Biochemie

Question 1

Glucose-Bestimmung (Reflotron, Schnelltest)

Answer 1

Trinder-Reaktion, gekoppelter Assay
Messreaktion: D-Glucose + O2 + Wasser + Glucoseoxidase -> Gluconsäure / D-Gluconolacton + H2O2
Indikatorreaktion: Phenol (/H+) + Chromogen + H2O2 + Peroxidase -> Farbstoff + Wasser
75 - 115 mg/dl
Störungen: Gluthation, Harnsäure, Ascorbinsäure (Red-Mittel)
pathologisch: ab 50 mg/dl, normal 15 mg/dl (Urin)
Nachweisgrenze: 40 mg/dl
glomeruläre Rückresorptionsschwelle: 180 - 200 mg/dl
Folgeuntersuchungen: HbA1c, Blutglucose
Zuckeraufnahme, Diabetes (renal: Blutzucker normal)

Glucose + ATP + Hexokinase -> Glucose-6-phosphat
G-6-P + NADP+ + G6P-Dehydrogenase -> NADPH + H+ + Gluconolacton-6-phosphat

Question 2

Harnstoff-Bestimmung

Answer 2

Talke und Schubert, kinetische Messung, gekoppelter Assay
Harnstoff + Wasser + 2 H+ -> 2 Ammonium + CO2 (Urease)
2 Ammonium + CO2 + 2 Ketoglutarat + 2 NADH -> Wasser + 2 NAD+ + 2 Glutamat (Glutamat-Dehydrogenase)
15 - 45 mg/dl
Blood Urea Nitrogen (Serumkonzentration): abhängig von Proteinzufuhr, Flüssigkeitszufuhr, Nierenfunktion
in Verbindung mit Creatinin-Messung
Urämie
Störungen: Schwermetalle (Urease-Thiolgruppen), Ammoniumheparinat, Ammoniak

Question 3

Gesamtprotein-Bestimmung

Answer 3

Biuret-Reaktion
Tartrat, Kupfersulfat, Natronlauge
< 20 mg/dl
Proteinurie: unzureichende Filtration, Durchlässigkeit, gestörte Rückresorption. kardiovaskuläre Erkrankungen
Serum: Erwachsene: 7 - 9 g/dl, Kinder: 5 - 9 g/dl
24 h-Urin: < 100 mg

Question 4

Creatinin-Bestimmung (Harn / Serum)

Answer 4

Jaffé-Reaktion
Pikrinsäure + Creatinin (+ Natronlauge) -> Farbkomplex
0,5 - 1 mg/dl
Störungen: Ketone, Bilirubin

Question 5

Bilirubin (Schnelltest Urin)

Answer 5

Abbauprodukt von Hämoglobin (Leber, Milz), Ausscheidung: Glucuronsäurederivat, nicht frei
Bilirubin + Diazoniumsalz + Säure -> Farbstoff
ab 0,5 mg/dl: Galle-/Lebererkrankung, Hämolyse
Ikterus, Hepatitis

Question 6

Urobilinogen (Schnelltest Urin)

Answer 6

durch Darmbakterien aus Bilirubin, Abbau in Leber
Urobilinogen + Diazoniumsalz + Säure -> Farbstoff
normal: 0,1 - 1,8 mg/dl
Hämolyse, Hepatitis, Tumore, Infektion, Leberschäden

Question 7

Ketonkörper (Schnelltest Urin)

Answer 7

Legal-Probe
Acetessigsäure / Aceton + Nitroprussid-Natrium + Glycin + Base -> Farbkomplex
ab 5 / 50 mg/dl
nicht b-Hydroxybuttersäure
Stoffwechseldekompensation (Diabetes, körperliche Anstrengung, Schwangerschaft, Fasten)
gesund: negativ

Question 8

Ascorbinsäure (Schnelltest Urin)

Answer 8

Entfärbung Tillmans-Reagenz (Reduktion durch Ascorbinsäure), Farbwechsel
Störung vieler Nachweise (Redoxreaktionen; Bilirubin, Blut, Glucose, Ketonkörper)
Test min. 10 h nach Vitamin C-Aufnahme (Früchte, Tabletten)

Question 9

Protein (Schnelltest Urin)

Answer 9

pH-Indikator-Eiweißfehler (pH konstant), besonders Albumin
pathologisch: ab 30 mg/dl
Nierenerkrankungen, Infektionen, Stress, körperliche Belastung, Schwangerschaft
Störung: Harnwegsinfekt, PVP (Blutersatz)

