1 Flashcards
Kako delimo parazitološke preiskave?
Na tiste, ki jih opravljamo na živih živalih in tiste, ki jih izvajamo na truplih.
Katere vzorce lahko za parazitološke preiskave vzamemo na živih živalih?
-iztrebki
-kri
-urin
-kožni ostružki / dlaka / perje / volna
-različni tankoigelni aspirati
Katere vzorce lahko za parazitološke preiskave vzamemo na mrtvih živalih?
-iztrebki ali vsebina prebavil
-urin
-kri
-organi in odtisi organov
-koža
-mišičnina
Kateri podatki morajo biti v prilogi ki spremlja vzorec?
Podatki o:
-lastniku
-vrsti vzorca
-starosti živali
-plačniku
-anamneza
-želena parazitološka preiskava
Kaj je anamneza?
V anamnezi opišemo klinične znake (driska, bruhanje, kašljanje, hujšanje…) in koliko časa trajajo, kako ogosto se pojavljajo. Dobro je napisati v kakšnih pogojih živi žival, če je bila nedavno na potovanju in če je bila zdravljena s katerimi zdravili.
Kako odvzemamo iztrebke za vzorec?
Kako hranimo sveže vzorce pred pošiljanjem?
Najbolj primerni so čim bolj sveži iztrebki. Pri malih živalih jih poberemo iz tal z vrečko/lopatko in ga prenesemo v posodico / pustimo v vrečki.
Pri govedu / konjih je vzorec treba odvzeti vzorec rektalno z rokavico. Iz tal ne jemljemo ker so lahko v iztrebku prostoživeči nematodi.
Pri skupinskih vzorcih od vsake živali vzamemo enako količino iztrebka in vse skupaj hmogeiziramo v večji posodi. Premešano prenesemo v manjšo posodo do 0,5kg vzorca.
Pri pticah čez noč / nekaj ur v kletki pustimo A4 papir. Iztrebke prenesemo v posodo / vrečko skupaj s papirjem.
Sveže vzorce hranimo na 4°C.
Prisotnost česa iščemo s koprološkimi metodami
-jajčec in odrivkov ciklofilnih trakulj (cestoda)
-jajčec in ličink valjastih črvov (nematodov)
-jajčec ježerilcev (acantocephala)
-jajčec sesačev (trematoda)
-oocist kokcidij ali razvojnih oblik drugih protozojev
Kaj naredimo v makroskopskem pregledu?
Podrobno pregledamo iztrebek in ocenimo:
-konsistenco (penasta, kašasta, čvrsta, vodena, pastasta)
-primesi (sluz, kri)
-morebitne odrivke trakulj (velikosti riža, semena kumaric, sluzaste strukture)
-odrasle zajedavce ali razvojne oblike
Če opazimo kaj od naštetega prenesemo vzorc na predmetnico, dodamo kapljo vode/ mlečne kisline in pogledamo pod mikroskopom.
Pri trakuljah ne smemo dodati mlečne kisline, ker imajo v parenhimi kalcijeva zrna ki se začnejo raztapljati in peniti.
Kdaj naredimo nativni preparat?
Ko je v iztrebku veliko jajčec ali oocist ali je iztrebka izredno malo (ptice). Pri različnih brisih (rektalni, bris kljunske votline, golše…)
Kako naredimo nativni preparat
Na predmetnico preneseš 2 g iztrebka, dodaš s kapalko kapljico vode, premešaš na predmetnici, pokriješ s krovnim stekelcem. Opazuješ pod mikroskopom na 100X-400X povečavi.
Katere koprološke metode poznamo?
MAKROSKOPSKI PREGLED
NATIVNI PREGLED ALI NATIVNI PREPARAT
SEDIMENTACIJSKA METODA ALI SEDIMENTACIJA
FLOTACIJSKA METODA ALI FLOTACIJA
METODA McMASTER
METODA PO VAJDI
METODA PO BAERMANNU
KOPROKULTURE
PREISKAVE NA PRISOTNOST PROTOZOJEV - SAF METODA, Modificirano barvanje po Ziehl-Neelsenu
Kaj je sedimentacijska metoda?
Metoda za dokaz težkih jajčec v iztrebku s specifično težo 1.3. Iztrebek razpršimo skozi mrežico v čašo. Prelijemo z obično hladno vodo, počakamo na sedimentacijo. Odlijemo vodo. Ponovimo 4-5x. Supernatant odliješ; sediment preliješ v petrijevko. Pregledaš pod mikroskopom.
Kaj je flotacijska metoda? Kaj uporabimo?
Z njo ugotavljamo prisotnost lahkih jajčec ali oocist (specifična teža manj kot 1,2).
Uporabimo nasičene raztopine NaCl, sladkorja, Zn Cl2 (cinkov klorid), MgSO4 (magnezijev sulfat).
V teh raztopinah jajčeca lebdijo (gredo na površino). Z ezo jih prenesemo na predmetno stekelce.
Kaj je metoda McMaster
temelji na flotacijski metodi.
V raztopino damo 3g kakca. Na terenu je modificirano tko da mamo plastično posodico k ma 2 oznaki (42 in 45 ml). Vsebino precedimo skozi mrežico in lij v drugo posodo. S kapalko damo v komoro mcmaster, počakamo da jajčeca flotirajo. Preštejemo jajčeca pod mikroskopom (ločeno različne vrste).
