BIOCELL Flashcards
Comment et que fait la lumière d’un microscope optique ?
Directe et traverse l’échantillon
Étape d’une préparation ?
Fixation, déshydratation, rigidifierions, coupe et coloration
FDRCC
Qu’est ce que la résolution d’un microscope optique ?
Taille du plus petit point que l’on réussit à observer en étant capable de distinguer le point d’à côté
Résolution microscope optique
200 nm
Microscope à contraste de phase peut étudier une cellule vivante
Vrai
Que subit la lumière lors de l’utilisation du micro optique a contrasté de phase
Un déphasage
Autre avantage du micro optique à contraste de phase
On peut voir les cellules se déplacer = micro cinéma
Limite de la microscopie conventionnelle
Limite a des échantillons fins
Avantage microscopie confocale ? Grâce à quoi ?
Observation échantillon épais grâce à un diaphragme (pinhole) qui concentre le rayon sur un seul plan
On ne peut pas visualiser en 3D grâce au micro confocale
Faux
La résolution baisse avec le micro confocale
Faux
La micro à super résolution accroit la résolution grâce à un excitement S… + nom exact
Séquencielle = Fluochrome
La micro à super résolution utilise une substance chimique fluorescente
Vrai, qui devient fluorescente après excitation
Le micro optique photonique/contraste de phase et confocale permettent de visualiser des petits organites
FAUX seul la Super Reso et la fluorescence en sont capables
Donner deux capacité d’une molécule fluorescente
Absorber l’énergie lumineuse et la restituer très rapidement
Comment appelle-t-on la lumière absorber par une molécule fluorescente ?
Lumière d’excitation incidente
Comment appelle-t-on la lumière émise par une molécule fluorescente ?
Lumière d’émission
La molécule fluorescente est caractérisé par 1 longueur d’onde etn2 énergies différentes
FAUX par 2 longueur d’onde et 2 énergies différentes
Comment appelle-t-on le miroir sur lequel réfléchie la lumière bleu en micro fluo ?
Miroir dichroïque
La microscopie a fluo ne permet pas de localiser des molécules spécifiques
FAUX
Comment sont appelés les marqueurs fluorescents ?
Fluorochromes
Les fluorochromes sont indirectement liés à la structure cellulaires étudiée
FAUX peuvent être directement aussi
Pour étudier une molécule fluorescente, les cellules sont vivantes
Faux, mortes aussi
Bioluminescence est un phénomène naturel
Vrai, Ex : luciole/méduse
Comment s’appelle la molécule extraite de la méduse
GFP (g fait pipi une méduse m’a piqué)
Que comporte la GFP ? et de quelle forme ? émettant une fluorescence de quelle couleur ?
Chromophore en forme de tonneau, verte
De combien d’acide aminé est composé le chromophore de la GFP ?
3
La GFP possède 2 … … à … nm (UV) et à … nm (bleu) et un spectre d’émission à … nm (vert)
maxima d’excitation, 395, 475, 500
3 particularités de la GFP quoi fait qu’elle occupe une place importante en biocell ?
Intrinsèque, non toxique et conservée
La micro fluo ne permet pas de visualiser tout les comportements
FAUX
Citez 2 fluorochromes artificiels et comment elle doit être administrer à la cellule
Fluoresceine et rhodamine
Nommez la technique où l’on utilise un pipette en verre
Micro injection
Détailler la technique de l’electropolation ?
Cellules entre 2 électrodes; choc électrique, trous dans la membrane et les molécules fluo rentrent
Quelle est la méthode d’insertion de molécule fluorescente est la plus utilisée ?
Vectorisation par vésicule
Qu’utilise la vectorisation par vésicule ?
L’endocytose (fusion de vésicule et de mb plasmique)
L’expression d’un gène codant pour une protéine fluorescente est utilisée en micro fluo
Vrai
La différence entre suggérer et démontrer
démontrer = plus aucun doute possible Suggérer = très souvent, sécurité
Qu’est ce que le FRET ?
Etude d’un transfert d’énergie non radiatif (pas d’émission de lumière) entre deux molécules fluorescentes
Que permet le FRET INTERmoléculaire ?
Permet de voir si 2 molécules FONCTIONNENT ensemble grâce à deux fluochromes
Que permet le FRET INTRAmoléculaire ?
Permet d’étudier la conformation de la molécule (mais même principe que INTERmoleculaire) grâce à deux fluochromes
Particularité de la calmoduline ?
Change de conformation en présence de calcium
Si ob expose trop une cellule fluorescente à la lumière intense, on tue la cellule
Faux, on tue la fluorescence
Qu’est ce que le photo-blanchiment ?
Etude du déplacement des molécules dans la cellules
Les deux manières de photo-blanchiment ?
FLIP et FRAP
Les FLIP/FRAP est utilisé dans les mesures de déplacement/diffusion de protéines membranaire dans une cellule
Vrai
FLIP la fluorescence revient
Faux, FRAP
FRAP, on fait une irradiation laser transitoire et FLIP continu
Vrai
La fluorescence étudient principalement
l’ADN et l’ARN
L’immunofluorescence indirect utilise des cellules du système immunitaire ? Si oui, lesquels ?
Oui, les anticorps
Pourquoi l’immunofluorescence indirecte est dite indirect ?
Car elle n’est pas lié à une molécule mais plutôt un anticorps
L’hybridation in situ, le FISH, permet de visualiser des séquences spécifiques d’acides nucléiques par quel moyen ?
Par des sondes fluorescentes complémentaire à certains gènes ou chromosomes.
Les 3 étapes de l’hybridation in situ, le FISH. Pour l’étude d’un brin d’ARN ces étapes sont indispensables ?
Dénaturation : les deux brins sont séparés par chaleur ou traitement chimique
Hybridation de la sonde avec le brin
Révélation, la sonde étant marquée par un fluorochrome, la fluorescence est révélée
Non seulement les deux dernières car il y a qu’un seul brain
La sonde lors de l’hybridation in situ, peut être … ou … fluorescente. Pourquoi ?
Directement car on incorpore un nucléotide qui est marqué et indirectement car elle peut être marquée” par un complexe antigêne-anticorps
