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A101 Intro Pato 25 > 06 Estudios y Técnicas Especiales > Flashcards

06 Estudios y Técnicas Especiales Flashcards

1
Q

Estudios y técnicas especiales - Mas comunes -

A
  1. Histoquímica.
  2. Inmunohistoquímica.
  3. Inmunofluorescencia.
  4. Microscopía electrónica.
  5. Biología molecular.
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2
Q

Estudios y técnicas especiales - Menos comunes .

A
  1. Cultivo de tejidos.
  2. Histometría.
  3. EDAX,
  4. Citometría de flujo.
  5. Citogenética.
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3
Q

Histoquímica - Objetivo -

A

Teñir una laminilla con un color que permita destacar un constituyente tisular o celular específico.

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4
Q

Tinción de PAS - Principales usos .

A
  1. Glucógeno (utilizando diastasa).
  2. Mucosubstancias neutras.
  3. Membranas basales.
  4. Muchos hongos y parásitos.
  5. Cristales intracitoplásmicos del SAPB,
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5
Q

Tinciones para microorganismos - De mayor uso .

A
  1. Gram: bacterias,
  2. Brown and Brenn: bacterias,
  3. Ziehl – Neelsen (ZN): BAAR,
  4. Grocott: hongos,
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6
Q

Tinciones Argentafines y Argirófilas - Diferencia y ejemplos -

A
  1. Argentafin (el tejido puede reducir la plata), p. ej. Fontana Masson - melanina.
  2. Argirófila (requiere un reductor externo como hidroquinona), p. ej. Grimelius - gránulos neurosecretores.
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7
Q

Tinciones para amiloide - Principales ejemplos .

A
  1. Rojo congo,
  2. Azul alciano sulfatado.
  3. Cristal Violeta.
  4. Tioflavina,
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8
Q

Tricrómicas - Ejemplo y resultados -

A

Músculo Tej. conectivo
Masson Rojo Azul
Gomori Rojo Verde
Gallego Verde claro Verde oscuro

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9
Q

Tinciones para Moco - Ejemplos de acuerdo al pH -

A
  1. Neutros: PAS.
  2. Ligeramente ácidos:
    - Azul Alciano.
  3. Ácidos:
    - AA pH 1.
    - Hierro coloidal.
    - Mucicarmin de Mayer.
  4. PAS - AA.
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10
Q

Otras tinciones de histoquímica - Ejemplos y usos -

A
  1. Perls - hemosiderina.
  2. Von Kossa - calcio.
  3. Rojo Oleoso - lípidos neutros.
  4. Verhoeff van Gieson - fibras elásticas.
  5. Luxol fast blue - mielina.
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11
Q

Inmunohistoquímica (inmunología + histología) - Objetivos -

A
  1. Determinar si un tejido expresa (ó no expresa) determinado antígeno.
  2. Determinar el estado antigénico de células en particular, dentro de un tejido y la localización microanatómica de dicho antígeno.
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12
Q

Inmunohistoquímica - Requisitos -

A
  1. Inicialmente tejido en fresco; actualmente fijado en formol (< 24 hrs.), embebido en parafina.
  2. Control positivo y control negativo (se substituye el Ac primario con diluyente o un Ac irrelevante)
  3. No tinción de fondo.
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13
Q

Inmunohistoquímica - Ejemplos de Ac -

A
  1. Hormonas: ACTH, calcitonina, progesterona.
  2. Receptores: estrógenos, progesterona.
  3. Componentes tisulares: laminina, colágenas.
  4. Componentes celulares: mioglobina, actina, queratinas, enolasa, sinaptofisina.
  5. Agentes infecciosos: herpes I y II, CMV, clamidia, tricomonas, micobaterias, VPH.
  6. Ag. leucocitarios: CD 1 a 78.
  7. Oncogenes: bcl-2, p53.
  8. Proliferación nuclear: Ki67, PCNA,
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14
Q

Inmunofluorescencia - Generalidades -

A
  1. Tejido en fresco.
  2. Permite localizar moléculas antigénicas.
  3. Se utilizan Ac específicos (IgA, IgG, IgM, C1q, fibrinógeno, etc.).
  4. Se utiliza un fluorocromo visible con luz ultravioleta.
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15
Q

Inmunofluorescencia - Principales indicaciones .

A
  1. Detección de autoAc.
  2. Detección de depósitos de Ig, complemento y fibrina.
  3. Dx. específico de enf. infecciosas.
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16
Q

Microscopio óptico - Tipos -

A
  1. De Campo Claro (convencional, de rutina, de trabajo).
  2. De Campo Obscuro.
  3. De Contraste de Fases.
  4. De Luz Polarizada.
  5. De Luz Ultravioleta.
17
Q

Microscopio óptico - De campo claro .

