Approche expérimentales Flashcards
Que fait la technique “knock out” ?
Pour étudier le rôle d’une prot : supprime sa fonction par une délétion de gène (baisse d’expression de la protéine)
Que fait la technique siARN ?
Pour étudier le rôle d’une prot : supprime sa fonction en dégradant son ARNm –> se lie au complexe RISC, clive l’ARNm cible et le dégrade
A quoi sert un dominant négatif ?
Pour étudier le rôle d’une prot en bloquant son activité : on exprime une prot non fonctionnelle en excès par rapport à la prot fonctionnelle –> cela empêche par compétition l’activité de la prot fonctionnelle
Comment bloquer l’activité d’une protéine ?
Avec un dominant négatif ou un inhibiteur spécifique (AC bloquant)
comment supprimer la fonction d’une protéine ?
on baisse son expression par “Knock out” ou “siARN”
comment augmenter l’expression d’une protéine ?
par surexpression avec un transfection de plasmide
qu’est ce qu’un plasmide
matériel génétique exogène dans Cellule eucaryote
comment augmenter l’activité d’une protéine ?
transfection de plasmide ou activateur spécifique (agoniste)
quel est le but d’une RT PCR ?
La RT-PCR a pour objectif de quantifier un ARNm d’intérêt en convertissant les ARNm en ADN complémentaires puis d’amplifier spécifiquement l’ADNc d’intérêt
quel est le but d’une immunoprécipitation ?
L’immunoprécipitation a pour but d’extraire une protéine d’un mélange de protéines
A quoi sert un western blot ?
Le western blot permet de mesurer de manière semi-quantitative la quantité de protéines et de l’identifier
Quelle quantité d’ADNc a t on à la fin d’une RT PCR
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