detetar a concentração do analito e impurezas baseado num espectro e medi-las para certos comprimento de onda, , cinética, alterações de conformação e mudanças de cor

-Importante escolher comprimento de onda certo e calibrar de forma a concentração estar dentro do limite máximo

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13
Q

Espetroscopia de IV

A

-Comprimento de Onda: 1400-2800 nm
- Amostras liquidas ou solidas
- Deteção de ligaçoes atomicas

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14
Q

Colorimetria

A
  • Deteta Mudanças de Cor
  • Não é quantitativo, só combinado com outras tecnicas
  • Permite detetar a concentração do analito e impurezas para um certo comprimento de onda e saber sobre alteraçoes conformacionais
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15
Q

Espectroscopia de Massa

A
  • Medição razão Massa/Carga de um analito
  • A amostra é bombardeada com eletroes e ioniza-se
  • As particulas vão ficar sujeitas a um campo eletrico e magnetico e são defletidas de acordo com razão Massa/Carga
  • Os iões são detetados e exibidos num espectro de intensidades
  • As moleculas vao ser identificadas por: peso, compostos, estrutura e propriedades quimicas
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16
Q

Espectroscopia de NMR

A
  • Interaçao entre radiaçao EM com os nucleos das moleculas, sujeitas a campo magnetico
  • Informaçoes sobre estrutura, dinamica, e interaçao
17
Q

Citometria de Fluxo

A

-A amostra atravessa um laser, a radiação dispersa é detetada e permite identificar cada célula ou componente
- Exige staining
- Relevante para contagem de celulas, detaçao de biomarcadores…

18
Q

Células Ativadas por flurorescencia

A
  • Tipo de Citometria de Fluxo
  • Separaçao celular com base em caracteristicas fisicas atraves de anticorpos especificos com corantes fluroescentes
  • Exige staining
19
Q

Cromatografias

A
  • Separaçao dos componentes numa mistura
  1. Em Papel
    - Baseado nos diferentes tempos de migraçao pela folha
    - Separa proteinas, hidratos, lipidos, compostos organicos, ioes…
    - Barato
  2. Camada Fina
    - Igual ao papel mas com vidro ou platico com uma camada fina de um absorvente como silica
    - Permite chegar ao fator de retençao (R=componente/solvente), +R(viaja muito, é apolar), -R(viaja pouco, é polar)
    - Informaçao qualitativa
  3. Exclusão de Tamanho
    - Moleculas pequenas migram + lentamente que moleculas grandes
  4. Troca Iónica
    - Separa iões com base na afinidade iónica
    - Há um fase ionizada que interage com os iões de carga oposta, que ficam lá retidos
    - Util para separar moleculas com carga
    - Importante ter em conta o ponto isoeletrico
  5. Perfomance de Lipidos~
    - Separa lipidos
    -Bombardeamento numa coluna com pequenos poros, as diferenças de solubilidade faz com que se movam a diferentes velocidades nesta, os componentes sao detetados em espectroscopia de absorçao
    - Na fase normal a coluna é polar, e a móvel é apolar; na reversa é ao contrario e é a mais comum
    - Importa definir o tipo de coluna, fase movel, e fluxo e garantir que nao entram bolhas de ar
    - O tempo de retençao é caracteristico de cada analito e permite chegar à concentração baseado na area do grafico
20
Q

Eletroforese

A
  • Migraçao de cargas sujeitas a um campo eletrico num soluto
  • Se negativas vão para o anodo (positivo), se positivas vão para o cátodo (negativo)
  • Usado para separar DNA e RNA e proteinas
  • As moleculas mais pequenas migram + rapidamente
21
Q

Que testes bioquimicos existem?

A
  1. Moleculares - Amplificam o material genético viral e o sinal
  2. Serologicos- Detetam anticorpos que se ligam a antigénios virais
22
Q

Testes Serológicos

A

-Detetam anticorpos ou antigénios no paciente
- Permitem:
Detetar anticorpos produzidos pelo sistema imunitario em reposta a infeções, compreender resposta imunitária após vacinação, detetar anticorpos produzidos provenientes de doenças auto imunes

  1. Seleçao do antigenio/anticorpo
  2. Imobilizaçao deste em placas
  3. Inoculaçao da amostra
  4. Lavagem (tirar tudo o que nao interessa)
  5. Deteçao dos complexos antigenio-anticorpo
  6. Mediçao do sinal
23
Q

Testes Moleculares

A
  • Detetam sequencias de acidos nucleicos associados a agentes patogenicos ou marcadores geneticos
  • Permitem:
    Detetar a presença de virus e bacterias atraves da presença dos seus acidos nucleicos (+sensibilidade), identificar mutações geneticas, informaçoes sobre composiçao genetica incluindo resistencia a medicaçao
    • Sensibilidade e + especificidade que os serologicos
24
Q

Controlo de qualidade

A

Precisão + Consistencia + Exatidão
- Interno: Regulação, amostras de controlo, testes paralelos
- Externo: Comparação entre laboratorios, testes de eficiencia

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