A
  1. Inventado por Zacharias Janssen en 1590 ??
  2. Perfeccionado por Anton van Leeuwenhoek en el siglo XVII.
18
Q

Microscopio Confocal .

A

Es un microscopio de fluorescencia.
Utiliza iluminación puntual y un “pinhole” en un plano óptico conjugado en frente del detector para eliminar la información que está fuera del plano focal.
Puesto que sólo se ilumina un punto cada vez, se requiere una exploración (scanning) sobre un “raster” regular en el espécimen para obtener imágenes bi o tridimensionales.

19
Q

Microscopio electrónico - Historia / Costo -

A
  1. Mayor uso de 1960 a 1985 aprox.
  2. Alto costo del equipo y del procedimiento.
  3. Mucho tiempo en la preparación de muestras.
20
Q

Microscopio electrónico- Magnificación / Tipos -

A

40 – 600,000x
(mayor uso de 2,000 a 10,000).

Transmisión y Barrido (superficie).

21
Q

Microscopio electrónico - Principales aplicaciones .

A
  1. BX. renal.
  2. Tumores de histogénesis incierta.
  3. Microorganismos.
  4. Enfermedades por almacenamiento.
  5. Cardiotoxicidad por medicamentos,
22
Q

Microscopía electrónica - Aplicaciones especiales -

A
  1. EDAX.
  2. Inmuno electro microscopía (Inmunoelectrónica): oro, peroxidasa, ferritina.
  3. Criofractura.
23
Q

Microscopía electrónica - Preparación de la muestra (3) -

A

1- Tamaño: menos de 1 mm.
2- Fijación: glutaraldehído ó gluta-formol.
3- Impregnación con metales pesados: osmio y uranio.

24
Q

Biología molecular - Concepto (5) .

A

Técnicas de laboratorio para:
1. Aislar ADN o extraerlo en alta pureza.
2. Visualizarlo (ver su estado).
3. Cortarlo y pegarlo (Ing. genética).
4. Amplificar una región en una enorme cantidad de moléculas (p.ej. PCR).
5. Corte de una región con enzimas de restricción (para ver si por una mutación se gana o se pierde un sitio de restricción).

25
Q

PCR (reacción en cadena de la polimerasa) - Generalidades -

A
  1. Produce millones de copias de una secuencia de DNA en pocas horas, también puede usarse para amplificar RNA.
  2. Tejido fijado en formol, embebido en parafina.
26
Q

PCR - Usos en patología tumoral .

A
  1. Determinar la clonalidad de proliferaciones de células T ó B.
  2. Detección de translocaciones cromosómicas.
  3. Detección de mutaciones puntuales.
  4. Anormalidades en genes supresores de tumores (Rb y p53).
  5. Amplificación de genes como N-myc (neuroblastoma) y c-erbB2 (ca. de mama).
  6. Detección de virus relacionados a infecciones o tumores.
27
Q

Citogenética - Usos mas frecuentes -

A

Estudio del cariotipo de tumores:
- Leucemias y linfomas.
- Tumores germinales.
- Neoplasias mesenquimatosas.

Estudio de abortos y RN malformados.

28
Q

Hibridación in situ fluorescente (FISH)

A

Utiliza sondas de ADN que reconocen secuencias específicas frente a regiones particulares del cromosoma y se marcan con colorantes fluorescentes.

29
Q

Cultivo de Tejidos - Concepto -

A

Conjunto de técnicas que permiten mantener células in vitro con una gran aproximación a sus propiedades y funciones in vivo.

30
Q

Cultivo de Tejidos - Principales ejemplos -

A
  1. Epiteliales
  2. Tejido conjuntivo
  3. Tejido muscular
  4. Tejido nervioso
  5. Sangre y tejidos linfoides
  6. Células madre embrionarias
31
Q

Cultivo de Tejidos - Generalidades (2) -

A

Algunas células tumorales expresan características de diferenciación in vitro que no hacen in vivo (neuroblastoma, melanoma amelánico, etc.).

Difícil y caro.

32
Q

Histometría - Propósito, tipos y usos -

A

Efectuar mediciones objetivas utilizando una computadora.

Morfometría y Densitometría (espectofotometría).

Usos: Macro y Micro.

33
Q

Citometría de flujo - Generalidades (2) -

A

Medición de varios parámetros en una suspensión de células que fluyen (5,000 a 10,000 x seg.) a través de un haz de luz (usualmente laser) y detectores estacionarios.
Posteriormente: digitalizados, almacenados y analizados por una computadora para producir un histograma.

34
Q

Citometría de flujo - Características celulares evaluables (6) -

A
  1. Tamaño celular.
  2. Granularidad citoplásmica.
  3. Viabilidad celular.
  4. Fase del ciclo celular.
  5. Contenido de DNA (ploidía).
  6. Contenido enzimático.

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