Asepsie et contamination (quiz 2) Flashcards
Qu’est-ce qu’un contaminant physique?
Les contaminants physiques ont un effet sur les cultures en perturbant ou en dégradant des composantes biochimiques des cellules, ce qui peut modifier le cycle cellulaire et entrainer la mort des cellules. Il faut donc s’assurer que le laboratoire et la salle de culture ne sont pas soumis à ces facteurs.
Quels sont les contaminants physiques ?
-Température (une température bien réglée selon la plate assure une croissance et un développement optimaux )
-lumière (vitamine B2 est photodégradable)
-radiations (mutations dommageables pour les cellules)
Qu’est-ce qu’un contaminant chimique?
Plusieurs types de contaminants chimiques sont susceptibles de se retrouver dans l’eau, dans les milieux de culture et dans d’autres produits chimiques si aucune mesure particulière n’est prise pour les éliminer. Leur présence peut compromettre la croissance, la différenciation cellulaire et la protéosynthèse.
Quels sont les contaminants chimiques ?
-Ions métalliques (L’utilisation de systèmes de purification d’eau (osmose inverse,
ultrafiltration) permet l’obtention d’une eau de qualité. Les ions métalliques,
comme le chrome, le fer, le cobalt, le cuivre et le sélénium, perturbent les
processus de réplications de l’ADN et de synthèse de protéines)
-Résidus et impuretés (Les dépôts laissés par les détergents sur la vaisselle et le matériel doivent
être évités. Plusieurs cycles de rinçage permettent de pallier à ce problème)
Qu’est-ce qu’on contaminant biologique?
Provient d’organisme vivant très diversifier, risque de contamination à chaque exposition à l’air libre. L’importance du risque varie en fonction de l’environnement, de la méthodologie, de l’équipement et du matériel.
Est-ce que l’apparition de contaminants est fréquente dans les cultures végétales.
La désinfection est prioritaire avant la mise en culture.
oui
Quels sont les contaminants biologiques ?
-virus (une particule microscopique infectieuse qui ne peut se répliquer
qu’en pénétrant dans une cellule et en utilisant sa machinerie cellulaire.
-bactéries (fréquentes, faciles à détecter, élimination à l’aide d’antibiotique )
-mycètes (levures, moisissures)
-invertébrés (insectes et acariens, vecteurs de bactéries et de mycètes)
-
Quelle est la différence entre la stérilisation et la désinfection ?
La stérilisation tue à la chaleur sèche et humide tandis que la désinfection diminue le nombre de bactéries.
Quelles sont les méthodes physiques de stérilisation?
-chaleur humide (autoclave, un appareil qui augmente sous pression la température de la vapeur d’eau à 121 degré environ 15 min)
- chaleur sèche (par incinération ou chauffé au four pour le verre, le métal et certains plastiques)
-microfiltration (Les hottes à flux laminaire vertical, c’est à dire que l’air filtré et stérile est
poussé du haut vers le bas. Ce type de hotte protège à la fois le manipulateur
et le matériel de la contamination.)
-irradiation (rayons UV provoquent des bris dans l’ADN et entrainent la mort des cellules, Les fours à micro-ondes sont utilisés pour de petits volumes de solutions aqueuses ou de gel. 5 minutes à puissance maximale)
Quels sont les principaux désinfectants liquides ?
-éthanol
-hypochlorite de sodium (eau de javel)
Pourquoi utilise-t-on les désinfectants liquides ?
désinfection du :
-matériel
-surfaces de travail
-matériel végétal
-décontamination des liquides
Comment contrôler les envahisseurs?
Principes de base:
La formation du personnel
Instaurer des techniques aseptiques
Lignes directrices pour tous
Nettoyage fréquent
Détection rapide des contaminants
Réserve de cellules saines (backup)
Qu’est-ce qu’un milieu de culture ?
-Mélange complexe de substances nutritives et de facteurs biologiques qui assurent la survie et stimulent la croissance de cellules in vitro en mimant les conditions in vivo. Il fournit des nutriments en conservant une bonne pression osmotique et un pH stables.
Quelle est la composition d’un milieu de culture ?
eau distillée, sels minéraux (inorganiques), éléments organiques, régulateurs de croissance, agent gélifiant
Quels sont les éléments inorganiques ?
-macroéléments , microéléments
sels organiques
cela crée une macromolécule qui est une protéine donc organique mais avec l’acide aminé fait de l’azote qui est inorganique.
-empêche les carences minérales
Quels sont les suppléments organiques ?
-vitamine (stimule la croissance, co-enzyme, permet à des enzymes de catalyser une réaction, se conserve 2-4 semaines au frigo ou 6 mois congelé)ex: pyridoxine
-Les sucres (peu performants au niveau photosynthétique, peu de production de sucre , explant
ex : saccharose
quels sont les 3 régulateurs de croissance ?
AUXINES, les CYTOKININES et les GIBBERELLINES.
quel est le rôle des auxines et nommer des auxines?
Favorise la croissance de cals, les divisions cellulaires, l’allongement
cellulaire
- Favorise l’enracinement.
(A.I.A, ANA, A.I.B, 2,4-D)
Quel est le rôle des cytokinines et nommer des exemples?
- Stimule les divisions cellulaires
- Régularise la morphogénèse (acquisition de la forme)
- Stimule la croissance des bourgeons axillaires et adventifs
- Contribue au renouvellement de la chlorophylle
ex : zéatine, isopenthényladédine , kinétine, benzyladédine
Quel est le rôle des gibbérellines et nommer des exemples?
- Favorise le grandissement cellulaire
- Favorise l’allongement des entre-nœuds
- Lève la dormance des graines
ex : acide gibbérellique
Expliquer la balance hormonal et les réponses physiologiques
voir notes de cours
Que permet la gélose ?
La gélose (ou agar) ajoutée au milieu nutritif permet l’obtention d’un milieu
semi-solide ou solide dans lequel les explants peuvent être repiqués et
supportés.
de quoi dépend la qualité d’un milieu ?
La qualité d’un milieu gélosé est donc dépendante d’une part de sa fermeté,
indispensable au support des plantes, et d’autre part de sa souplesse, qui
facilite la diffusion des éléments nutritifs.
Qu’est-ce que Agar-agar?
Il s’agit d’une substance naturelle extraite de différentes espèces d’algues
marines. On la classe parmi les sucres, parce qu’elle est identifiée comme un
polyoside (donc un glucide).
À quoi servent les gels synthétiques?
Il existe présentement sur le marché, de nouveaux produits permettant de
solidifier les milieux de culture.
Nommer des exemples de gels synthétiques
-phytagel
-gelrite