Altfragen Flashcards
optischer Test und Beispiel
wichtig bei Enzymanalytik, anwendbar bei jeder Dehydrogenase Reaktion. Cofakor ist NAD+, es gibt eine Extinktion bei 260 UND 340 nm.
Rechnung mmol/l und g bzw. mg (Resorcin mit Mr 110 g/mol berechnet zum selbst Berechnen)
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Harnstoffbestimmung und wann ist der Spiegel gesenkt
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Pyramidonprobe, Untersuchungsgut, was wird untersucht, was ist zu beachten + Rkt
Untersuchungsgut ist der Harn, es wird untersucht, ob Hämoglobin vorliegt. Es ist ein empfindlicher Nachweis, es entstehen Radikalkationen und die Lösung ist blau gefärbt, diese Färbung ist allerdings nicht beständig, weil die Radikale chemisch nicht stabil sind und spontan zerfallen, somit kommt es zu einer Entfärbung.
Ketonkörper: Entstehung, wozu und Nachweis vom primären Ketonkörper
KK resultieren aus Acetyl-CoA, werden vermehrt gebildet, wenn man einen Überschuss an Acetyl-CoA hat, dieses stammt aus der β-Oxidation, wird normalerweise in den Citratzyklus eingeschleust, bei zu viel Acetyl-CoA werden KK gebildet. Überschuss auch bei Fieber, SS-Erbrechen, Behandlung mit Wachstumshormonen, Diäten (Atkins), Diabetes mellitus
2 Nachweise nach viraler Infektion und beschreiben
ELISA, Western-Blot
Radioenzymatischer Nachweis, Vorteile, wie kann man die Spezifität erhöhen
Inkubation der Probe mit radioaktiv markiertem S-Adenosylmethionin
chromatographische Trennung –> Messung der Radioaktivität
+ sehr spezifisch und sehr empfindlich
+ keine Abtrennung erforderlich
+ durch die Messung der Radioaktivität kann auf die Konzentration des Catecholamins geschlossen werden.
Lactase charakterisieren, Nachweis, andere Möglichkeiten ohne RGL
β-Galactosidase, Untersuchungsgut: Biopsie im Dünndarm
FCC-Wert: gibt an, wie viel Lactose durch das Enzym abgebaut werden kann.
o-Nitrophenylgalactose-Rkt
Reinigungsmittel –> welche machen eine Störung, jeweils mit RGL und welches falsch positiv und falsch negativ
Peroxide, Perorate (Scheuermilch)
Harnstreifen zeichnen und erklären
Nylonnetz: mechanischer Schutz, ermöglicht gleichmäßiges Eindringen des Harns in Testfeld–> homogene Verteilung
Reagenzpapier: enthält sämtliche Reagenzien (Puffer, Enzyme, …)
Saugpapier: nimmt überschüssigen Harn auf, damit es zu keiner Verdünnung kommt und verhindert Kontamination zwischen den Feldern, somit kommen Reagenzien von Feld 1 nicht auf Feld 2.
Cholesterol Bestimmung ohne PAP
Cholesterol-Katalase-Methode
Rechnung MIT Aminosäure Serin, Konzentration berechnen. Mit Pentahydrat selber herstellen.
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Alles über HIV-Diagnostik
ELISA
Western-Blot
Viruskultur
P24-Anitgen-Nachweis
Alles über Ketonkörper
werden aus Acetyl-CoA gebildet, bei einem Überschuss kommt es zur Ketonurie. Acetessigsäure (primär), Aceton, β-Hydroxybuttersäure (sekundär)
Umbelliferon-Nachweis
Acetessigsäurenachweis
Neopterin alles
Immunaktivierungsfaktor; wird in γ-Interferon-aktivierten Makrophagen gebildet
extrem lichtempfindlich, wichtig bei Präanalytik (Lichtschutz!!)
erhöhte Neopterinkonzentration bei malignen Erkrankungen (Prognosefaktor bei Prostatakarzinom Tumormarker), bei einer Organabstoßungsreaktion (bereits Tage vor klinischer Manifestation), bei Infektionen (viral und bakteriell), bei Autoimmunerkrankungen
Phenyketonurie klassischer und moderner Nachweis kurz erklären. Metabolismus. Immer Reaktionsgleichungen hinschreiben.
Klassisch: mikrobiologischer Hemmtest; Vollblut aus der Ferse, der Keim (Bacillus subtilis) braucht Phe zum Wachsen, der Nährboden ist Phe-frei, Zusatz von β-Thienylalanin als Antagonist/Inhibitor; starkes Wachstum nur wenn Phe in ausreichender Konzentration vorliegt.
Metabolitenbestimmung: Nachweis auf Phenylpyruvat (Windeltest)
Modern: Tandem-MS; Trockenblut-Stanzling, *interner Standard (Phe-d5 + Tyrosin-d4) Inkubation bei Raumtemperatur, Überstand entnehmen und zur Trockene eindampfen., *Derivatisierungsreagenz (Butanol + HCl) –> Inkubation bei 60° C, dann zur Trockene eindampfen, in Pufferlösung aufnhemen –> Analytik
Lactose toleranztest genau erklären.
Nüchtern-Blutglucosekonzentration bestimmen, Einnahme von 50g Lactose in ca. 500 ml, nach 30, 60, 90 und 120 min. Blutglucose-Konzentration; Auswertung: Anstieg der Blutglucosekonzentration > 20 mg% (Soll), < 10 mg% (Lactoseintoleranz) klinische Symptome (Diarrhoe, Blähungen, Krämpfe)
Trypsin Bestimmung
Trypsin katalysiert Spaltung von Peptid-Bdg mit Carbonylgruppen basischer Aminosäuren, pH-Optimum 7,5-10
Substrat: N-alpha-Benzoyl-D,L-arginin-p-nitroanilid + Trypsin –> gelb