Bakterielabb Flashcards
Bakterieodling
- finns fasta och flytande substrat
- man utnyttjar deras olikheter i metabolism och krav på näring, temp, syrebehov
aerob bakterie
kräver syre för att överleva och tillväxa
anaeroba bakterier
- obligata
- fakultativt
- kräver absolut frånvaro av syre
2. klarar båda
Grundsubstrat
- Buffertlösning med lämpliga näringsämnen
- enzymdirigerande proteiner
- glukos (kan metaboliseras av bakterier)
Blodagarplatta
Berikad
- Grundsubstrat, blod och agar
- Diffrentierande
- Alfa-hemolys: Hemoglobin oxideras –> grönt färg
- Beta-hemolys: Röda blodkroppar får en genomskinlig färg (fullständig hemolys)
Hematinagarplatta
Berikad
- Samma som blodagarplatta men blodet värms upp så att hemin bildas —> tillväxtfaktor för vissa bakterier.
Selekterade substrat
Tar bort tillväxt av “vanliga” bakterier och främjar tillväxt av intressanta bakterier.
Diffrentierande substrat
Skiljer olika sorters bakterier åt, tex blodagar
Chapmanplatta
Är både selekterande och differentierande
- höga halter NaCl-> hämmar allt utom Stafylokocker
- Dessa jäser ämnen som ger sura restprodukter –> färgomslaget i plattan blir gult
Transportsubstrat
Copan: används för att förflytta bakterier utan att et växer
Huvudgrupper av bakterier
- Kocker (prickar)
- Stavar
- Spiral
Kockers olika lagring
- Klasar
- Kedjor
- Par (diplokocker)
Metylenblåfärgning
- Basiskt ämne
- bedömer bakteriens storlek, form och lagring
Gramfärgning
- Bakterien färgas först med kristallviolett (blå) + jod
- Acetonsprit löser upp gramnegativa bakteriers vägg och lakar ut blåa färgen
- grampositiva har en tjock cellvägg (peptidoglykan) –> acetonspriten kan ej skölja bort så den förblir blå. - Safranin tillsätts (röd) –> gramnegativa färgas då röda och grampositiva blir lila (blå+röd)
Endosporer
- Bakterien är Icke-vegetativ (i “koma”)
- Bildas när tillväxtmiljön är dålig
- Har genmaterial i sig –> skyddar mot värme och torka
- Kan gro i en bra miljö tex i ett sår
Färgning av endosporer
- Mycket svåra att färga in–> detta används
- Preparatet hettas upp och färgas med malakitgrön
Påvisande av kapsel
- består oftast av polysackarider
- Skyddar bakterien mot angrepp från kroppen
- I blodplatta ter sig dessa slemmiga & utflytande
- efter infärgning ses en rödfärgad bakterie med en ofärgad kapsel
Konjugation
Positiv bakterie med “snopp” och resistens penetrerar en negativ bakterie som inte är resistent. Då för “snoppen” över genmaterial så att båda blir resistenta.
Biotypning
- Via skillnader i bakteriers metabolism kan man art&typ-bestämma.
- Samma koloni används till alla rören
Biotypning olika rören
- KIA
- Mannit
- Urea
- Indol/ONPG
KIA
Jäser:
- glukos + laktos= syra bildas –> GULT
- Enbart glukos= Syra bildas –> RÖTT/GULT
- H2S bildning= Gråsvart järnsulfid fälls ut
MANNIT
Fermentation: jäsning bildas–> GULT
Gasbildning: Det upp och ner vända röret samlar upp bildad gas
UREA
Ureas positivt: NH3 bildas –> CHOCKROSA
Indol/ONPG
GULT –> OMPG positivt
RÖD/ROSA–> INDOL positivt