Št. jajčec pomnožimo s 100 oz. s 50 če preštejemo v obeh komorah.
Kaj dokazujemo z metodo po vajdi? Katera lastnost omogoči metodo? Kako jo izvedemo?
Ličinke (L1) pljučnih črvov divjih prežvekovalcev in drobnice. Dokazujemo ličinke pljučnih črvov družin Dyctiocaulidae in Protostronglydae.
Termotropizem ličink.
Čvrst iztrebek daš na predmetnico, dodaš kaplje tople vode, počakaš 5-10 min. Odstraniš iztrebek s pinceto. Mikroskopiraš.
Našli smo d. fillaria
Katere parazite lahko dokažemo s sedimentacijsko metodo?
-jajčeca digenih sesačev: paramfistomum cervi, dicrocoelium dendriticum, fasciola hepatica
-jajčeca ježerilcev
-jajčeca pljučnih zajedavcev iz družine metastronglydae pri prašičih
-večje oociste kokcidijev (prežvekovalci, konji)
-jajčeca trakulj
Katere parazite lahko dokažemo s flotacijsko metodo?
-jajčeca nematodov = valjastih črvov (razen metastronglydov)
-oociste kokcidijev (eimeria sp., isospora sp., sarkocystis sp.)
-jajčeca razpadlih odrivkov trakulj v prebavilih (taenija sp., moniezija sp.)
Opiši barvanje po ZN. Kaj dokažemo?
-Razmaz iztrebka ki ji bil posušen na zraku fiksiramo z metanolom (96%) za 5 min in posušimo. Od spodaj gremo čez predmetnico s plamenom.
-Barvamo 25 min s karbol fuksinom, speremo s tekočo vodo.
-Prelijemo z 2% H2SO4, pustimo delovati 1 min. Spet speremo s tekočo vodo.
-10 min barvamo z metilenskim modrilom (1%). Speremo s tekočo vodo, sušimo na zraku.
Dokažemo oociste protozoa cryptosporidium sp. Oociste so rožnate; gledamo pod 600X-100X povečavo.
Kaj dokazujemo z metodo po Baermanu?
Kako jo izvedemo?
L1 ličinke pljučnih črvov in L3 ličinke želodčno-črevesnih zajedalcev družine Dyctiocaullidae (Dyctiocaulus fillaria: drobnica, gumbek spredaj, Dyctiocaulus vivipaurus: govedo) in družine Protostrongylidae (Prtotostrongylus: valovit rep, Metastrongylus: valovit rep, ostroga)-drobnica.
Izvedemo jo z Baermanovim aparatom (v gazo damo 10-20 g iztrebka, prelijemo lij s toplo vodo (40°C), prekrijemo z alufolijo, pustimo čez noč, daslednji dan odpremo zatišček in voda z ličinkami gre v petrijevko.
Kaj so koprokulture? Katere družine parazitov dokazujemo?
Koprološke metode v katerih razvijemo iz jajčec želodčno-črevesnih zajedavcev najprej L1ličinke ki se po dveh levitvah preobrazijo v invazijske L3 ličinke za lažje prepoznavanje.
Dokazujemo L3 ličinke Trichostrongylidae, Strongylidae, Ancylostomides, vrste Strongyloides.
Opiši koprokulturo po Volkenbergu
Za iztrebke goveda (neformirani). Če so preredki dodamo oglje / sterilizirane čvrstejše iztrebke.
Na dno večje petrijevke damo vlažen filtrirni papir in nanj iztrebke. Damo inkubirat v teermostat na 26°C za 6 dni. Papir prenesemo v Baermanov aparat…
Opiši koprokulturo po O’Sullivanu
Za formirane iztrebke.
Dve stekleni posodi, manjša gre v večjo. V manjši iztrebek na vlažnem papirju, v večji voda. V manjši posodi iztrebki do vrha. Posodi pokrijemo s plastiko (preluknjana). Inkubiramo v termostatu 6 dni na 26°C (L3 ličinke potujejo vetrikalno). Po inkubaciji damo na svetlobo za 30’ da migrirajo lateralno. L3 ličinke pridejo v vodo->sedimentiramo/centrifugiramo.
Opiši koprokulturo po Haradi in Moori
Za iztrebke psov (zajedavce družine Ancylostomidae). Namen je ločiti med ličinko Ancylostoma caninum (povzroča zoonozo Larva migrans cutanea) in manj patogeno Uncinaria stenocephala.
Dve epruveti (voda, iztrebek na vlažen papir); inkubiramo 8 dni na 28°C. Larve preidejo v vodo.
Kdaj uporabimo SAF metodo? Kaj je ta metoda?
Za dokaz trofozoitov in cist Giardie sp. v iztrebkih.
SAF raztopina je sestavljena iz S= sodium acetate (natrijev acetat), A = acetic acid (oceetna), F = formalina in vode.
Iztrebku (2-5g) dodamo SAF reagent; premešamo, precedimo skozi gazo in lij v epruveto. Centrifugiramo. Odlijemo supernatant. Dodamo fiziološko raztopino n eter. Centrifugiramo. Posrkas supernatant s kapalko, sediment mikroskopiraš.
