2do Parcial | Fundamentos Teóricos de Técnicas de Tinción Flashcards
Los pasos de la técnica histológica son seis:
1) Obtención de la muestra.
2) Fijación (preservar el material)
3) Inclusión (embeber el material en un medio fácil de cortar)
4) Corte (láminas muy delgadas que sean atravesadas por la luz)
5) Tinción (histoquímica)
6) Montaje (preservar el corte, manteniéndolo aislado del aire y deshidratado)
¿En qué consiste el la fijación?
Proceso de preservación estructural y química de las células y materiales extracelulares.
Los fijadores vuelven insolubles las proteínas, los ácidos
nucleicos y las mucosustancias.
Mantiene estables las estructuras al estimular la formación de enlaces cruzados entre las proteínas.
Cualidades de los fijadores
Actuar con rapidez, antes de que aparezcan los fenómenos post mortem (autolisis, desintegración)
Alto poder de penetración para asegurar la fijación correcta
hasta en las capas profundas
Impedir la desaparición de los elementos solubles durante la fijación o después de ella
No volver los tejidos quebradizos
Tipos de fijadores
- Coagulantes: pueden coagular proteínas, transformándolas en estructuras insolubles.
La arquitectura del tejido se mantiene fundamentalmente por lipoproteínas (membranas plasmáticas), por proteínas fibrosas (colágeno) y globulares (nucleoproteínas).
* Etanol
* Metanol
* Acetona - No coagulantes: interaccionan con sitios químicos de las macromoléculas tisulares para establecer uniones que originan una malla que las entrelaza.
La fijación se produce por deshidratación.
*Paraformaldehído
* Formaldehído
* Glutaraldehído
Métodos principales de inclusión:
- Congelación
Cortes de forma directa utilizando un criostato.
Las muestras se incluyen en parafina y requieren de un paso previo de deshidratación. - Inclusión.
Permite obtener cortes finos y homogéneos (consistencia y uniformidad)
Debe ser líquido que posteriormente se solidifique de manera homogénea