Question 10

Blut / Hämoglobin / Myoglobin (Schnelltest Urin)

Answer 10

Pseudoperoxidase-Aktivität
Hydroperoxid + Chromogen + Katalysator -> Farbstoff
ab 5 Erythrozyten/µl
intakte Erythrozyten: Hämolyse, Punktfärbung
Steine, Tumore, Erkrankungen Niere/Urogenitaltrakt
Störung: Harnwegsinfekt

Question 11

pH (Schnelltest Urin)

Answer 11

Mischindikator (Methylrot, Bromthymolblau), pH 5 - 9
normal: pH 5 - 6
Fleisch, Fasten, Diabetes: sauer
Vegetarier, Harnwegsinfekte: alkalisch (mikrobielle Urease -> Ammoniak)

Question 12

Nitrit (Schnelltest Urin)

Answer 12

Griess-Probe
Sulfanilamid + Nitrit + Säure -> Diazoniumsalz
+ Reaktionspartner -> Farbstoff
ab 10^5 /ml
Bakteriurie (Nitratreduktase, E. coli / Gram-negative), Vergiftung
Morgenurin, gemüsehaltige Ernährung
Risikogruppen: Weibchen, Ältere ab 60, Diabetiker, Gicht, Prostataadenom

Question 13

Leukozyten (Schnelltest Urin)

Answer 13

Indoxylester + Diazoniumsalz + Esterase -> Farbstoff
pathologisch: ab ~15 Leukozyten/µl
Harnwegsinfekt, ohne Bakterien: Tuberkulose
normal: negativ
Störungen: b-Lactam-Antibiotika, starke Färbung, hohe Protein-/Glucoseausscheidung

Question 14

spezifisches Gewicht / Dichte

Answer 14

Farbumschlag durch Ionen

Question 15

Micral-Test / Albumin (Schnelltest Urin)

Answer 15

anti-Albumin-IgG-Gold-Konjugat, Morgenurin
überschüssiges Konjugat durch fixiertes Humanalbumin abgefangen
Mikroalbuminurie: 2 - 20 mg/dl (2 Messungen, verschiedene Tage innerhalb 1 Monat), ab 20 mg/l (2 mg/dl): Nephropathie (Diabetes, Hypertonie)
akute Funktionsstörungen ausschließen

Question 16

hemo FEC

Answer 16

okkultes Blut im Stuhl, Pseudoperoxidase-Aktivität, qualitativ
Guajak-Harz + Hämoglobin + Wasserstoffperoxid -> Färbung
kolorektale Karzinome, Blutung
Störungen: Ascorbinsäure, rohes Fleisch, Gemüse-Peroxidasen
Diät:
bessere Tests

Question 17

Glucose-Test (Diabetes) / Werte

Answer 17

glomeruläre Rückresorptionsschwelle: 180 - 200 mg/dl
normal: nach 30 min max. 130 mg/dl, nach 1,5 h wieder 80 mg/dl
Diabetes: nach 1,5 h 270 mg/dl
normal (Urin): max. 15 mg/dl
100 g Glucose oral
nüchtern: Vollblut < 100 mg/dl, Serum < 115 mg/dl, Harn < 15 mg/dl
1 h: Vollblut < 160 mg/dl, Serum < 175 mg/dl, Harn 15 - 30 mg/dl
2 h: Vollblut < 120 mg/dl, Serum < 135 mg/dl, Harn < 15 mg/dl
Diabetiker: 1 / 2 h - 250 mg/dl
Glucosurie: Nierenfunktion < 30 %

Question 18

Glycohämoglobin (HbA1c)

Answer 18

“Blutgedächtnis” durch hohen Blutzucker, nicht-enzymatische Glykosylierung
normal: 5 % HbA
HPLC, Immunoassay, Referenz: Hb-Proteolyse, MS/C

Question 19

Keimzahlbestimmung (Urin)

Answer 19

CLED-Agar (Cystein Lactose Electrolyte-Deficient): allgemein, Bromphenolblau: durch Lactose-Abbau gelb (E. coli, Staphylokokken, Streptokokken)
MacConkey-Agar: selektiv, Gram-negative (E. coli, Salmonellen, Shigellen), keine Gram-positiven Kokken
pathologisch: ab 10^5 /ml
normal: negativ
Störungen: Antibiotika, antibakterielle Stoffe
Morgenurin

