Biologie moléculaire Flashcards
ARN ribosomal : double ou simple ?
Double
ADN est plus stable que l’ARN :
a) absence d’hydroxyle en 2’ du sucre
b) Thymine
Désamination spontanée de
la cytosine en uracile
Polymérases d’ADN ont besoin de
amorce
Transcriptase inverse : amorce de
ARN
Polymérases d’ARN : pas
d’amorce
Pour la PCR il faut seulement connaitre
la séquence des amorces
RT-PCR
rétro-transcription produit ADN complémentaire qui est amplifié par PCR
Possibilités de la PCR
a) détecter un organisme
b) détecter un gène
c) détecter ARNm (activité d’un gène)
Barcoding moléculaire
identification des espèces présentes grâce aux séquences conservées qui différent d’un organisme à l’autre
Méta-barcoding
barcoding de l’ADN d’un échantillon pour produire un catalogue des espèces présentes
Méthylation protége de
enzymes de restriction
Enzymes de restriction
coupent séquences précises de l’ADN
DNA ligase
coller bouts cohésifs après l’action des enzymes de restriction
Vecteurs plasmides
permettent multiplier et exprimer l’ADN recombinant
ADN recombinant : éléments
a) origine de réplication
b) marqueur de séléction : un gène d’intérêt
c) site d’insertion : où coupent les enzymes de restriction
plasmides vecteurs d’expression, sites d’insertion sont
en aval du promoteur
le séquencage selon Sanger utilise des
didésoxynucléotides
Le didésoxynucléotides provoquent
différentes tailles de fragments d’ADN
Premier génération de séquencage
séquencage selon Sanger
Deuxième génération de séquencage
séquencage parallèle massif de fragments assez courts
Troisième géneration de séquencage
séquencage de longs fragments individuels
Métagénomique
séquencage et analyse d’ADN sans séparation des porganismes présents dans l’échantillon
Bactériophages (ou phages)
virus de bactéries
viroides
composés seulement d’un brin d’ARN circulaire (attaquent les plantes)
prions
composés seulement des feuillets B
Génomes de virus à ADN : repliqués dans
noyau