análisis de ácidos nucléicos

Question 1

tipos de ácidos nucléicos que se van a extraer

Answer 1

• ssDNA
• dsDNA
• RNA
• mRNA
• rRNA

Question 2

Métodos de la extracción de DNA

Answer 2

fenol - cloroformo
PCR reacción en cadena de la polimerasa.
PCR: iniciadores
PCR: punto final

Question 3

Es el primer paso para los estudios de biología molecular y para las técnicas de DNA recombinante, secuenciación, mutagénesis.

Answer 3

analisis de ácidos nucléicos

Question 4

De qué va a depender la elección del método de extracción?

Answer 4

• Tipo de Ac nucleico que se va a extraer.
• Organismos de origen
• fuente
• Técnica en que se utilizará el ácido nucleico extraído

Question 5

en que método de extracción se obtiene buena calidad y cantidad de ADN, reactivos tóxicos y puede tener perdida significativa de DNA

Answer 5

fenol-cloroformo

Question 6

cuáles son los pasos de la extracción de DNA

Answer 6

1. sacar muestra
2. Lisis de la célula
3. Separación
4. Purificación
5. Precipitación
6. Lavado
7. Disolución

Question 7

• colorante especial al DNA para saber cuánto DNA hay.
• unión específica de colorantes fluorescente al ácido nucleótido.

Answer 7

florometria

Question 8

va a indicar cuánto DNA, proteínas, fenol hay en ese microlitro.

Answer 8

espectrofotometría

Question 9

cuál forma de extracción es una copia de lo que hacíamos en replicación?

Answer 9

PCR: reacción en cadena de la polimerasa.

Question 10

que actuará como la helicasa?

Answer 10

temperatura a 95 centigrados

Question 11

Thermus aquaticus -

Answer 11

bacterias resistentes a la temperatura

Question 12

es donde sale el Taq polimerasa como si fuese DNA polimerasa Alfa.

Answer 12

bacteria Thermus aquaticus

Question 13

cloruro de magnesio

Answer 13

buffer

Question 14

cuál es el amortiguador en la PCR: reacción en cadena de la polimerasa?

Answer 14

• pH adecuado (8.4)

Question 15

cofactor de la Taq polimerasa

Answer 15

magnesio

Question 16

se utilizan para reconocer secuencias blanco en el DNA molde.

Answer 16

PCR iniciadores

Question 17

Los primers van a ser ricos en …

Answer 17

citocinas y guaninas

Question 18

cuáles son los momentos de PCR

Answer 18

desnaturalización
hibridación
extensión

Question 19

Separan hebras en una temperatura de 95 centígrados.

Answer 19

desnaturalización

Question 20

que se lleva acabo en la hibridación

Answer 20

• Llegan los primers y se alinean al extremo 3’

Question 21

Formula de temperatura de alineamiento

Answer 21

((4 x Guaninas + citocinas) + ( 2 x Adeninas + timidinas)). 50 - 60 C

Question 22

que se lleva acabo en la extensión

Answer 22

• La Taq (bacteria thermolius) polimerasa actúa sobre el complejo templado de primers
• Agrega dNTP´s complementarios para crear cadenas completas
• 72ºC

Question 23

es un polisacárido extraído de algas marinas y separar fragmentos de ácido desoxirribonucleico (DNA, deoxyribonucleic acid) que van de 100 pb a 25 kb.

Answer 23

gel de agrosa

Question 24

tipos de PCR

Answer 24

PCR punto final
PCR multiple: mutiplex
PCR transcriptasa reversa: rtPCR
PCR tiempo real
PCR tiempo real: qPCR

Question 25

si queremos encontrar un virus, miRNA, snRNA, todos los RNA’s cuál PCR se usa?

Answer 25

PCR transcriptasa reversa: rtPCR

Question 26

• Colorantes específicos:

Answer 26

• sondas fluorescentes de oligonucleótidos con un reportero fluorescente.

Question 27

• Colorantes no específicos:

Answer 27

cualquier doble cadena lo pezca aunque este mal.

Question 28

cuántos tipos de cuantificación existe y cuales son?

Answer 28

2: absoluta y relativa

Question 28

ABSOLUTA:

Answer 28

• conocer el número exacto de copias amplificadas del blanco.

Question 29

te hacen una prueba de cuánto gh tienes, sale que el máximo que deberías de tener es de 30 pero te sale que tienes 80

Answer 29

tienes q restar 80 - 30 siendo 50, 50 es lo que tienes de más.

Question 30

RELATIVA:

Answer 30

se tiene que realizar una resta para saber CUÁNTO es lo que se tiene