a Flashcards
- Kokie faktoriai įtakoja hidrofobinę skysčių chromatografiją?
- ligandų rūšis;
- matricos tipas
- druskos rūšis ir koncentracija;
- pH;
- temperatūra;
- priedai.
- Kur taikoma afininė chromatografija?
- Mikroanalizavimui;
- bakterijų atskyrimui;
- identifikavimui;
- hormonams;
- baltymams bei kitoms biologinės kilmės medžiagoms;
- komponentų makro išskyrimui.
- Kokia yra gelchromatografijos esmė?
Medžiagų atskyrimas dėka skirtingų dydžių molekulių pasiskirstymo gelio ir mobilioje fazėse. Tai medžiagų atsakyrimo, valymo ir analizės metodas.
*medžiagų mišinių atskyrimas priklauso nuo atskiriamųjų molekulių ir gelio akučių matmenų santykio. Be molekulių matmenų, proporcingų molekulinei masei, labai svarbi i molekulių forma.
- Koks yra gelchromatografijos pritaikymas?
- Kai reikia atskirti medžiagų mišinius: išvalyti medžiagas (dažniausiai valomi stambiamolekuliniai biologiniai junginiai): parinkus tinkamą gelį, galima atskirti ir valyti virusus, baltymus, fermentus, hormonus, antikūnus, nukleorūgštis, polisacharinus.
- Nustatyti medžiagų molekulinę masę.
- Atskirti mažos molekulinės masės junginių mišinius.
- Atskirti aminorūgštis nuo peptidų.
- Frakcionuoti peptidus, susidariusius vykstant dalinei baltymų hidrolizei.
- Pašalinti druskas iš tirpalų.
- Sukoncentruoti tirpalus.
- Kodėl reikia gryninti baltymus?
- funkcijų analizei;
- fizikinių savybių analizei;
- sekos nustatymui;
- industriniams tikslams;
- gydymui.
- Pagal kokias savybes gryninami baltymai?
- Molekulinę masę
- Krūvį
- Tirpumą
- Afiniškumą
- Kokie yra ląstelių suardymo metodai?
- Fiziniai metodai
- Veikimas ultra-garsu
- Osmosinis šokas
- Kokį elektros krūvį turi baltymai?
• Baltymo dalelės gali įsielektrinti ir neigiamai, ir teigiamai. Baltymo elektros krūvio ženklas ir dydis nėra pastovūs, priklauso nuo vandenilio ir hidroksilo jonų koncentracijos vandeniniame tirpale, t.y. nuo tirpalo pH dydžio. Šarminėje terpėje baltymas elgiasi kaip rūgštis ir įsielektrina neigiamai, rūgščioje terpėje – kaip bazė ir įsielektrina teigiamai.
- Kokie yra taikomi baltymų nusodinimo metodai?
- Baltymų nusodinimas organiniais tirpikliais (etanoliu, metanoliu, acetonu)
- Baltymų nusodinimas druskomis (dažniausiai amonio sulfatu)
- Baltymų nusodinimas trichloracto rūgštimi
- Kas yra įdrsukinimas (Salting-in)?
- esant mažoms druskų koncentracijoms, jos stabilizuoja baltymo molekulę, padidina tirpumą.
- Didinant tirpalo joninę jėgą, didėja tirpinio tirpumas, pavyzdžiui, baltymo.
- Kas yra išdrsukinimas (Salting-out)?
• didinant druskos koncentraciją vis mažiau vandens yra prieinama baltymui ir baltymas darosi netirpus. Tai nesusiję su dispersinės fazės dalelių elektrokinetiniu potencialu; įdėtos druskos jonai hidratuodamiesi atima vandenį iš polimero makromolekulių ir sumažina jo tirpumą. Taigi, išdruskinimo esmė yra pačių druskų hidratacija, vykstanti polimero makromolekulių dehidratacijos sąskaita.
- Kas yra chiraliniai junginiai?
Chiraliniais vadinami junginiai, turintys tokią asimetrinę molekulės struktūrą, kurią atitinka jos veidrodinis atvaizdas
- Kas yra izomerai?
Izomerai – junginiai, kurių cheminė formulė ta pati, bet struktūra skiriasi.
- Kas yra stereoizomerai?
Stereoizomerai – junginiai, sudaryti iš tų pačių atomų, bet erdviškai išsidėstę kitaip.
- Kas yra enantiomerai?
Enantiomerai – viena iš molekulių formų. Yra dvi veidrodinio atspindžio formos.
• Galit turėti keletą chiralinių centrų.
• Identiškos fizikinės – cheminės savyvės, bet biologinės ir biocheminės savybės skiriasi.
• Skirtinga optinė rotacija ( (+) dextra (pagal laikrodžio rodyklę) ir (-) levo (prieš laikrodžio rodyklę).