Question 20

Schwangerschaftstest / humanes Choriongonadotropin

Answer 20

Glykoprotein, b-Untereinheit: spezifisch
Synthese: Plazenta, 6 - 10 d nach Empfängnis
Wirkung: Progesteronsekretion (Gelbkörper) -> Zyklusunterdrückung
markierte anti-a-Untereinheit-Antikörper, markierte Kontroll-IgG
immobilisierte anti-b-Untereinheit-Antikörper, anti-IgG-Antikörper
Störungen: Blasenmole/Erkrankungen

Question 21

Glucose-Hexokinase-Reaktion

Answer 21

gekoppelter Assay
Messreaktion: Glucose + Hexokinase -> Glucose-6-phosphat
Indikatorreaktion: G-6-P + G-6-P-Dehydrogenase + NADP+ -> Gluconolacton-6-phosphat + NADPH
Störung: Trichloressigsäure

Question 22

Harnsäure

Answer 22

Endprodukt Purinstoffwechsel
Serum: 3 - 7 mg/dl (Männer), 2 - 6 mg/dl (Frauen)
24 h-Urin: 250 - 700 mg
Hyperuricämie: Enzymdefekte, Nierendefekte, purinreiche Ernährung (Hülsenfrüchte, Haut)
Urat-Kristalle -> Entzündungen / Gicht
Gicht + Nierenerkrankung -> Creatinin-Clearance

Question 23

Reflotron: Gesamt-Cholesterin

Answer 23

Vorbereitungsreaktion: Cholesterinester + Wasser + Cholesterinesterase -> Cholesterin + Carbonsäure
Messreaktion: Cholesterin + O2 + Cholesterinoxidase -> Cholestenon + H2O2
Indikatorreaktion: H2O2 + Indikator (red) + Peroxidase -> Indikator (ox) + Wasser
Serum (Erwachsene): < 200 mg/dl
75 % endogen
erhöht: genetisch, Schwangerschaft, Ernährung, Leber-, Nierenerkrankungen, Diabetes
HDL-Cholesterin: Präzipitation/Filtration von Chylomikronen, VLDL, LDL mit Dextransulfat/Mg2+

Question 24

Reflotron: Triglyceride

Answer 24

Triglyceride + Wasser + Esterase -> Glycerin + Fettsäuren
Glycerin + ATP + Glycerokinase -> Glycerin-3-phosphat + ADP
Glycerin-3-phosphat + O2 + Glycerinphosphat-Oxidase -> Dihydroxyacetonphosphat + H2O2
Indikatorreaktion: H2O2 + Indikator (red) + Peroxidase -> Indikator (ox) + Wasser
< 150 mg/dl

Question 25

Friedewald-Formel

Answer 25

Serum-LDL-Cholesterin = Gesamtcholesterin - HDL-Cholesterin - VLDL (TG/5)
bei Triglyceride < 400 mg/dl, nicht bei Chylomikronämie

Question 26

Lipidprofil

Answer 26

Serum-LDL (Erwachsene): ideal < 130 mg/dl, LDL/HDL < 3; mäßig 130 - 160 mg/dl, LDL/HDL 3 - 5; hoch > 160 mg/dl, LDL/HDL > 5
Serum-HDL (Erwachsene): > 35 mg/dl
Triglyceride: < 150 mg/dl

Question 27

Reflotron: Creatinin

Answer 27

Creatinin + Wasser + Creatininase -> Creatin
Creatin + Wasser + Creatinase -> Sarcosin + Harnstoff
Sarcosin + O2 + Wasser + Sarcosin-Oxidase -> Glycin + Formaldehyd + H2O2
Indikatorreaktion: H2O2 + Indikator (red) + Peroxidase -> Indikator (ox) + Wasser
Störung: Bilirubin, Ketone

Question 28

Reflotron: Harnstoff

Answer 28

Harnstoff + Wasser -> 2 Ammoniak + CO2 (Urease)

Ammoniak + Indikator -> Farbstoff

Question 29

Reflotron: Harnsäure

Answer 29

Harnsäure + O2 + Wasser -> Allantoin + H2O2 + CO2 (Uricase)

Indikatorreaktion: H2O2 + Indikator (red) + Peroxidase -> Indikator (ox) + Wasser

Question 30

LDH-Elektrophorese: Färbung

Answer 30

Substratfärbung: NADH + Reaktionspartner + Indikator (ox) -> NAD+ + Indikator (red)
Proteinfärbung: Amidoschwarz
7 % Essigsäure stoppt Färbereaktionen/Entfärbung